Wirkung der Pharmakogenetik auf den Plasmaspiegel und das Ansprechen von Imatinib

Einführung:

Chronische myeloische Leukämie (CML) ist eine myeloproliferative Erkrankung mit einer Inzidenz von ein bis zwei Fällen pro 100.000 Erwachsene. Sie macht etwa 15 % der neu diagnostizierten Leukämiefälle bei Erwachsenen aus.

Die Einführung von Imatinib, dem Tyrosinkinase-Inhibitor (TKI), im frühen 21. Jahrhundert gilt als Durchbruch in der Behandlung von CML. Bei der überwiegenden Mehrheit der Patienten induziert die Behandlung mit Imatinib zytogenetische und sogar molekulare Reaktionen mit sehr niedrigen oder nicht nachweisbaren BCR-ABL1-Transkriptspiegeln. Diese Patienten bleiben frei von einer Progression in eine Blastenkrise. Allerdings heilt Imatinib die Krankheit nicht, da es die leukämischen Stammzellen nicht ausrotten kann und somit ein potenzielles Reservoir für Rückfälle darstellt.

Trotz seiner Wirksamkeit und seines günstigen pharmakokinetischen Profils gibt es eine große interindividuelle Variabilität der Imatinib-Plasmakonzentrationen, die zu einem Therapieversagen und einer Krankheitsprogression führen kann.

Polymorphismen in Genen, die mit der Absorption, Verteilung, dem Metabolismus und der Ausscheidung von Imatinib zusammenhängen, können die Bioverfügbarkeit und folglich das Ansprechen auf das Arzneimittel beeinflussen.

Ziel der Studie:

Die Studie zielt darauf ab, die mögliche Wirkung genetischer Polymorphismen in bestimmten metabolisierenden Enzymen [CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 und rs 10509681)] und Membrantransportern [ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) zu untersuchen. und SLC22A1 1222 A > G (rs 628031)] auf den Plasmaspiegel und das molekulare Ansprechen (MMR) von Imatinib bei Patienten mit CML.

Diese Polymorphismen wurden aufgrund ihrer Relevanz für die Pharmakokinetik von Imatinib und ihrer Häufigkeit bei Kaukasiern ausgewählt.

Die Studie zielt auch darauf ab, CML-Patienten eine personalisierte Behandlungsoption zu bieten, wodurch wahrscheinlich das Ansprechen verbessert und die Nebenwirkungen reduziert werden.

Patienten und Methoden:

Patienten:

In die Studie werden Patienten mit dokumentierter hämatologischer, zytogenetischer und molekularer Diagnose einer CML in der chronischen Phase aufgenommen, die in der Abteilung für medizinische Onkologie des South Egypt Cancer Institute (SECI) mindestens 12 Monate lang kontinuierlich mit einer oralen Dosis von 400 mg Imatinib pro Tag behandelt werden. Assiut. Ägypten.

Ausschlusskriterien sind: Dauer der Imatinib-Therapie von weniger als 12 Monaten, schlechte Therapietreue und Identifizierung von Genmutation(en) in der Kinasedomäne von BCR-ABL1.

Die Patienten werden gemäß ihrer molekularen Reaktion auf Imatinib wie folgt in 2 Gruppen eingeteilt:

Gruppe I: CML-Patienten mit MMR Gruppe II: CML-Patienten ohne MMR Patienten in beiden Gruppen werden hinsichtlich des Plasmaspiegels von Imatinib und der ausgewählten genetischen Polymorphismen verglichen.

Methoden:

Blutprobe:

Drei Blutproben (jeweils 3 ml) werden durch Venenpunktion in EDTA-haltige Röhrchen zur Messung des Imatinib-Plasmaspiegels, zur Messung des BCR-ABL1-Transkriptionsspiegels und zur Genotypisierung entnommen.

Messung des Talspiegels von Imatinib:

Blutproben werden 24 Stunden nach der vorherigen Dosis (Minimalwert) und nach mindestens 5 Tagen regelmäßiger Anwendung des Arzneimittels entnommen, um sicherzustellen, dass der Steady State erreicht ist. Innerhalb von 1 Stunde nach der Entnahme werden die Blutproben bei 3.000 U/min für 10 Minuten bei Raumtemperatur zentrifugiert und bis zur Analyse bei -20 °C gelagert.

Der Plasmaspiegel von Imatinib wird durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie mit UV-Detektion (HPLC-UV) gemäß dem von Barratt et al. beschriebenen Verfahren gemessen.

Messung des BCR-ABL1-Transkriptionslevels:

Gesamt-RNA wird mit den verfügbaren RNA-Extraktionskits aus peripheren Blutleukozyten extrahiert. Das BCR-ABL1-Transkriptionsniveau wird mithilfe einer Echtzeit-PCR-Analyse (Polymerase-Kettenreaktion) quantifiziert, um das molekulare Ansprechen auf Imatinib nach 12-monatiger Behandlung mit Imatinib zu beurteilen.

Genotypisierung:

Die DNA wird mit den verfügbaren DNA-Extraktionskits aus Leukozyten extrahiert und bis zur Genotypisierung bei -80 °C gelagert.

Genotypisierung wird für CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 und rs 10509681), ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) und SLC22A1 1222 A > G (rs 628031) durch die PCR durchgeführt