Exenatid (Byetta ®) Regulace produkce částic lipoproteinu ve střevě a v játrech u lidí

Subjekty dostanou infuzi stabilního acetátu obohaceného o izotopy, leucinu a bolusu glycerolu za účelem měření rychlosti syntézy mastných kyselin, obratu apolipoproteinu a triglyceridu. Tato metodologie in vivo stabilního izotopového obohacení byla široce zavedena a používána výzkumníky po celém světě již více než 30 let ke zkoumání metabolismu různých metabolitů u lidí.

Po celonočním hladovění, přibližně v 9 hodin v den 1 studie, bude subjekt přijat do nemocnice a bude mu odebrán vzorek krve o objemu 30 ml nalačno pro analýzu plazmatické glukózy, celkového plazmatického cholesterolu, LDL-cholesterolu, HDL cholesterolu, triglyceridů (TG ), volné mastné kyseliny (FFA), inzulín, GLP-1, růstový hormon, glukagon, obohacení stabilními izotopy a podrobnější analýza složení lipoproteinů bohatých na triglyceridy (TRL) (obsah lipidů a apolipoproteinů). Nosem do žaludku bude zavedena rentgenově neprůhledná polyvinylová trubice (Entriflex NG Tube 55'' [140cm] 10fr Položka č. 8884721055, Kendall Products, Tyco Healthcare, Toronto, ON) s dostatečnou délkou pro migraci hrot do dvanáctníku. Subjektu bude podáváno 10 mg metoklopramidu orálně, aby se usnadnil transport špičky tuby do duodena. Subjektu bude umožněno jíst pravidelná jídla během dne, ale bude půst přes noc po 19:00 a zůstane nalačno po dobu trvání studie. Voda ad lib bude povolena. Přibližně v 15:00 1. dne rentgen břicha potvrdí polohu trubice v duodenu. V 16:00 budou do povrchové žíly na každém předloktí zavedeny 2 iv, jeden pro infuzi a jeden pro odběr vzorků. Infuze 1-13C acetátu (15 g ve sáčku s ½ N fyziologickým roztokem při 32 ml/h) začne po zavedení iv a bude podávána po zbytek studie, což je 27 hodin.

Počínaje ve 4 hodiny ráno se bude podávat infuze syntetické triglyceridové emulze Intralipid (20% roztok, Baxter Canada) přes přívodní trubici do dvanácterníku rychlostí 40 ml/h po dobu trvání experimentu (tj. do 19:00 toho večera). To poskytne ustálený stav nasycení pro následné hodnocení kinetiky přeměny lipoproteinů.

Subjekty dostanou v náhodném pořadí buď exenatid 10 mg nebo ekvivalentní objem fyziologického roztoku subkutánně v 7 hodin ráno v den 2 hospitalizace (tj. v -2 hodiny) během první ze dvou studií. Pankreatická svorka začne v 7:00 (-2 hodiny), bezprostředně po podání buď exenatidu nebo fyziologického roztoku a bude pokračovat během následujících 12 hodin (do 19:00). . Během pankreatické svorky budou subjekty dostávat iv infuzi glukagonu (0,65 ng/kg/min), růstového hormonu (Humatrope, 3,0 ng/kg/min), somatostatinu (sandostatin, 25 µg/h) a inzulínu (Novolin R, 0,05 mU/kg/min).

V 9 hodin (tento časový bod budeme označovat jako 0 hodin studie obratu lipoproteinů) začne studie obratu lipoproteinů. Bude podán iv bolus deuterovaného glycerolu (d5-glycerol, 75 mmol/kg), po kterém bude následovat primární infuze deuterovaného leucinu; d3-leucin (10 mmol/kg bolus následovaný 10 mmol/kg/h po dobu 10 hodin). Vzorky krve budou odebírány před a v pravidelných časových intervalech po dobu 10 hodin po iv bolusu d3-glycerolu a zahájení konstantní infuze d3-leucinu (pro hodnocení kinetiky lipoproteinů). Vzorky krve budou odebrány před (30 ml v -2 h, 10 ml v -1 h a 30 ml v 0 h) a 5 min a 15 min (po 10 ml) a poté po 30 ml v 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h, 6 h (pouze 10 ml), 7 hodin, 8 hodin, 9 hodin a 10 hodin po podání d5-glycerolu a zahájení infuze d3-leucinu.