제2형 당뇨병 환자의 엔도톡신 수준에 대한 프로바이오틱스의 영향을 탐색하기 위한 연구

설계

이 26주간의 단일 센터, 이중 맹검, 무작위, 위약 대조 연구에서 T2DM 환자 60명은 프로바이오틱스로 치료를 받고 60명은 위약으로 치료를 받게 됩니다. 개입은 모든 피험자로부터 0, 4, 8, 12 및 26주에 수행됩니다. 프로바이오틱스 그룹에 할당된 환자는 동결 건조 박테리아의 4가지 균주, 즉 락토바실러스 아시도필러스, 락토바실러스 불가리쿠스, 비피도박테리움 비피덤 및 연쇄상구균 써모필레스(Bio-plus®, Supherb, Israel)가 포함된 캡슐을 1일 용량 2 × 1010 CFU. 위약 그룹의 참가자는 다른 임상 시험에서 사용된 것과 같이 밀 기반의 비발효성 섬유질이 포함된 캡슐을 받게 됩니다[Pereg et al, 2011].

환자 모집

이 연구에 대한 환자 모집은 리야드 전역의 1차 진료 센터 및 King Saud 대학 과학 대학의 바이오마커 연구 프로그램과의 협력을 통해 가능할 것입니다.

포함 기준

• 안정적이고 잘 조절된 T2DM(HbA1c < 7.5% 및 지난 6개월 동안 경구 항당뇨병 약물의 변화 없음)
• 20-75세
• 서면 동의서 제공

제외 기준

• 만성 위장병(IBS 제외)
• 포함 전 6주 이내에 전신 항생제
• 포함 전 3개월 이내에 프로바이오틱스 사용(부록 A에는 현재 국제적으로 판매되고 사우디아라비아에서 구입할 수 있는 제품이 나열되어 있음)
• 인슐린 또는 인슐린 유사체, 항생제 또는 프로바이오틱스, 제산제, H2 수용체 차단제, 양성자 펌프 억제제, 로페라마이드, 콜레스트리라민, ω3 보충제, 피브레이트, 코르티코스테로이드 또는 성 스테로이드의 규칙적인 섭취
• 일일 알코올 섭취량 > 30g
• 상당한 면역결핍
• 알려진 심장 판막 질환
• 모유 수유 또는 임신
• 비아랍 민족
• 최근 6개월 이내 다른 임상시험 참여
• 법적 무능력

치료에 할당

적격성을 확인하고 서면 동의서를 얻은 후, 환자는 프로바이오틱스 회사로부터 고유한 피험자 번호를 부여받게 되며, 이 회사는 또한 무작위화(성별 계층화)를 수행할 것입니다. 1차 진료 센터의 환자와 임상의는 받은 치료. 자격이 있는 환자는 프로바이오틱스 보충제 또는 위약으로 26주 동안 치료에 할당(1:1)됩니다. 과목은 다음과 같이 지시됩니다

• 아침 식사 전에 1캡슐, 저녁 식사 전에 1캡슐을 직접 섭취하거나 표준 요거트에 혼합하여 섭취하십시오.
• 캡슐은 개봉 후 냉장고에 보관됩니다.

데이터 처리 및 기록 보관

증례 보고서 양식(CRF)은 모든 참가자의 데이터를 기록하는 데 사용되며 전자 데이터베이스에 데이터를 입력하는 연구 간호사가 작성합니다.

학습 일정 및 위치

포함 후 모든 추가 치료는 피험자가 모집된 1차 진료 센터에서 관리됩니다(예정된 방문은 부록 C 참조). 연구 간호사와 연구 영양사는 환자와의 모든 접촉을 책임질 것입니다. 문제가 발생하면 연구팀과 관련된 의사를 사용할 수 있습니다.

임상 데이터 획득 및 적합성 평가

• 만성 질환의 존재, 규칙적인 약물, 흡연 및 음주 습관을 포함한 병력이 포함되기 전에 기록됩니다.
• 영양 습관은 표준화된 14일 리콜 설문지를 사용하여 평가되며 영양사와 논의됩니다.
• 연구 기간 동안 약물의 변화가 기록됩니다.
• 인체 측정은 표준화된 방법을 사용하여 이루어집니다. 신장은 치료 시작 시 측정됩니다. 체중(신발이 없거나 주머니에 있는 물건이 없는 가벼운 옷차림), 허리둘레(배꼽 높이에서 수평면으로 측정) 및 엉덩이 둘레(대퇴골전위 높이에서 수평면으로 측정)는 치료의 시작과 끝.
• 간 초음파 검사는 지방증을 나타내는 밝은 간의 유무를 결정하기 위해 스크리닝 시 또는 치료 시작 시에 수행됩니다. 지방간 및 간 트랜스아미나제가 정상 상한치의 1.5배를 초과하는 환자는 간 전문의에게 의뢰됩니다.
• 준수 여부는 4주, 8주, 12주 및 26주차에 모니터링됩니다. 환자는 이전에 받은 캡슐을 1차 진료 센터로 가져와 하루에 섭취한 평균 캡슐 수를 계산합니다.

일상적인 생화학 데이터 및 생물학적 샘플 수집

• 채취한 혈액 샘플은 포도당, HbA1c, 인슐린, C-펩티드, 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤, LDL-콜레스테롤, 중성지방, 알라닌 아미노전이효소 및 아스파르테이트 아미노전이효소 수치를 측정하기 위해 바이오마커 연구 프로그램에서 분석됩니다.
• 공복 혈액 샘플은 0주, 8주 및 26주에 수집됩니다. 항응고제 없이 발열원이 없는 튜브로 말초 정맥혈을 채취합니다. 튜브를 즉시 얼음에 넣고 응고시킨 다음 수집 2시간 이내에 원심분리합니다(4°C에서 10분 동안 2500 xg). 혈청 샘플은 사용할 때까지 -80°C에서 보관됩니다. 각 시점에서 최소 2개의 2mL 혈청 샘플을 수집합니다.
• 대변 ​​샘플은 클리닉으로 옮길 때까지 환자에게 밀봉 가능한 플라스틱 백에 샘플을 냉동실에 보관하도록 요청하여 채취합니다. (혈액 샘플을 요청한 동일한 지점에서 샘플을 채취합니다. 클리닉에 도착하면 샘플을 나누어 급속 냉동하고 -80°C에서 보관합니다. 장내 미생물군의 변화는 증폭된 16S rRNA 유전자의 시그니처 태그 시퀀싱(파이로시퀀싱)에 이어 자동화된 생물정보학 분석을 사용하여 프로파일링됩니다. Targeted RT-PCR은 범용 세균 프라이머 세트와 관련된 Enterobacteria 및 Bifdobacteria와 같은 세균 종을 검사하는 데에도 사용됩니다. 파이로시퀀싱 및 RT-PCR은 최종 전신 소견을 고려하여 환자의 하위 코호트(n=15)에서 수행됩니다. 샘플은 후속 연구를 위해 보관됩니다.

피험자 탈퇴

피험자는 자신의 요청에 따라 언제든지 시험에서 철회하거나 안전, 행동 또는 관리상의 이유로 조사자의 재량에 따라 언제든지 철회할 수 있습니다. 피험자는 또한 다음과 같은 경우 연구에서 제외됩니다.

• 0-22주 동안 > 1주 동안 전신 항생제 치료
• 22-26주 동안 전신 항생제 사용

환자 안전

부작용

부작용(AE)은 연구 중에 발생하는 바람직하지 않은 징후 또는 증상이며 치료와 인과적으로 관련될 수도 있고 그렇지 않을 수도 있습니다. 테스트 제품과 관련이 있을 가능성이 있거나 확실하게 관련된 것으로 간주되는 모든 AE는 CRF에 기록됩니다.

심각한 부작용

심각한 부작용(SAE)은 치명적, 생명 위협적, 장애, 무력화 또는 입원을 초래하거나 입원 기간을 연장하거나 기형을 초래하는 사건으로 정의됩니다. 테스트 제품과 관련이 있는지 여부에 관계없이 모든 SAE는 CRF에 기록됩니다. 이전 연구(9)에 따르면 프로바이오틱스는 매우 안전하며 테스트 제품과 아마도, 아마도 또는 확실히 관련될 수 있는 모든 SAE는 예상치 못한 것으로 간주될 것입니다. 모든 예상치 못한 SAE는 의약품 및 의료 제품 규제 기관(MHRA)에 즉시 보고됩니다. 테스트와 관련이 있을 수 있는 SAE는 즉시 테스트 제품의 중단으로 이어집니다.

윤리 및 규제 측면

이 연구는 헬싱키 선언문과 국제 임상시험 조화 지침 위원회(International Council for Harmonization Guidance on Good Clinical Practice)에 기원을 둔 프로토콜 및 윤리 원칙에 따라 수행될 것입니다. 이 문서는 피험자의 정보에 입각한 동의가 임상 연구에 참여하기 위한 필수 전제 조건임을 명시합니다. 이 연구는 King Saud University의 College of Medicine Research Center의 지역 윤리 검토 위원회의 승인을 얻은 후에만 시작됩니다.

데이터 분석 계획

이 시험은 제2형 당뇨병에서 프로바이오틱스 치료에 대한 임상 적응증을 지원하기보다는 생리적 효과를 평가하기 위해 설계되었기 때문에 프로토콜별 분석을 수행할 계획입니다. 시간의 최소 80% 동안 계획된 용량의 최소 80%로 치료된 피험자만이 프로토콜에 따라 치료된 것으로 간주됩니다.

원시 데이터는 통계 소프트웨어(사회과학용 통계 패키지), SPSS 버전 16.5(미국 일리노이주 시카고)에 입력됩니다. 데이터 세트의 준비는 분석 전에 수행됩니다. 기술 통계가 수행됩니다. 빈도는 백분율(%)로 표시됩니다. 연속 변수는 평균 ± 표준 편차로 표시됩니다. 비 가우시안 변수를 나타내는 변수는 분석 전에 변환됩니다. 공분산의 반복 측정 분석(ANCOVA)은 분산 분석(ANOVA)과 선형 회귀의 조합을 나타내는 그룹을 비교하는 데 사용됩니다. 반복 측정 전에 적절한 일치가 달성되지 않은 경우 연령, 성별, BMI와 같은 교란 및 고정 변수가 사용됩니다. 사후 Banjamini-Hohberg 수정은 다중 비교를 위해 수행됩니다. 두 그룹의 비교를 위해 연속 변수에 대해 독립 T-테스트를 ​​수행하고 비연속 변수에 대해 Mann-Whitney를 수행합니다. 부작용(있는 경우)의 분석은 무작위성, 독립성 및 크기의 가정에 따라 Chi-Square 테스트 및 Fisher의 정확 테스트를 사용하여 수행됩니다. 유의성은 p < 0.05로 설정됩니다.