Estudo Clínico Exploratório da Sonda de Ativação de Neutrófilos (NAP) para Imagem Molecular Óptica em Pulmões Humanos (NAP)

A lesão pulmonar aguda (ALI)/síndrome do desconforto respiratório do adulto (SDRA) é clinicamente importante (16% dos pacientes ventilados mecanicamente adquirem ALI, dos quais um terço morre), mas nenhuma terapia farmacológica demonstrou ter um impacto significativo no resultado. Isso se deve em parte à estratificação inadequada de pacientes com ALI/SDRA predominantemente neutrofílica e à incapacidade de determinar a atividade da doença e, portanto, a terapia alvo.

A Imagem Molecular (MI) oferece uma estratégia potencial para visualizar a atividade dos neutrófilos in vivo in situ. De fato, o FDG PET tem sido usado para visualizar a atividade dos neutrófilos, mas não é uma modalidade à beira do leito, e mover pacientes gravemente enfermos para scanners remotos é perigoso e caro e atualmente não há soluções de MI 'inteligentes' à beira do leito que possam orientar, no nível celular/ nível funcional, a via diagnóstica ou terapêutica em pacientes com doença pulmonar inflamatória. De fato, na UTI, há uma necessidade específica de diagnosticar rapidamente pacientes com troca gasosa deteriorada, particularmente aqueles com sombreamento de radiografia de tórax (CXR). Esses infiltrados de CXR resultam de várias causas, incluindo insuficiência cardíaca, sobrecarga de fluidos, pneumonia secundária e ALI/ARDS. Todos requerem tratamentos diferentes, mas, atualmente, as opções para distinguir essas condições são severamente limitadas, resultando em terapia antimicrobiana empírica 'bacamarte' e não correção da condição primária. Existe agora uma necessidade premente de estratificar rapidamente esses pacientes para informar a implementação focada de terapias direcionadas específicas.

Os neutrófilos ativados e seus produtos histotóxicos, particularmente a elastase de neutrófilos humanos (HNE), foram especificamente implicados na patogênese da ALI/SDRA, e há um interesse clínico considerável em novos medicamentos nessa área. No entanto, atualmente não há como determinar rapidamente se novos candidatos terapêuticos estão exercendo seus efeitos previstos in situ no pulmão humano antes de embarcar em grandes ensaios clínicos. Tal solução inevitavelmente aceleraria o caminho de novas drogas para aplicação clínica.

A solução proposta: endomicroscopia confocal a laser baseada em sonda (pCLE) combinada com instilação intrapulmonar direta de microdoses (farmacologicamente inativas e não tóxicas) de uma 'smartprobe' (NAP) altamente específica e sensível detectará a atividade de neutrófilos e a presença de HNE ativo nos pulmões de pacientes ventilados na UTI.

O próprio pCLE fornece com segurança imagens em tempo real e de alta resolução do pulmão humano em resolução celular in situ. Sozinho, no entanto, não fornece nenhuma informação funcional ou molecular. Os investigadores, portanto, embarcaram em um programa de descoberta para sintetizar smartprobes altamente sensíveis, detectáveis ​​por pCLE e direcionados especificamente contra eventos inflamatórios importantes. Isso fornece uma nova dimensão de aplicação clínica para esta tecnologia de ponta. NAP, o protótipo já foi validado in vitro e in vivo, onde é eficaz em uma dose de < 10µg e gera um poderoso sinal fluorescente em < 30 seg. Os objetivos do nosso estudo piloto são aplicar a utilidade combinada de pCLE e NAP em voluntários saudáveis ​​e pacientes com doença pulmonar inflamatória. O estudo também fornecerá uma base prototípica que pode ser aplicada a futuros smartprobes, não apenas no pulmão, mas em qualquer órgão acessível à endoscopia.

O ponto final primário será uma demonstração de prova de conceito de que esta técnica pode ser usada para visualizar neutrófilos ativados em autofluorescência de fundo. Outros pontos finais incluem segurança. Os investigadores devem também avaliar a ativação dos neutrófilos alveolares (por broncoscopia) e a atividade da elastase nos pacientes. Espera-se que a demonstração de neutrófilos ativados por pCLE na UTI leve diretamente a ensaios clínicos em pacientes com ALI/ARDS.