Esercizio di rilassamento nei pazienti con COVID-19

Procedure dello studio È stato utilizzato un disegno controllato randomizzato. Lo studio era in doppio cieco in cui sia i pazienti che i valutatori erano ciechi rispetto alle procedure dello studio. Ad ogni paziente è stato chiesto di firmare un consenso informato prima della partecipazione a questo studio. Questo studio è stato approvato dal comitato etico della nostra università (in cieco). I pazienti sono stati reclutati da dicembre 2020 ad aprile 2021. I pazienti sono stati raccolti esaminando i dati dell'ospedale (in cieco). Quindi, abbiamo chiamato i pazienti con COVID-19 per chiedere loro del loro benessere per partecipare a questo studio. I pazienti che hanno accettato di partecipare sono stati intervistati tramite videochiamate utilizzando l'app Zoom per discutere con loro le procedure dello studio. I pazienti che hanno accettato di impegnarsi in questo studio sono stati visitati da un ricercatore a casa loro mentre erano in quarantena. Durante la visita iniziale, è stato firmato il modulo di consenso e sono stati prelevati campioni di sangue. Qualsiasi paziente deve avere il permesso di eseguire il nostro intervento dal medico che lo supervisiona. Il protocollo clinico di questo studio è stato retrospettivamente registrato su https://www.clinicaltrials.gov/ piattaforma con questo numero di registrazione NCT04998708. Lo studio è stato registrato in modo retrospettivo a causa della vulnerabilità del gruppo di ricerca per avere COVID-19 che potrebbe influenzare le date e i dati dello studio. Non ci sono state deviazioni dal protocollo di prova registrato.

La dimensione del campione adatta per questo studio è stata determinata utilizzando un test di potenza a priori. Il programma G*POWER (ver. 3.1.9.2, Heinrich-Heine-University, Düsseldorf, Germania). I criteri inseriti nel programma includevano un test MANOVA utilizzando 2 gruppi, 2 misurazioni, un livello di potenza dell'80%, un livello di significatività di 0,05, e dimensione media dell'effetto (dz= .25)(Faul et al., 2007). Sulla base delle ipotesi precedenti, la dimensione totale del campione necessaria per questo studio era di 30 pazienti. Una potenza minima dell'80% o più è accettabile nella maggior parte degli studi (Kadam & Bhalerao, 2010). Il flusso di pazienti durante lo studio è mostrato nella Figura 1.

Inizialmente, quarantacinque pazienti hanno accettato la partecipazione a questo studio. Dieci pazienti non hanno soddisfatto i criteri di inclusione dello studio e altri cinque pazienti non hanno completato l'intero studio perché non gli piaceva fare esercizio. Infine, trenta pazienti con COVID-19 hanno completato l'intero studio (intervento di 2 settimane e "follow-up" post-intervento di 3 settimane). L'età dei pazienti variava dai 25 ai 45 anni. I criteri di inclusione includevano che il paziente avesse un recente COVID-19 lieve o moderato con febbre bassa o assente 99,5-100,94 °F (37,5-38,3 °C) (Affronti et al., 2010; Zhuang et al., 2020). Il COVID-19 di grado lieve è stato determinato dalla presenza di sintomi di infezione acuta del tratto respiratorio superiore (febbre, tosse, mialgia, naso che cola, affaticamento, mal di gola, starnuti) o sintomi gastrointestinali (nausea, vomito, dolore addominale, diarrea). Il COVID 19 di grado moderato è stato determinato dalla presenza di sintomi lievi più polmonite (tosse, febbre frequente) senza ipossiemia evidente, presenza di lesioni alla TC del torace (Yuki et al., 2020). I criteri di esclusione includevano che il paziente è indicato per essere ricoverato in ospedale, ha febbre alta <100,94 °F (<38,3 °C) o altre malattie croniche come problemi cardiaci, ipertensione o diabete. Le donne che assumono contraccettivi sono state escluse perché i contraccettivi riducono la funzione immunitaria e aumentano il rischio di varie malattie autoimmuni (Williams, 2017).

Procedure di valutazione C'erano tre principali variabili dipendenti tra cui i marcatori immunitari del sangue, l'immunoglobulina salivare A e il Wisconsin Upper Respiratory Symptom Survey. Queste misurazioni sono state raccolte al basale, 2 settimane dopo l'intervento e 1 settimana come follow-up.

Un tecnico di laboratorio e un ricercatore sono stati invitati a visitare il paziente a casa durante la quarantena. Il tecnico ha raccolto campioni di sangue e saliva e il ricercatore ha condotto il Wisconsin Upper Respiratory Symptom Survey. Indossavano speciali dispositivi di protezione raccomandati dall'OMS (OMS, 2020b; Organizzazione mondiale della sanità (OMS), 2020). Sono state eseguite tre visite compreso l'inizio delle procedure di ricerca, 24 ore dopo l'intervento (2 settimane) e 1 settimana come follow-up.

Raccolta dei campioni di sangue I campioni di sangue sono stati prelevati al mattino (8:30-9:30) raccogliendo 10 ml di sangue venoso. Ai pazienti è stato chiesto di interrompere qualsiasi esercizio per almeno 24 ore prima del prelievo di sangue. Inoltre, ai pazienti è stato chiesto di smettere di mangiare o bere 8 ore prima della raccolta dei campioni. I campioni sono stati raccolti in provette vacutainer con acido etilendiami-netetracetico di sodio (EDTA) per la separazione del plasma. Il sangue è stato centrifugato a 3.000 rpm per 15 minuti a 4◦C. I linfociti, leucociti e monociti totali sono stati misurati utilizzando un sistema di analisi degli emociti multicanale (SE-9000; Sysmex Corp, Hyogo, Giappone) (Lira et al., 2017; Shimizu et al., 2011). Le concentrazioni di IL-6, IL-10 e TNF-α sono state analizzate utilizzando il test dei kit commerciali ELISA (R&D Systems, Minneapolis, USA). Sono state seguite le istruzioni del produttore per l'analisi di IL-6, IL-10 e TNF-α su un lettore di micropiastre EZ-Reader a 450 nm (de Souza et al., 2018; Lira et al., 2017). I campioni sono stati conservati a -20◦C per ulteriori analisi.

Raccolta del campione di saliva Il campione di saliva è stato prelevato senza alcun metodo di stimolazione della saliva. Al paziente è stato chiesto di sciacquarsi la bocca con acqua distillata ed evacuare la bocca appena prima della raccolta. Per questa raccolta abbiamo utilizzato il metodo del drenaggio passivo. Il paziente ha leggermente flesso la testa in avanti per consentire alla saliva di spostarsi in una provetta Falcon sterilizzata e prepesata per 5 minuti. Il peso dei tubi è stato nuovamente misurato dopo la raccolta per stimare il volume e la portata della saliva. Le provette sono state pesate con una precisione di 0,1 mg con la densità di saliva proposta proposta a 1,0 g. ml-1. I campioni sono stati conservati a -80◦C per ulteriori analisi. La concentrazione di S-IgA è stata analizzata utilizzando kit ELISA commerciali (IgA Salivary, DRG, Minneapolis, USA). Il tasso di secrezione di IgA-S (ng/min) è stato misurato moltiplicando l'intera concentrazione di IgA-S presente nella superficie della mucosa per unità di tempo per il flusso di saliva (mL/min) (de Souza et al., 2018) .

Wisconsin Upper Respiratory Symptom Survey Il Wisconsin Upper Respiratory Symptom Survey è uno strumento di valutazione degli esiti della qualità della vita specifico per la malattia, derivato empiricamente e orientato al paziente (A. W. Barrett & Barrington, 2005). Il processo di sviluppo di questa indagine è stato descritto in dettaglio da Barrett et al(B. Barrett et al., 2018). Il Wisconsin Upper Respiratory Symptom Survey è progettato per valutare l'effetto negativo dell'infezione acuta delle vie respiratorie superiori sulla qualità della vita. È una misurazione convalidata e affidabile per valutare il cambiamento della qualità della vita nel tempo, compresi i sintomi di malattia simil-influenzale di mal di testa, dolori muscolari e febbre (B. Barrett et al., 2018). Ai pazienti è stato chiesto di compilare il sondaggio al basale, 2 settimane dopo l'intervento e 1 settimana come follow-up.

Procedure di trattamento I pazienti sono stati assegnati in modo casuale all'intervento e ai gruppi di controllo. I pazienti sono stati assegnati in modo casuale a 4 blocchi permutati utilizzando il software del computer per avere 2 dimensioni del campione uguali. La randomizzazione è stata eseguita da un membro del personale universitario che non era coinvolto in questo studio. Tutti i pazienti nei gruppi hanno seguito le procedure di quarantena dell'OMS (WHO, 2020a) e hanno assunto farmaci standardizzati somministrati dal Ministero della Salute turco (Hydroxychloroquine Sulphate 200 Mg).

Il gruppo di intervento ha eseguito un intervento integrato combinando CBSM e PMR. Abbiamo usato questi due interventi perché è stato dimostrato i loro effetti positivi sulla funzione immunitaria. Le due tecniche di rilassamento includevano l'allenamento di rilassamento muscolare progressivo (PMR) (Xiao et al., 2020) e la gestione dello stress cognitivo-comportamentale (CBSM) (McGregor et al., 2004). Abbiamo utilizzato due tipi di tecniche di rilassamento per produrre i massimi effetti delle tecniche di rilassamento entro il periodo limitato della quarantena COVID-19 (2 settimane). I gruppi di controllo non hanno ricevuto alcuna tecnica di rilassamento durante lo studio.

Allenamento progressivo di rilassamento muscolare È stato riportato che l'allenamento progressivo di rilassamento muscolare riduce l'ansia, le emozioni negative e migliora la qualità del sonno nei pazienti con COVID-19 (Özlü et al., 2021; Xiao et al., 2020). I pazienti hanno eseguito la PMR nel loro letto per 30 minuti al mattino dopo il risveglio e la sera prima di dormire. Abbiamo registrato un video dettagliato per la PMR che deve essere guardato da tutti i pazienti prima di partecipare a questo studio. L'ordine PMR è stato avviato eseguendo contrazioni isometriche dei muscoli con una concentrazione sulla sensazione di tensione per 3-5 secondi. Quindi, si riposano per 10-15 secondi. Successivamente, i pazienti sono stati istruiti a eseguire la PMR in questa sequenza piede, gamba, anca e vita, torace, braccio, spalla e viso. Le istruzioni specifiche per ogni esercizio sono state dimostrate nello studio di Özlem et al (Özlü et al., 2021). Il paziente deve completare almeno 12 giorni di PMR per essere incluso nell'analisi statistica.

È stato riportato che la gestione dello stress cognitivo-comportamentale (CBSM) riduce significativamente la depressione, l'ansia e lo stress nei pazienti con COVID-19 (Li et al., 2020). Tutti i pazienti inclusi sono stati sottoposti a una sessione di gruppo strutturato di 2 ore per illustrare in dettaglio il CBSM prima di iniziare lo studio. Tutte le sessioni sono state condotte da uno psicologo assunto che era accecato dalle procedure di studio. Il CBSM consisteva in una sessione di gruppo strutturato di 2 ore eseguita 2 volte a settimana. Ogni sessione si è concentrata su varie tecniche CBSM (ad esempio, formazione sulle abilità di coping, ristrutturazione cognitiva, formazione sull'asserzione e gestione dello stress). Ai pazienti è stato anche chiesto di svolgere compiti a casa (ad esempio, schede di monitoraggio del rilassamento e un foglio di lavoro per la ristrutturazione cognitiva) assegnati ogni settimana. Il paziente deve partecipare a tutte le sessioni di gruppo strutturato di 2 ore e svolgere tutti i compiti da includere nell'analisi statistica.

Analisi dei dati I file dei pazienti sono stati codificati da un amministratore universitario che non ha aderito a questo studio (Taylor & Murphy, 2010). Sono stati seguiti modelli di analisi intention-to-treat e lineari generali. Un test di analisi multivariata delle misurazioni ripetute (MANOVA) è stato utilizzato per misurare le interazioni all'interno di ciascun gruppo, mentre un test MANOVA indipendente è stato utilizzato per misurare i confronti tra i gruppi. Le misure di esito sono state misurate al basale, 2 settimane dopo l'intervento e 1 settimana come follow-up. Tutti i risultati sono stati confrontati con i risultati di riferimento. Le caratteristiche di base dei pazienti in entrambi i gruppi sono state confrontate utilizzando i test del chi quadrato di Pearson per le variabili categoriche (sesso, precedente storia di infezione polmonare) e il test t per le variabili continue (età e indice di massa corporea). Il livello di significatività è stato fissato a p<.05. L'SPSS (ver. 25, IBM Inc., Armonk, NY, USA) è stato utilizzato per l'analisi statistica.