Bacteriële opstelling op de tanden

Tandcariës en parodontitis zijn nauw verbonden met de orale biofilm die bekend staat als tandplak. Er is veel bekend over de samenstelling van deze biofilm, vooral in het vroege ontwikkelingsstadium (d.w.z. tot 12 uur na het poetsen van de tanden). De primaire initiële kolonisatoren zijn streptokokken en actinomyces. Deze bacteriën klonteren vaak met elkaar samen door een mechanisme waarbij eiwitadhesinen op het oppervlak van één cel worden gebonden aan complementaire celoppervlakreceptorpolysacchariden (RPS) op streptokokken.

Coaggregatieprofielen zijn bekend voor een breed scala aan orale actinomyces en streptokokken. Ondanks de potentiële betekenis van deze interacties bij de vorming van biofilms, is er echter weinig bekend over hun voorkomen in orale biofilms in situ.

Doelstelling

Het doel van deze studie is het bepalen en vergelijken van de invloed van coaggregatie op de ruimtelijke organisatie van bacteriën in supragingivale tandplak gevormd onder omstandigheden van normale speekselvloed (Arm 1 van het protocol) of verhoogde speekselvloed (Arm 2 van het protocol).

Studie Bevolking

De onderzoekspopulatie zal bestaan ​​uit maximaal vijfentwintig (25) gezonde volwassen proefpersonen van 18 jaar en ouder. Alle proefpersonen zullen deelnemen aan arm 1 van het protocol. Daarnaast zullen minimaal drie vrijwilligers uit arm 1 deelnemen aan arm 2 van het protocol.

Ontwerp ontwerpen

Dit wordt een observationeel, longitudinaal protocol om de ruimtelijke organisatie van bacteriën in tandplak van normale gezonde proefpersonen te bepalen. Ingeschreven proefpersonen zullen een standaard mondeling onderzoek (inclusief orale kankerscreening) ondergaan in de NIDCR-kliniek door tandheelkundige clinici die in het protocol zijn opgenomen. Een mandibulaire stent wordt op maat gemaakt op basis van afdrukken die tijdens het onderzoek zijn gemaakt. Glazuurschilfers die uit eerder geëxtraheerde derde kiezen zijn gesneden, worden gesteriliseerd met ethyleenoxide en vervolgens in de stent aan elke kant over het kiesgebied ingebracht. We hebben momenteel genoeg geëxtraheerde derde molaren in opslag om tandchips voor het hele protocol op te nemen als vier proefpersonen de studie voltooien zoals geprojecteerd. Als er extra chips nodig zijn, is de NIDCR momenteel bezig met het opstellen van een protocol dat, indien nodig, voor dit en andere protocollen geëxtraheerde tanden zal leveren. In arm 1 van het onderzoek wordt een op maat gemaakte stent in de mond van elke proefpersoon gedragen en worden de chips verwijderd voor analyse na 4 of 8 uur dragen. De bacteriële biofilm op de chips zal worden gekleurd met fluorescerende antilichamen tegen specifieke microbiële adhesinen of receptoren, waarna de ruimtelijke organisatie van gelabelde cellen in de biofilm zal worden gedocumenteerd door laser confocale microscopie. Chips kunnen worden gebruikt voor bacteriële isolatie en proefpersonen zullen worden gevraagd om speekselmonsters en plaatsspecifieke plaquemonsters (curetteschraapsels, tandvleesuitstrijkjes) te verstrekken voor moleculaire taxonomische analyse. Beslissingen over welke proefpersonen deze monsters zullen laten nemen, zullen worden gebaseerd op de reactiviteit van beschikbare antilichamen met bacteriële gemeenschappen. Proefpersonen uit arm 1 van de studie die zijn uitgekozen om deel te nemen aan arm 2, kauwen gedurende 10 minuten op een kauwgombasis om de speekselvloed te verhogen terwijl ze hun stent dragen. De stent van deze personen wordt na 4 uur extra dragen verwijderd en geanalyseerd zoals hierboven. Voorafgaand aan deelname aan Arm 2 van het protocol zullen de proefpersonen erop worden gewezen dat de experimenten worden ondersteund door een CRADA-overeenkomst. Via deze overeenkomst wordt alleen gecodeerde onderzoeksinformatie uitgewisseld. De monsters blijven bij het NIH-onderzoeksteam. Individuen mogen alleen deelnemen aan de eerste tak, of aan beide takken van de studie, zoals aangegeven in hun toestemmingsdocument.

Uitkomstmaatregelen

Uitkomstmaten voor dit protocol zijn de kwalitatieve en kwantitatieve beschrijving van de orale bacteriële gemeenschap tijdens de ontwikkeling van de initiële plaque.