Varhaisten keuhkosyöpäsolujen tunnistaminen primaarista keuhkosyöpää sairastavien potilaiden pahanlaatuisista pleuraeffuusionäytteistä

TAVOITTEET:

• Eristä ja tunnista keuhkosyövän esiastesolut hylätyistä keuhkopussin nestenäytteistä, jotka on saatu rutiininomaisten rintakehänleikkaustoimenpiteiden aikana pahanlaatuisten keuhkopussin effuusioiden diagnosoimiseksi ja hoitamiseksi.

YHTEENVETO: Clevelandin yliopistollisten sairaaloiden patologian osastolta saadut pahanlaatuiset keuhkopussin effuusionäytteet analysoidaan käyttämällä immunomagneettista helmien rikastusmääritystä epiteelialkuperää olevien solujen eristämiseksi. Eristetyt solut värjätään sitten fluoresoivalla DNA:ta sitovalla väriaineella, Hoechst 33342:lla ja muilla markkereilla (eli CD133, CD24/CD44) ja lajitellaan virtaussytometrian avulla progenitori- ja ei-progenitorialapopulaatioihin. Lajitellut alapopulaatiot erotetaan ja tutkitaan toiminnallisesti in vitro ja in vivo -tutkimuksilla. Lajitelluille osapopulaatioille tehdään myös pallokulttuuritutkimuksia. Näytteitä voidaan käyttää myös transkription profilointitutkimuksiin, RNAi-tutkimuksiin sekä pitkäaikaisten viljelmien ja solulinjojen perustamiseen. DNA eristetään ja varastoidaan myös kasvain- ja ei-epiteelisoluista tulevia geneettisiä tutkimuksia varten, jotka koskevat tunnettuja ja tunnistamattomia geneettisiä poikkeavuuksia, jotka edistävät keuhkosyövän kehittymistä, kuten EGFR, ErbB2, K-ras ja p53 mutaatiostatus.