Bakteriearrangement på tennene

Tannkaries og periodontal sykdom er nært forbundet med den orale biofilmen kjent som tannplakk. Mye er kjent om sammensetningen av denne biofilmen, spesielt på dens tidlige utviklingsstadium (dvs. opptil 12 timer etter tannrensing). De primære innledende kolonisatorene er streptokokker og actinomyces. Disse bakteriene koaggregerer ofte med hverandre ved en mekanisme som involverer binding av proteinadhesiner på overflaten av en celle til komplementære celleoverflatereseptorpolysakkarider (RPS) på streptokokker.

Koaggregeringsprofiler er kjent for et bredt spekter av orale actinomyces og streptokokker. Til tross for den potensielle betydningen av disse interaksjonene i biofilmdannelse, er lite kjent om deres forekomst i orale biofilmer in situ.

Objektiv

Målet med denne studien er å bestemme og sammenligne påvirkningen av koaggregering på den romlige organiseringen av bakterier i supragingival tannplakk dannet under forhold med normal spyttstrøm (arm 1 i protokollen) eller økt spyttstrøm (arm 2 i protokollen).

Studiebefolkning

Studiepopulasjonen vil bestå av opptil tjuefem (25) friske voksne personer 18 år og eldre. Alle forsøkspersoner vil delta i arm 1 i protokollen. I tillegg vil minst tre frivillige fra arm 1 delta i arm 2 i protokollen.

Studere design

Dette vil være en observasjons-, langsgående protokoll for å bestemme den romlige organiseringen av bakterier som finnes i tannplakk hos normale friske forsøkspersoner. Påmeldte forsøkspersoner vil få en standard muntlig undersøkelse (inkludert oral kreftscreening) utført i NIDCR-klinikken av protokolllistede tannleger. En mandibulær stent vil bli spesialfremstilt basert på avtrykk tatt under eksamen. Emaljebrikker kuttet fra tidligere ekstraherte tredje molarer vil bli sterilisert med etylenoksid og deretter satt inn i stenten på hver side over molarområdet. Vi har for øyeblikket nok ekstraherte tredje jeksler i lagring til å romme tannflis for hele protokollen hvis fire forsøkspersoner fullfører studien som anslått. Hvis flere brikker er nødvendig, er NIDCR for tiden i ferd med å utarbeide en protokoll som vil gi ekstraherte tenner, om nødvendig, for denne og andre protokoller. I arm 1 av studien vil en spesialtilpasset stent bæres i munnen til hvert forsøksperson, og sjetonger fjernes for analyse etter 4 eller 8 timers bruk. Den bakterielle biofilmen på brikkene vil bli farget med fluorescerende antistoffer mot spesifikke mikrobielle adhesiner eller reseptorer, hvoretter den romlige organiseringen av merkede celler i biofilmen vil bli dokumentert ved laserkonfokalmikroskopi. Chips kan brukes til bakteriell isolasjon, og forsøkspersonene vil bli bedt om å gi spyttprøver, og stedsspesifikke plakkprøver (kyrettskrap, tannkjøttpinner) for molekylær taksonomisk analyse. Beslutninger om hvilke forsøkspersoner som skal få tatt disse prøvene vil være basert på reaktiviteten til tilgjengelige antistoffer med bakteriesamfunn. Forsøkspersoner fra arm 1 av studien som er valgt til å delta i arm 2, vil tygge en tannkjøttbase i 10 minutter for å øke spyttstrømmen mens de har på seg stenten. Stenten fra disse personene vil bli fjernet etter 4 timers ekstra slitasje og analysert som ovenfor. Før deltakelse i arm 2 av protokollen, vil forsøkspersonene bli informert om at eksperimentene støttes av en CRADA-avtale. Gjennom denne avtalen vil kun kodet forskningsinformasjon bli utvekslet. Prøvene vil forbli hos NIHs forskningsteam. Enkeltpersoner kan bare delta i den første delen, eller i begge deler av studien, som angitt i samtykkedokumentet.

Utfallsmål

Resultatmål for denne protokollen vil være den kvalitative og kvantitative beskrivelsen av det orale bakteriesamfunnet under utvikling av initial plakk.