Morbidität und Mortalität von Hepatitis-E-Virusinfektionen in Belgien

1. Lernziele

   1.1. Hauptziele:

   Untersuchung viraler Faktoren wie gt, Subtyp und Viruslast, die mit der Morbidität und Mortalität von HEV-Infektionen in Belgien in Verbindung stehen.

   1.2. Sekundäre Ziele:

   • Beschreibung von Wirtsfaktoren im Zusammenhang mit der Morbidität und Mortalität von HEV-Infektionen in Belgien.
   • Um unabhängige Wirts- und/oder Virusfaktoren zu finden, die mit der Morbidität und Mortalität von HEV-Infektionen in Belgien in Verbindung stehen.

2. Untersuchungsplan

   2.1. Allgemeines Studiendesign

   Retrospektive Kohortenstudie.

   2.2. Studiendauer, Immatrikulation und Anzahl der Standorte

   Probanden, für die zwischen Januar 2010 und Juni 2018 eine Serumprobe an das Belgische Nationale Referenzzentrum für Virushepatitis Sciensano gesendet wurde, um eine HEV-Infektion zu diagnostizieren.

   2.3. Studienpopulation

   Alle Patienten mit einer bestätigten oder möglichen HEV-Infektion bei Sciensano zwischen Januar 2010 bis einschließlich Juni 2018.

   2.3.1. Einschlusskriterien:

   • HEV-RNA-positiv UND/ODER HEV-Immunglobulin (Ig)M-positiv
   • Laborbestätigung der HEV-Infektion bei Sciensano durchgeführt
   • Alle Altersgruppen werden einbezogen
   • Überweisendes Krankenhaus in Belgien

   2.3.2. Ausschlusskriterien:

   • Keine Bestätigung der bei Sciensano durchgeführten HEV-Serologie UND/ODER Polymerase-Kettenreaktion (PCR).
   • In Belgien nicht diagnostizierte Fälle
   • Fälle ohne Daten zum klinischen Ergebnis

3. Studienablauf

   Überprüfung der Aufzeichnungen. Neubewertung vorhandener Leberbiopsien durch einen fachkundigen Leberpathologen (Prof. Tania Roskams, UZ Leuven).

   3.1. Datenquellen

   In Belgien fungiert Sciensano als nationales Referenzzentrum (NRC) für Virushepatitis. Die meisten dokumentierten HEV-Infektionen in Belgien werden in Sciensano bestätigt und Proben, an denen HEV-Serologie (IgM und IgG), PCR und Genotypisierung durchgeführt wurden, werden in einer Biobank aufbewahrt.

   3.2. Datensammlung

   Ein Fragebogen wird an alle behandelnden Ärzte von Patienten mit HEV-Infektionen in Belgien versandt. Erfolgt keine Antwort, erfolgt eine Mahnung per Post und später per E-Mail. Den behandelnden Ärzten werden verschiedene Möglichkeiten angeboten: den Fragebogen auszufüllen, den Fragebogen telefonisch mit einem Prüfer von Sciensano auszufüllen, die Daten vor Ort durch einen Prüfer von Sciensano erheben zu lassen. Verfügbare Leberbiopsien von bestätigten HEV-Fällen werden von der Pathologieabteilung jedes Zentrums abgerufen und von einem erfahrenen Leberpathologen neu bewertet.

   3.3. Variablen gesammelt

   Demografische Daten:

   Alter und geografische Herkunft. Datum des Auftretens der Symptome, Datum der Diagnose, Datum des Verlusts bis zur Nachsorge / des Todes. Schwangerschaft zum Zeitpunkt der Diagnose. Diabetes mellitus zum Zeitpunkt der Diagnose. Immungeschwächter Status zum Zeitpunkt der Diagnose. Bekannte Zirrhose (Fibroscan / Biopsie / …), hämatologische oder onkologische Erkrankung. Andere Komorbiditäten. Geschichte der Bluttransfusion. Solide Organ- oder Stammzelltransplantation vor der HEV-Infektion, Art des Organs und Datum. Nierenfunktion oder Nierenersatztherapie. Infektion bei anderen Familienmitgliedern. Alkoholkonsum und Anzahl Einheiten pro Woche. Konsum von illegalen Drogen. Auslandsreisen vor der HEV-Infektion und Name des besuchten Landes. Verzehr von Schweinefleisch.

   Behandlungsdaten:

   Behandlung mit Ribavirin. Behandlung mit anderen bekannten/mutmaßlichen antiviralen Therapien. Reduktion der immunsuppressiven Medikation wegen der HEV-Infektion. Abbruch der immunsuppressiven Therapie wegen HEV-Infektion.

   Krankheitsverlauf und Outcome-Daten:

   Akute Hepatitis mit vollständiger Genesung. Leberversagen. Krankenhausaufenthalt. Dauer des Krankenhausaufenthalts in Tagen. Aufnahme in die Intensivstation. Dauer des Krankenhausaufenthalts auf der Intensivstation in Tagen. Varizenblutung. Bakterielle Peritonitis. Hepatische Enzephalopathie. Extrahepatische Manifestationen und Typ. Neurologische Erkrankung und Art. Chronische HEV-Infektion (definiert durch HEV-RNA-positiv für mindestens 3 Monate). Progression zur Zirrhose als Folge einer HEV-Infektion. Lebertransplantation als Folge einer HEV-Infektion und Datum der Transplantation. Tod und Todesdatum. Tod als Folge einer HEV-Infektion. Gesamtdauer der Symptome in Wochen.

   Biochemische Daten:

   HEV-IgM, HEV-IgG, HEV-PCR (quantitativ), HEV-Genotyp und -Subtyp. Die HEV-Genotypisierung wurde durch Sanger-Sequenzierung einer 348-Basenpaar- (zwischen 2010 und 2016) oder einer 493-Basenpaar- (ab 2017) Region von ORF2 durchgeführt. Die erhaltenen Sequenzen wurden mit HEV-Referenzgenomen abgeglichen und zur Genotypzuordnung an HEVnet übermittelt (13). Präsentiert ALT, Peak ALT, Präsentiert AP, Peak AP, Präsentiert Bilirubin, Peak Bilirubin, Präsentiert INR, Peak INR, Präsentiert Albumin, Niedrigstes Albumin, Präsentiert eGFR (CKD-EPI), Niedrigste eGFR (CKD-EPI).

   Bewertung der Leberbiopsie:

   Histologische Einstufung und Staging auf H&E-gefärbten Leberbiopsie-Objektträgern werden verblindet durchgeführt. Ein erfahrener Leberpathologe, der den Infektionsstatus des Patienten nicht kennt, wird die Leberbiopsien bewerten. Die folgenden Parameter werden halbquantitativ von 0-4 bewertet: allgemeine Architektur, lobuläre und portale Entzündung, Vorhandensein von Immunzellen und nekrotischen Zellen, Vorhandensein von Grenzflächen. Jedem Patienten wird ein globaler Score zugewiesen, der die Streuung, den Mittelwert und den Modus der verschiedenen bewerteten Parameter berücksichtigt.

4. Statistischer Analyseplan

Die Merkmale der Patienten werden mit dem Chi-Quadrat-Test für kategoriale Variablen und dem Student-t-Test (Welch-Test bei ungleichen Varianzen oder Wilcoxon-Rang-Summentest bei Nichterfüllung der Normalverteilung) für die kontinuierlichen Variablen analysiert. Numerische Daten werden als Mittelwert und Standardabweichung oder 95 %-Konfidenzintervall dargestellt, während kategorische Daten als Anzahl und Prozentsätze ausgedrückt werden.

Die folgenden unabhängigen Virusvariablen werden definiert: HEV-gt-3-Clade-Typ (abchijklm, efg und ra), Viruslast.

Die folgenden unabhängigen Wirtsvariablen werden aufgrund ihres bekannten Zusammenhangs mit dem Ausgang oder Schweregrad der Erkrankung definiert: Alkoholkonsum, Diabetes, Geschlecht, Alter, Zirrhose und Immunsuppression.

Unterschiede zwischen demografischen Faktoren, Schweregrad der Krankheit (ausgedrückt durch Labordaten und Histologie) und Krankheitsergebnisse (definiert durch Krankenhausaufenthaltsstatus und -dauer, Aufenthalt auf der Intensivstation, chronische Infektion, extrahepatische Manifestationen und Tod) werden für die unabhängigen viralen Variablen mit einer univariaten Analyse analysiert . Eine multivariable lineare oder logistische Regressionsanalyse wird mit abhängigen Variablen durchgeführt, die sich in der univariaten Analyse als signifikant mit den unabhängigen Variablen assoziiert erwiesen haben. Aufgrund des retrospektiven Charakters der Analyse ist eine vorab berechnete Aussagekraft für die Anzahl der eingeschlossenen Patienten für den untersuchten Endpunkt nicht möglich. Statistische Analysen werden mit der Statistiksoftware R oder SAS auf einem Signifikanzniveau von 5 % durchgeführt.