La melatonina supporta il trattamento parodontale non chirurgico nei pazienti con diabete di tipo 2 e parodontite

Approvazione etica Questo studio clinico controllato, in doppio cieco e randomizzato è stato condotto su 55 pazienti con DM di tipo 2 e parodontite che hanno presentato domanda presso la Clinica di parodontologia della Facoltà di Odontoiatria dell'Università Recep Tayyip Erdoğan tra il 2021/febbraio e il 2022/gennaio e hanno incontrato il criteri di studio. L'approvazione etica è stata data dal Comitato Etico della Ricerca Clinica della Facoltà di Medicina della stessa università nell'ambito della Dichiarazione di Helsinki (2008) (2022/03). Sono stati menzionati i possibili rischi e benefici del trattamento da applicare ai partecipanti e sono stati ottenuti i loro consensi verbali e scritti.

Gruppi di lavoro Secondo l'OMS, negli individui nella categoria della giovane età, la "parodontite di stadio 3/4" è stata determinata in base all'attuale classificazione della malattia parodontale e della condizione come criterio diagnostico per la parodontite. Di conseguenza, la profondità di sondaggio della tasca (PPD) deve essere di almeno 6 mm e la perdita ossea deve essere di almeno 3 mm. I nostri criteri diagnostici per il DM di tipo 2 erano livelli di glucosio plasmatico a digiuno (FPG) superiori a 126 mg/dl e livelli di emoglobina glicosilata (HbA1c) superiori al 6,5%. Coloro che fumano, fanno uso di antibiotici, farmaci antinfiammatori e antiossidanti negli ultimi 6 mesi, fanno turni notturni, sono in gravidanza e allattamento, hanno tumori e malattie autoimmuni, hanno malattie renali, hanno ricevuto qualsiasi trattamento parodontale negli ultimi 6 mesi obesi anche i pazienti sono stati esclusi dallo studio. In Europa, l'obesità è definita come un indice di massa corporea (BMI) superiore a 30 kg/m2 e una circonferenza della vita superiore a 88 cm nelle donne e 102 cm negli uomini.

Protocollo di trattamento Secondo i criteri di cui sopra, i pazienti inclusi nello studio sono stati divisi casualmente in gruppi di controllo (fmSRP) e di trattamento [fmSRP-melatonina (fmSRP-mel)] da un programma per computer da un ricercatore indipendente (HA). L'investigatore (YSG), che ha fornito il campione e condotto le procedure cliniche, era cieco rispetto ai gruppi di studio. fmSRP è l'approccio per completare le procedure di sbrigliamento sopragengivale e sottogengivale entro 24 ore con curette parodontali, scaler e strumenti a ultrasuoni. La somministrazione aggiuntiva di melatonina è stata effettuata sotto forma di compresse contenenti 6 mg di melatonina al giorno per 30 giorni a partire dal giorno successivo all'SRP. I pazienti sono stati istruiti a prendere le compresse appena prima di coricarsi. Nessuna domanda aggiuntiva è stata presentata nel gruppo di controllo. Nell'ambito del programma di trattamento parodontale non chirurgico, tutti i pazienti sono stati addestrati a lavarsi i denti con la tecnica di basso modificata e all'uso di strumenti appropriati per la pulizia dell'interfaccia. Questi corsi di formazione sono stati ripetuti nelle sessioni di mantenimento. I partecipanti sono stati anche istruiti a non usare alcun collutorio.

Raccolta dei campioni e misurazioni parodontali cliniche Le misurazioni parodontali cliniche con fluido crevicolare gengivale (GCF) e campioni di siero sono state eseguite al basale (T0) e al 3° (T1) e 6° mese (T2) dopo fmSRP. In tutti e tre i periodi, il campionamento è stato effettuato un giorno prima delle misurazioni parodontali cliniche.

I campioni GCF sono stati prelevati dalle regioni interprossimali dei due denti con la maggior perdita ossea radiografica in ciascuno dei quattro quadranti al mattino. Inizialmente, il corretto isolamento veniva ottenuto mediante rulli di cotone. L'area è stata leggermente asciugata per 10 secondi. Strisce di carta sterili (Periopaper, Proflow, Inc., Amityviile, NY) sono state fatte avanzare finché non si è avvertita una resistenza minima nel solco. Ho aspettato 30 secondi. Le strisce di carta contaminate da sangue o saliva non sono state incluse. Il volume GCF in ciascuna striscia di carta è stato misurato utilizzando il dispositivo periotron (Periotron 8010 Harco Electronics, Winnipeg, Canada) mediante il metodo della compedenza elettrica e registrato come µl. Subito dopo, 8 strisce di carta ottenute da ciascun paziente sono state trasferite in una provetta eppendorf contenente 250 µl di soluzione tampone fosfato. È stato conservato in un congelatore a -80°C (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) fino al giorno dell'analisi biochimica.

Immediatamente dopo i campioni GCF, sono stati prelevati campioni di sangue venoso da 16 cc dalla regione della fossa antecubitale del braccio sinistro dei pazienti. Dopo che il sangue è stato centrifugato a 3000 rpm a 2-8°C per 15 minuti, sono stati prelevati campioni di siero (Elektro-mag, Istanbul, Turchia). I campioni sono stati prelevati in provette Eppendorf e conservati in un congelatore a -80°C (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) fino al giorno dell'analisi.

Le misurazioni dell'indice di placca (PI), dell'indice gengivale (GI), del sanguinamento al sondaggio (BOP), della PPD e del livello di attacco clinico (CAL) sono state eseguite per le valutazioni cliniche dello stato parodontale. PPD è stata misurata come la distanza tra il punto più profondo del solco e il margine gengivale e CAL come la distanza tra il punto più profondo del solco e la giunzione smalto-cemento. Il punteggio per ciascun dente è stato ottenuto da 6 diverse regioni per PPD e CAL e da 4 diverse regioni per altri indici. Per le misurazioni è stata utilizzata la sonda parodontale Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA).

Analisi biochimica Le provette Eppendorf, che sono state rimosse dal congelatore 24 ore prima dell'esperimento, sono state lasciate scongelare gradualmente, prima a -20°C e poi a +4°C. I campioni ei reagenti sono stati portati a temperatura ambiente (18-25°C) appena prima dell'analisi. Analisi RANKL (n. di catalogo: E-EL-H5813), OPG (n. di catalogo: E-EL-H1341) e MMP-8 (n. di catalogo: E-EL-H1450) in campioni GCF, IL-1ß (n. di catalogo: E - EL-H0149) sono state eseguite su campioni di siero utilizzando il metodo ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) e secondo le istruzioni del produttore del kit (Elabscience, Houston, Texas, USA). I risultati sono stati calcolati come ng/ml (MMP-8) e pg/ml (IL-1β, RANKL e OPG).

Analisi statistica Windows 17.0 per il programma SPSS è stato utilizzato per l'analisi statistica. (SPSS Inc., Chicago, USA) La conformità dei dati alla distribuzione normale è stata valutata con il test di Shapiro Wilk. Il test U di Mann Whitney è stato utilizzato per i confronti tra gruppi, mentre i test di Friedman, Wilxocon e la correzione di Bonferroni sono stati utilizzati per l'analisi dei cambiamenti dipendenti dal tempo all'interno del gruppo. Il test del chi-quadrato è stato applicato per il confronto tra i gruppi in termini di sesso. Un livello p<0,05 è stato considerato statisticamente significativo.