Poprawa cukrzycy w terapii medycznej w porównaniu z badaniem SADJB (DIMS)

Rekrutacja będzie miała charakter prospektywny i obejmie pacjentów o wskaźniku masy ciała (BMI) 23,5-30 kg/m2, w wieku od 18 do 65 lat. Przed rekrutacją każdy pacjent zostanie poddany badaniu przesiewowemu przed operacją (w tym ocenie psychologa) i ocenie przez multidyscyplinarny zespół badawczy. Badanie obejmie dwie grupy z równym przydziałem pacjentów w grupie intensywnej terapii medycznej (IMT) i grupie z pojedynczym zespoleniem pomostowania dwunastnicy i jelita czczego z rękawową resekcją żołądka (SADJB-SG) ze stratyfikacją przez zastosowanie insuliny podczas badań przesiewowych. Wszyscy pacjenci, którzy wyrażą zgodę na udział w tym badaniu, zostaną przydzieleni przez lekarza do jednej z grup terapeutycznych bez randomizacji. Przed podjęciem ostatecznej decyzji o leczeniu każdy pacjent zostanie poddany szczegółowej i aktualnej ocenie przez lekarza pod kątem przydatności, zalet i wad, ryzyka i korzyści, potencjalnych powikłań pooperacyjnych oraz prawdopodobieństwa konieczności pooperacyjnej suplementacji żywieniowej. Pacjenci kwalifikujący się do udziału w tym badaniu zostaną poinformowani, a ostateczna decyzja zostanie podjęta wyłącznie na podstawie chęci pacjentów. Pacjenci zostaną również poinformowani, że jest to badanie eksperymentalne, a przed rozpoczęciem leczenia zostanie podjęta zarówno ustna, jak i pisemna świadoma zgoda. Ponadto pacjenci zostaną poinformowani o wykorzystaniu danych klinicznych i analitycznych do celów publikacji. Wstępna ocena danych społeczno-demograficznych pacjenta, historii choroby (czas trwania cukrzycy, stosowane doustne leki hipoglikemizujące), wywiadu lekarskiego i chirurgicznego, wywiadu rodzinnego, pomiarów antropometrycznych (wzrost, masa ciała, BMI liczony jako waga (kg)/wzrost ( m2), obwodu talii, bioder i szyi), historii prób odchudzania, oceny diety i stylu życia, oceny jakości życia oraz pomiarów biochemicznych, w tym stężenia glukozy we krwi na czczo (FBG), hemoglobiny glikowanej (HbA1c), peptydu C, insuliny w osoczu i HOMA-IR, ocena obturacyjnego bezdechu sennego, depresji i jakości snu zostanie uzyskana po wyrażeniu zgody na udział w badaniu lub przed jakąkolwiek formą leczenia. Dodatkowy kwestionariusz przedoperacyjny zostanie przekazany grupie SADJB-SG podczas wstępnej oceny, aby zapewnić zrozumienie pacjentów w stosunku do operacji. Zdarzenia niepożądane będą ściśle monitorowane po 1, 2, 3 i 4 tygodniach po operacji. Każde wystąpienie zdarzenia niepożądanego zostanie udokumentowane i zgłoszone w ciągu 14 dni. Badanie zostanie zakończone, jeśli wystąpią zagrażające życiu lub ciężkie zdarzenia niepożądane związane z grupą SADJB-SG lub grupą IMT.

Pacjenci nie będą mieli dostępu do danych z badania, jednak będą informowani o postępach podczas każdej wizyty kontrolnej. Cała dokumentacja medyczna i dane badawcze będą przechowywane na dysku twardym badacza oraz w pamięci internetowej (i-cloud i i-drive) przez dwa lata. Dane z badania będą przechowywane nawet po zakończeniu okresu badania, ponieważ nadal będzie istniała ciągła obserwacja pacjentów przez całe życie. Jednak wszystkie informacje pacjentów uzyskane w ramach tego badania będą przechowywane i przetwarzane w sposób poufny, zgodnie z obowiązującymi przepisami prawa i regulacjami. Podczas publikowania lub prezentacji wyników badań tożsamość pacjentów nie zostanie ujawniona bez wyraźnej zgody pacjenta. Uczestnicy będą również objęci ubezpieczeniem badania klinicznego od instytucji w okresie studiów. W nagłych przypadkach wszyscy pacjenci otrzymają numer kontaktowy badacza, ponieważ z badaczami można się kontaktować przez cały dzień. Badanie to rozpocznie się po uzyskaniu zgody Komisji ds. Badań Medycznych i Etyki Ministerstwa Zdrowia Malezji.

Wielkość próbki:

Liczebność próby oszacowano za pomocą programu PS (oprogramowanie do obliczania mocy i wielkości próby). 3.1.2 z mocą 80% i znaczącym poziomem 0,05. Oszacowanie oparto na remisji cukrzycowej w kilku badaniach przeprowadzonych w chirurgii bariatrycznej na jednym ramieniu i intensywnym leczeniu medycznym na drugim i wykryto zakres od 57% do 73% remisji cukrzycowej w grupie chirurgii bariatrycznej. Inne badanie przeprowadzone przez Lee WJ i wsp., 2014 wykazało odsetek remisji cukrzycowej na poziomie 64% (HbA1C <6,0%) z grupą SADJB-SG rok po operacji. Całkowita szacowana wielkość próby wynosi 34 pacjentów w każdym ramieniu tego badania. Jednak z uwzględnieniem 20% wskaźnika rezygnacji, całkowita liczba pacjentów potrzebnych do tego badania wynosi 42 pacjentów w każdym ramieniu.

Badania laboratoryjne:

15 ml próbek krwi na czczo zostanie pobranych wcześnie rano do poniższych badań krwi w kwasie etylenodiaminotetraoctowym (EDTA), szczawianie fluoru i zwykłych probówkach, w zależności od odpowiedniego testu. Próbki będą dalej wirowane, aby surowica była przechowywana w 3 podwielokrotnościach (po 1 ml każda) do analizy partii. Ta surowica będzie przechowywana w temperaturze -80°C do czasu dalszej analizy. Analiza zostanie przeprowadzona w Laboratorium Patologii Chemicznej Wydziału Lekarskiego i Nauk o Zdrowiu, UPM.3.6.1. Wyjściowe przedoperacyjne biochemiczne markery i profile dla wszystkich kandydatów na T2DM do operacji bariatrycznej oraz inne „zagrożone” składniki odżywcze związane ze stosowaniem leków lub złą jakością diety obejmują:

Badania krwi na analizatorze automatycznym:

• Pełna morfologia krwi
• Profil nerkowy (mocznik, kreatynina, sód, potas)
• Test czynności wątroby (białko całkowite, albumina, bilirubina, fosfataza alkaliczna, transaminaza alaninowa, aminotransferaza asparaginianowa, transferaza gamma-glutamylowa)
• Badanie czynności tarczycy (TSH, wolne T4)
• kortyzol
• Stężenie glukozy w osoczu na czczo, HbA1c
• Profil lipidowy na czczo (cholesterol całkowity, trójglicerydy, LDL, HDL)
• Profil kostny [wapń, fosforany, magnez, parathormon, 25-OH witamina D]
• Żelazo, ferrytyna, witamina B12, kwas foliowy

Badania moczu

• Analiza moczu (paskowy) i FEME moczu (analizator automatyczny)
• Mikroalbumina moczu (analizator automatyczny)

Badania te będą powtarzane za 24 miesiące, ale częściej, jeśli będą wskazania kliniczne. Poza tym badanie poniższych parametrów na początku badania, 6 i 12 miesięcy po operacji, pozwoli nam zbadać hipotezę, że modulujący wpływ na produkcję inkretyn może prowadzić do lepszej kontroli glikemii niezależnie od utraty masy ciała.

• Insulina, C-peptyd (analizator automatyczny), HOMA-IR (wartość obliczona)
• Subfrakcjonowanie lipoprotein w systemie Lipoprint LDL.
• Inkretyny (GLP-1, GIP)
• Adipokiny, takie jak leptyna
• Adiponektyna
• FGF19 (czynnik wzrostu fibroblastów 19)
• Czynnik martwicy nowotworu-alfa (TNF-alfa)

Analiza genetyczna:

Ekstrakcja DNA — analizy laboratoryjne zostaną przeprowadzone po całonocnym poście, a osocze zostanie oddzielone przez wirowanie i przechowywanie w temperaturze -20°C. Dostępne komercyjne metody ekstrakcji DNA zostaną wykorzystane w celu uzyskania dobrego DNA pod względem ilości i jakości.

Kwantyfikacja DNA - Jakość wyekstrahowanego DNA zostanie oceniona za pomocą elektroforezy, a stężenie wyekstrahowanego DNA zostanie oszacowane za pomocą spektrofotometru.

Analiza genotypowania-

• Standaryzacja reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) zostanie przeprowadzona dla odpowiednich genów.
• Identyfikacja i analiza polimorfizmów genów kandydujących genów GCG, GLP1R, DPP4, GIP, GIPR i PCSK1 metodą konwencjonalnego PCR, PCR-RFLP, Real time-PCR High Resolution Analysis.

Barwienie i wizualizacja genomowego DNA – elektroforeza agarozowa zostanie przeprowadzona w celu określenia produktów PCR poprzez barwienie bromkiem etydyny. Genomowy DNA, produkty amplifikowane metodą PCR i fragmenty ograniczone zostaną zwizualizowane w świetle ultrafioletowym, a obraz zostanie przechwycony przez Alpha Imager.

Walidacja - Prawie 10% próbek zostanie wybranych losowo, a próbki zostaną poddane genotypowaniu w tym samym teście po raz drugi, a wyniki zostaną ocenione przez drugiego badacza.

Kontrole dodatnie i ujemne Produkty zamplifikowane metodą PCR z odpowiedniego genu zostaną zsekwencjonowane w celu identyfikacji genotypów. Próbki te zostaną użyte jako kontrola pozytywna dla odpowiednich genów, a woda do PCR pozbawiona matrycy DNA zostanie użyta jako kontrola negatywna.

Metody sekwencjonowania DNA-

• Przeprowadzone zostanie sekwencjonowanie DNA w celu potwierdzenia polimorfizmu odpowiednich genów.
• Wyniki sekwencjonowania zostaną poddane BLAST (www.ncbi.nlm.nig.gov/BLAST) i zostały zweryfikowane z opublikowaną sekwencją genu dla odpowiedniego genu.

Analiza danych:

Obliczenia statystyczne zostaną przeprowadzone przy użyciu standardowego pakietu oprogramowania statystycznego IBM SPSS Statistics dla systemu Windows, wersja 23.0. Armonk, NY: IBM Corp. Wyniki zostaną wyrażone jako wartości średnie i odchylenie standardowe dla zmiennych o rozkładzie normalnym. Mediana i rozstęp międzykwartylowy (IQR) zostaną obliczone dla wszystkich zmiennych ciągłych o rozkładzie normalnym. Testy nieparametryczne, takie jak test U Manna-Whitneya i/lub test Kruskalla-Wallisa, będą stosowane do nienormalnego rozkładu zmiennych. Powiązania między zmiennymi jakościowymi zostaną określone za pomocą testu chi-kwadrat, dokładnego testu Fishera i dokładnej tabeli kontyngencji SAS. We wszystkich analizach statystycznych wartość p < 0,05 (95% przedział ufności) uznano za istotną statystycznie.

Analiza wariancji (ANOVA) zostanie wykorzystana do sprawdzenia znaczących różnic między średnimi.

• Jednoczynnikowa analiza regresji logistycznej zostanie wykorzystana do określenia synergistycznego efektu wariantów genetycznych
• Równowaga Hardy'ego-Weinberga dla rozkładu genotypowego zostanie oceniona za pomocą dokładnego testu równowagi Hardy'ego-Weinberga.
• Oprogramowanie Rotor-Gene 6000 (wersja oprogramowania 1.7, wersja 87) zostanie wykorzystane do analizy HRM dla pewnych polimorfizmów genów poprzez wygenerowanie znormalizowanej krzywej topnienia, wykresu różnic i wykresu pochodnej.

Zmienne kategoryczne z tego badania, takie jak wskaźnik masy ciała (BMI), glukoza na czczo, HbA1c, poziomy peptydu C, insulina w osoczu i HOMA-IR, zostaną przedstawione jako liczba i procent, a następnie porównane między grupą SADJB-SG i grupą IMT przez SPSS metoda.

Etyka studiowania:

Zgoda etyczna zostanie uzyskana od Komisji ds. Etyki Badań z udziałem Ludzi Universiti Putra Malaysia (JKEUPM) i Kuala Lumpur General Hospital. Niniejsze badanie zostanie przesłane do Krajowego Rejestru Badań Medycznych (NMRR) w celu uzyskania zezwolenia Komisji ds. Badań Medycznych i Etyki Ministerstwa Zdrowia Malezji (MREC). Świadoma zgoda zostanie uzyskana od każdego uczestnika badania.

Konflikt interesów:

Wśród śledczych nie ma konfliktu interesów.