A melatonina apoia o tratamento periodontal não cirúrgico em pacientes com diabetes tipo 2 e periodontite

Aprovação ética Este estudo clínico duplo-cego e randomizado controlado foi realizado em 55 pacientes com DM tipo 2 e periodontite que se inscreveram na Clínica de Periodontologia da Faculdade de Odontologia da Universidade Recep Tayyip Erdoğan entre 2021/fevereiro e 2022/janeiro e cumpriram os requisitos critérios de estudo. A aprovação ética foi dada pelo Comitê de Ética em Pesquisa Clínica da Faculdade de Medicina da mesma universidade no âmbito da Declaração de Helsinki (2008) (2022/03). Os possíveis riscos e benefícios do tratamento a ser aplicado aos participantes foram mencionados e seus consentimentos verbais e por escrito foram obtidos.

Grupos de trabalho De acordo com a OMS, em indivíduos na categoria de idade jovem, o "estágio 3/4 da periodontite" foi determinado de acordo com a doença periodontal atual e a classificação da condição como critério diagnóstico para periodontite. Consequentemente, a profundidade da bolsa de sondagem (PPD) deve ser de pelo menos 6 mm e a perda óssea deve ser de pelo menos 3 mm. Nossos critérios diagnósticos para DM tipo 2 foram níveis de glicose plasmática em jejum (FPG) superiores a 126 mg/dl e níveis de hemoglobina glicosilada (HbA1c) superiores a 6,5%. Fumantes, usuários de antibióticos, anti-inflamatórios e antioxidantes nos últimos 6 meses, trabalhadores noturnos, gestantes e lactantes, portadores de câncer e doenças autoimunes, portadores de doença renal, que fizeram algum tratamento periodontal nos últimos 6 meses obesos pacientes também foram excluídos do estudo. Na Europa, a obesidade é definida como um índice de massa corporal (IMC) superior a 30 kg/m2 e uma circunferência da cintura superior a 88 cm nas mulheres e 102 cm nos homens.

Protocolo de tratamento De acordo com os critérios acima, os pacientes incluídos no estudo foram divididos aleatoriamente em grupos de controle (fmSRP) e tratamento [fmSRP-melatonina (fmSRP-mel)] por um programa de computador por um pesquisador independente (HA). O investigador (YSG), que forneceu a amostra e conduziu os procedimentos clínicos, desconhecia os grupos de estudo. fmSRP é a abordagem para completar os procedimentos de desbridamento supragengival e subgengival em 24 horas com curetas periodontais, raspadores e instrumentos ultrassônicos. A administração adicional de melatonina foi feita na forma de comprimidos contendo 6mg de melatonina diariamente por 30 dias a partir do dia seguinte ao RAR. Os pacientes foram instruídos a tomar os comprimidos antes de dormir. Nenhuma aplicação adicional foi feita no grupo controle. No âmbito do programa de tratamento periodontal não cirúrgico, todos os pacientes foram treinados na escovação dos dentes com a técnica de bass modificada e no uso de ferramentas de limpeza de interface apropriadas. Esses treinamentos foram repetidos nas sessões de manutenção. Os participantes também foram instruídos a não usar qualquer enxaguatório bucal.

Coleta de amostras e medições periodontais clínicas Medições periodontais clínicas com fluido crevicular gengival (GCF) e amostras de soro foram realizadas na linha de base (T0) e no 3º (T1) e 6º meses (T2) após fmSRP. Em todos os três períodos, a amostragem foi feita um dia antes das medições periodontais clínicas.

Amostras GCF foram retiradas das regiões interproximais dos dois dentes com maior perda óssea radiográfica em cada um dos quatro quadrantes da manhã. Inicialmente, o isolamento adequado foi obtido por meio de rolos de algodão. A área foi levemente seca por 10 segundos. Tiras de papel estéril (Periopaper, Proflow, Inc., Amityviile, NY) foram avançadas até que uma resistência mínima fosse sentida no sulco. Esperou 30 segundos. Tiras de papel contaminadas com sangue ou saliva não foram incluídas. O volume GCF em cada tira de papel foi medido usando o dispositivo periotron (Periotron 8010 Harco Electronics, Winnipeg, Canadá) pelo método de compedância elétrica e registrado como µl. Imediatamente após, 8 tiras de papel obtidas de cada paciente foram transferidas para um tubo eppendorf contendo 250 µl de solução tampão fosfato. Foi armazenado em freezer a -80°C (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA) até o dia da análise bioquímica.

Imediatamente após as amostras GCF, amostras de sangue venoso de 16 cc foram coletadas da região da fossa antecubital do braço esquerdo dos pacientes. Após centrifugação do sangue a 3.000 rpm a 2-8oC por 15 minutos, foram obtidas amostras de soro (Elektro-mag, Istambul, Turquia). As amostras foram colocadas em tubos Eppendorf e mantidas em freezer a -80°C (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA) até o dia da análise.

O índice de placa (PI), índice gengival (GI), sangramento à sondagem (BOP), PPD e medições do nível de inserção clínica (CAL) foram realizadas para avaliações clínicas do estado periodontal. PPD foi medido como a distância entre o ponto mais profundo do sulco e a margem gengival, e CAL como a distância entre o ponto mais profundo do sulco e a junção esmalte-cemento. A pontuação para cada dente foi feita a partir de 6 regiões diferentes para PPD e CAL, e de 4 regiões diferentes para outros índices. A sonda periodontal de Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, EUA) foi usada para medições.

Análise Bioquímica Tubos Eppendorf, que foram retirados do freezer 24 horas antes do experimento, foram descongelados gradualmente, primeiro a -20oC e depois a +4oC. As amostras e os reagentes foram levados à temperatura ambiente (18-25oC) imediatamente antes da análise. Análises RANKL (Nº de catálogo: E-EL-H5813), OPG (Nº de catálogo: E-EL-H1341) e MMP-8 (Nº de catálogo: E-EL-H1450) em amostras GCF, IL-1ß (Nº de catálogo: E - EL-H0149) foram realizadas análises em amostras de soro usando o método de ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) e de acordo com as instruções do fabricante do kit (Elabscience, Houston, Texas, EUA). Os resultados foram calculados como ng/ml (MMP-8) e pg/ml (IL-1β, RANKL e OPG).

Análise estatística Windows 17.0 para o programa SPSS foi usado para análise estatística. (SPSS Inc., Chicago, EUA) A conformidade dos dados com a distribuição normal foi avaliada com o teste de Shapiro Wilk. O teste U de Mann Whitney foi usado para comparações intergrupos, e os testes de Friedman, Wilxocon e correção de Bonferroni foram usados ​​para a análise de mudanças intragrupo dependentes do tempo. O teste qui-quadrado foi aplicado para comparação entre os grupos quanto ao gênero. Um nível de p<0,05 foi considerado estatisticamente significativo.