Monitoramento MRD Molecular Individual para Pacientes MDS Após Allo-SCT

Este estudo visa desenvolver métodos altamente sensíveis para detecção precoce de recaída com base nas mutações únicas dos pacientes.

Triagem de mutações Em colaboração com o Departamento de genética clínica de Uppsala, será realizada uma triagem inicial de mutações usando o painel comercial de sequenciamento TrueSight©, que inclui 54 genes com mutação recorrente em doenças mieloides. Com base nas mutações identificadas, serão projetados primers de PCR para todas as mutações específicas do paciente. Pacientes sem qualquer mutação serão excluídos do estudo. A triagem mutacional é realizada assim que um paciente é identificado como candidato potencial para transplante alogênico de células-tronco (SCT) e avaliado para o tratamento pré-SCT mais ideal. O paciente é incluído no estudo antes da amostragem de medula óssea precedendo o SCT. Caso uma triagem mutacional não tenha sido realizada antes do tratamento pré-SCT MDS, uma triagem mutacional da amostra do biobanco nacional de diagnóstico (sangue periférico) pode ser realizada.

Vigilância de DRM Após o transplante, amostras de sangue periférico serão coletadas uma vez por mês; e amostras de medula óssea serão coletadas no mês 1, 3, 6 após SCT seguido de amostragem a cada três meses até recaída ou morte. As amostras são enviadas para o Biobanking and Molecular Resource Infrastructure of Sweden (bbmri), que extrairá o DNA e armazenará as amostras. Usando o método de PCR digital altamente sensível, os investigadores determinarão o tamanho dos diferentes clones em diferentes pontos de tempo. Além do biobanco de DNA, o bbmri coletará células mononucleares (MNCs) congeladas vitais para serem usadas em estudos experimentais.

Análises de marcos estatísticos serão realizadas em diferentes momentos após o SCT, usando a presença de MRDs como um fator de risco incluído em uma análise multivariada. Além disso, os investigadores irão calcular a sensibilidade, especificidade e valor preditivo para MRDs em relação à recaída. Para cada mutação específica, com frequência alta o suficiente na coorte, os investigadores definirão valores de corte do MRD onde a recaída é iminente.