Perfusion de cellules souches mésenchymateuses pour l'infection au COVID-19

Tous les patients recevront 2x10^6 cellules/kg les jours 1 et 7 (si nécessaire). L'étude sera divisée en 2 phases. Dans la première phase, 10 patients seront inclus et randomisés en 2 groupes (5 bras de traitement ; 5 bras de contrôle) et recevront 2 x 10 ^ 6 cellules/kg de CSM aux jours 1 et 7 en plus des soins standard. Par la suite, le comité d'essai se réunira et évaluera toutes les informations d'innocuité et d'efficacité recueillies pour décider du passage du bras de contrôle au bras de traitement si le patient se détériore cliniquement dans le bras de contrôle. Ensuite, 10 nouveaux sujets seront inclus dans l'étude et traités selon le protocole.

Préparation des doses de MSC Les MSC seront isolées à partir de cellules récoltées de moelle osseuse. Environ 50 ml de moelle osseuse seront prélevés de la crête iliaque en utilisant une technique aseptique dans des seringues amorcées avec un anticoagulant. L'échantillon collecté sera dilué avec du tampon phosphate salin (PBS) et les MSC seront séparés par centrifugation en gradient de densité. Après remise en suspension, les cellules seront ensemencées à une concentration fixe de 100 000 cellules/cm2 dans des flacons spécialement conçus et incubées à 37oC dans 5% de dioxyde de carbone (CO2). Le milieu sera changé tous les trois jours jusqu'à la récolte des MSC des flacons. Une fois confluentes (environ 20 jours), les cellules seront récoltées avec des techniques stériles en utilisant une solution de trypsine-acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA). Les cellules préparées peuvent être soit stockées dans des flacons cryogéniques de 50 ml pour une utilisation future, soit infusées immédiatement.

Sélection des patients et demande de CSM Le patient pour les CSM et le bras de contrôle sera sélectionné par une équipe multidisciplinaire (MDT) comprenant un spécialiste des soins intensifs, un pneumologue, un spécialiste des maladies infectieuses et un hématologue clinique.

1. La demande de MSC sera lancée sur des formulaires pré-désignés, signés par le spécialiste des soins intensifs indiquant clairement l'indication des MSC.
2. Le formulaire de demande sera envoyé au laboratoire de cellules souches.
3. Le laboratoire de cellules souches responsable autorisera la délivrance de la dose de MSC.
4. Le laboratoire de cellules souches émettra la dose Administration des MSC

1. Bras expérimental : les CSM congelées seront remises en suspension dans 100 ml de solution saline normale pour une utilisation immédiate et administrées par voie intraveineuse. Les patients doivent être prémédiqués pour éviter les réactions allergiques aux MSC tiers. Chaque patient du groupe expérimental recevra 2 x 106 cellules/kg qui seront administrées le jour 1,7 en plus des soins de soutien 2. Groupe de contrôle : sera poursuivi en soins de soutien

Utilisation proposée :

En raison de la disponibilité très limitée des CSM, leur utilisation doit être rationalisée par une PCT composée d'un pneumologue, d'un spécialiste des soins intensifs, d'un hématologue clinique et d'un spécialiste des maladies infectieuses. Il n'y a pas suffisamment de preuves pour formuler des recommandations thérapeutiques. au cas par cas après PCT.