Bakteriearrangemang på tänderna

Tandkaries och periodontal sjukdom är nära förknippade med den orala biofilmen som kallas tandplack. Mycket är känt om sammansättningen av denna biofilm, särskilt i dess tidiga utvecklingsstadium (dvs upp till 12 timmar efter tandrengöring). De primära initiala kolonisatorerna är streptokocker och actinomyces. Dessa bakterier koaggregerar ofta med varandra genom en mekanism som involverar bindning av proteinadhesiner på ytan av en cell till komplementära cellytereceptorpolysackarider (RPS) på streptokocker.

Koaggregationsprofiler är kända för ett brett spektrum av orala actinomyces och streptokocker. Men trots den potentiella betydelsen av dessa interaktioner i biofilmbildning, är lite känt om deras förekomst i orala biofilmer in situ.

Mål

Syftet med denna studie är att bestämma och jämföra inverkan av koaggregation på den rumsliga organisationen av bakterier i supragingivalt tandplack bildat under förhållanden med normalt salivflöde (arm 1 i protokollet) eller ökat salivflöde (arm 2 i protokollet).

Studera befolkning

Studiepopulationen kommer att bestå av upp till tjugofem (25) friska vuxna försökspersoner 18 år och äldre. Alla försökspersoner kommer att delta i arm 1 i protokollet. Dessutom kommer minst tre frivilliga från arm 1 att delta i arm 2 i protokollet.

Studera design

Detta kommer att vara ett observations-, longitudinellt protokoll för att bestämma den rumsliga organisationen av bakterier som finns inom tandplack hos normala friska försökspersoner. Inskrivna försökspersoner kommer att få en vanlig muntlig undersökning (inklusive oral cancerscreening) utförd på NIDCR-kliniken av protokolllistade tandläkare. En underkäksstent kommer att specialtillverkas baserat på avtryck tagna under undersökningen. Emaljchips skurna från tidigare extraherade tredje molarer kommer att steriliseras med etylenoxid och sedan föras in i stenten på varje sida över molarområdet. Vi har för närvarande tillräckligt med extraherade tredje molarer i lager för att ta emot tandchips för hela protokollet om fyra försökspersoner slutför studien som planerat. Om ytterligare chips behövs är NIDCR för närvarande i färd med att förbereda ett protokoll som kommer att tillhandahålla extraherade tänder, om det behövs, för detta och andra protokoll. I arm 1 av studien kommer en specialanpassad stent att bäras i munnen på varje försöksperson, och chips tas bort för analys efter 4 eller 8 timmars användning. Den bakteriella biofilmen på chipsen kommer att färgas med fluorescerande antikroppar mot specifika mikrobiella adhesiner eller receptorer, varefter den rumsliga organisationen av märkta celler i biofilmen kommer att dokumenteras med laserkonfokalmikroskopi. Chips kan användas för bakteriell isolering och försökspersonerna kommer att uppmanas att tillhandahålla salivprover och platsspecifika plackprover (kyrettskrapningar, tandköttsservetter) för molekylär taxonomisk analys. Beslut om vilka försökspersoner som kommer att ta dessa prover kommer att baseras på reaktiviteten hos tillgängliga antikroppar med bakteriesamhällen. Försökspersoner från arm 1 i studien som väljs ut att delta i arm 2 kommer att tugga en tuggummibas i 10 minuter för att öka salivflödet medan de bär sin stent. Stenten från dessa individer kommer att tas bort efter 4 timmars ytterligare slitage och analyseras enligt ovan. Före deltagande i arm 2 i protokollet kommer försökspersonerna att informeras om att experimenten stöds av ett CRADA-avtal. Genom detta avtal kommer endast kodad forskningsinformation att utbytas. Proverna kommer att förbli hos NIHs forskargrupp. Individer får endast delta i den första grenen, eller i båda grenarna av studien, enligt vad som anges i deras samtyckesdokument.

Utfallsmått

Resultatmått för detta protokoll kommer att vara den kvalitativa och kvantitativa beskrivningen av det orala bakteriesamhället under utvecklingen av initial plack.