L'impatto dell'immunosoppressione basata su Everolimus nell'evoluzione della fibrosi da epatite C dopo il trapianto di fegato

Disegno dello studio:

Uno studio pilota, in aperto, prospettico, randomizzato e unicentrico. Come studio pilota, il numero di pazienti che dovrebbero essere inclusi è n=40.

Criterio di inclusione:

• Età≥18 anni
• Primo trapianto di fegato
• RNA-HCV positivo nei 12 mesi precedenti al trapianto

Criteri di esclusione:

• Trapianto multiorgano
• Spaccare il fegato
• ABO incompatibile
• Pazienti sieropositivi
• Velocità di filtrazione glomerulare ≤60 ml/min/1,73 m2

I pazienti riceveranno una doppia terapia immunosoppressiva all'induzione con tacrolimus (dose basale 0,1 mg/Kg/giorno) e micofenolato mofetile (MMF, dose basale 2 g/giorno) entro le prime 12 ore dopo la chiusura della pelle.

I pazienti saranno randomizzati in uno dei seguenti gruppi al giorno 28 post-trapianto:

1. Gruppo MMF (n=20): tacrolimus (livelli 8-10 ng/ml) e MMF (livelli 1-3 ng/ml).
2. Gruppo EVL (n=20): tacrolimus (livelli 8-10 ng/ml) ed everolimus (livelli 2-4 ng/ml).

Monitoraggio dell'HCV:

• Rilevamento e quantificazione dell'HVC-RNA. I campioni di siero verranno prelevati immediatamente prima del trapianto di fegato, nella fase anepatica, all'inizio e alla fine della riperfusione, e a 1h, 4h, 8h, 12h, 18h, 1d, 3d, 7d, 14d, 28d, 2m, 3m, 6m, 9m e 12m. I campioni di sangue verranno prelevati dalla circolazione periferica e centrifugati entro 2 o 3 ore dopo l'estrazione, aliquotati e congelati a -80 ºC. La concentrazione di HCV-RNA sarà determinata utilizzando un saggio quantitativo di reazione a catena della polimerasi a trascrizione inversa (RT-PCR) (Cobas Ampliprep/Cobas TaqMan; Roche Molecular Diagnostics, Barcellona, ​​Spagna) che raggiunge una sensibilità di 15 UI/mL e i protocolli di ultra deep pyrosequencing (UDSP) saranno utilizzati per studiare il fattore genomico del DNA e la variabilità dell'RNA virale.
• Marcatori di fibrosi sierica. I campioni di siero saranno prelevati al 3°, 6° e 12° mese post-trapianto dalla circolazione periferica e congelati a -21ºC. I marcatori sierici (HA, PIIINP e TIMP-1) saranno analizzati mediante un immunodosaggio sandwich a due siti completamente automatizzato utilizzando la tecnologia chemiluminometrica diretta (ADVIA Centayr XP, Siemens Healthcare Diagnositics). L'algoritmo che include i tre marcatori (3-M-ALG) {score= -7,412 + [ln (HA)x0,681] + [ln (PIIINP)x0.775] Si otterrà anche + [ln (TIMP-1)]x0,494}.
• Elastografia transitoria (FibroScan). Le misurazioni della rigidità epatica mediante Fibroscan (Echosens, Parigi, Francia) saranno eseguite nelle cliniche al 6° e 12° mese post-trapianto.
• Biopsia epatica. La biopsia epatica verrà eseguita a 12 mesi dopo il trapianto. Tutti i campioni di biopsia saranno letti da un singolo patologo. L'attività necroinfiammatoria e lo stadio della fibrosi saranno valutati utilizzando la classificazione ISHAK.

Follow-up e dati clinici:

Dopo la dimissione, i pazienti saranno visitati in ambulatorio mensilmente per i primi 3 mesi e successivamente ogni 3 mesi durante i primi 12 mesi post-trapianto, momento in cui verranno registrate le variabili cliniche e analitiche.Caratteristiche basali, genotipo HCV e carica virale prima del trapianto, le variabili chirurgiche (tipo di trapianto di fegato, età e steatosi del donatore, tempo di ischemia), informazioni post-trapianto e follow-up saranno prospetticamente raccolte in un database elettronico.

Ritiro del paziente:

• Nessun modulo di consenso fornito dal paziente
• Eventi avversi gravi correlati agli immunosoppressori utilizzati
• Gli steroidi sono necessari per un lungo periodo di tempo
• Terapia antivirale somministrata prima durante il primo anno post-trapianto
• Seguito perso
• Morte paziente