坦桑尼亚接受产前检查的孕妇 HBV 流行率 (HBVPMTCT)

全世界有超过 20 亿人感染乙型肝炎病毒 (HBV)。 其中，有 2.4 亿人是 HBV 的慢性携带者，并且有死于急性暴发性肝病、肝硬化或肝细胞癌 (HCC) 的风险。 世界卫生组织 (WHO) 指出，乙型肝炎的流行率在撒哈拉以南非洲和东亚地区最高，估计有 5-10% 的成年人口被慢性感染。 目前，工业化国家已经批准了几种药物用于治疗慢性 HBV 感染，这些药物遵循专业医疗机构制定的指南。 慢性乙型肝炎感染的抗病毒治疗可显着延缓肝硬化的进展，降低 HCC 的发病率并提高长期生存率。 然而，在包括坦桑尼亚在内的许多资源有限的地区，这种治疗尚未实施。

在资源有限的环境中缺乏治疗机会意味着预防 HBV 感染至关重要。 在 HBV 流行率高的国家，大多数 HBV 传播发生在儿童时期。

在坦桑尼亚，坦桑尼亚达累斯萨拉姆的献血者或成年人中急性或慢性 HBV 感染（定义为乙型肝炎表面抗原 HBsAg 检测阳性）的患病率分别为 8.8% 和 6%。 患有慢性 HBV 的人终生有发生肝硬化、肝衰竭或肝细胞癌 (HCC) 等并发症的风险。 慢性乙型肝炎感染是坦桑尼亚 HCC 的主要原因，目前尚无治疗方法。 坦桑尼亚没有针对医护人员的 HBV 国家建议或疫苗接种计划。 然而，在 2002 年，作为扩大免疫计划（称为 EPI）的一部分，坦桑尼亚实施了 WHO 对儿童进行一般 HBV 疫苗接种的政策。 根据通报数据，2008年1岁儿童疫苗接种覆盖率达到84%，接种时间为生后4周、8周、12周。 超过 60% 的感染是在儿童早期通过母婴传播获得的。 这种早期传播导致 90% 的受感染新生儿感染慢性乙型肝炎，因此，在出生后最早 4 周接种疫苗可能为时已晚，无法预防母婴传播。 事实上，在坦桑尼亚，我们可以估计有 140 万早期通过母婴传播的慢性乙型肝炎感染。

有两种干预措施可以预防母婴传播：

1. 在孩子出生后直接实施乙型肝炎免疫球蛋白 (HBIg)
2. 出生后24小时内进行乙肝病毒主动免疫。 第一次干预非常昂贵（每名儿童 100 欧元），因此对于坦桑尼亚的卫生系统来说是不可持续的。 第二种干预措施更便宜，是 WHO 推荐的。

HBV 感染在低收入国家是一种被忽视的疾病，在坦桑尼亚也很少进行研究。 感染的主要途径之一是母婴传播，关于如何减少传播有多种想法。 受感染孕妇的抗病毒药物、出生后直接实施 HBIg 或出生后 24 小时内主动免疫是最流行的方法。 不幸的是，由于多种原因，这些都没有在坦桑尼亚实施。 所有干预措施的成本是反对其实施的一个论据，尽管事实证明预防感染更具成本效益，而不是面对患有这种疾病的人的长期成本。 另一个问题是在坦桑尼亚背景下对这个话题的了解不足。 有必要对更多人群进行更多研究，以显示早期干预的重要性以及因接种太晚而导致的母婴传播病例的问题。

每一次避免感染对整个人群都是有益的，因为其他儿童或家庭成员被感染的可能性降低了。 为了识别处于危险中的婴儿，需要进行筛查计划。 因此，应该为公共卫生机构的每位孕妇提供快速 HBsAg 检测。 有了更好的信息，人们对该病的认识就会提高，完全接种疫苗的儿童人数也会增加。

在我们的研究中，我们想确定在坦桑尼亚三级医院、地区医院或地区医院就诊的孕妇中 HBsAg 的流行率。 应在妇科通过 HBsAg 快速检测确定研究人群。 血液将取自 HBsAg 快速检测呈阳性的母亲及其子女的脐带血。 此外，我们还想评估可能导致乙型肝炎感染风险增加的风险因素。 因此，我们的研究助理会向参与者询问几个风险因素。 为了给患者带来一些好处，我们将在出生后 24 小时内为 HBsAg 阳性母亲的孩子接种疫苗，主动免疫已被证明可以降低 MCTC 的可能性。

血液的实验室检查将为我们提供有关 HBV 感染的血清学、基因型和病毒载量的更多详细信息。 这可能会向我们展示风险因素与可能的宫内 HBV 传播之间的关系。

在坦桑尼亚，没有足够的关于 HBV 流行率、危险因素、病毒载量和基因型的数据。 这项研究将提供有关儿童宫内感染的更多数据。

该研究的总体目标是确定在坦桑尼亚姆万扎地区的四个不同研究地点参加产前检查的妇女中乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) 的患病率。

具体目标是：

1. 确定孕妇 HBV 感染的病毒载量和基因型。
2. 确定与孕妇 HBV 感染相关的危险因素。
3. 通过在 BMC、Seka Toure 或 Sengerema 医院分娩的 HBsAg 阳性母亲的孩子的脐带血 HBV PCR 阳性来确定宫内感染的患病率。
4. 确定参加 BMC 分娩的母亲的 HBV 基因型、病毒载量和 HBeAg 状态对传播给孩子的可能性的影响。

方法

该研究将在三个不同的研究地点进行：

在坦桑尼亚姆万扎的 Bugando 医疗中心 (BMC) 妇产科。 该部门每年有 6000 例分娩，对于研究的第二部分，我们仅选择经快速检测诊断为 HBsAg 阳性的女性。

第二个站点将是姆万扎地区医院 Seka Toure，第三个站点将是 Sengerema 的地区医院。 大约 500 名女性将在 BMC 接受测试，250 名女性将在其他研究地点接受测试，总共 1000 名患者

合作机构是 BMC、坦桑尼亚姆万扎的天主教健康与联合科学大学 (CUHAS)、医学病毒学系、医学与健康科学学院、斯泰伦博斯大学和 NHLS Tygerberg，南非开普敦，医学Mission Institute 和维尔茨堡大学/病毒学和免疫生物学研究所，维尔茨堡，德国。

学习规划：

该研究是一项横断面研究。

研究患者群体：

在 Bugando 医疗中心、Seka Toure 地区医院和 Sengerema 地区医院就诊的 18 岁及以上孕妇。

样本量 对于横断面研究，样本量是根据先前的研究 (17) 计算得出的预期流行率为 3.5%。

显着性水平 = 5%，功效 = 80%，测试类型 = 横截面 计算样本量的公式为 (38) n = [Z1-α/2²p(1-p)]/d²

我们计划对 1000 名女性进行研究。 如果真正的患病率为 3.5%，我们将需要研究至少 51.9 名患者才能拒绝零假设，即病例和对照的暴露率与概率（功效）0.8 相等。

样本采集及持续时间 为诊断乙型肝炎阳性母亲，将对孕妇进行手指点刺试验，以评估是否有HBsAg。 如果测试呈阳性，将取 12 毫升 EDTA 血液（3 次 4 毫升）），离心并将血浆储存在 -20°C 下用于进一步分析。

对于研究的第二部分，将在出生后收集在 BMC 1.5 ml 处出生的儿童的脐带血，并储存在 -20°C 以供进一步分析。 24 个月后，将采集另一份血样并储存在 -20°C 下以供进一步分析。 将分析所有 HBsAg 阳性母亲的血液，包括乙型肝炎血清学（HBsAg、HBeAg）、HBV-DNA PCR 和来自初级保健诊所的妇女的肝转氨酶。 来自儿童的血液将通过 HBV-DNA PCR 进行分析。 采集脐带血并在出生后立即进行处理仅在 BMC 中才有可能，因此这些分析将在 BMC 而非其他研究地点出生的儿童中进行。

问卷和血样将仅标有研究编号。

数据收集 问卷将用于收集有关风险因素的信息，包括艾滋病病毒感染状况、年龄、居住地、婚姻状况、受教育程度、职业、胎次和重力、一生性伴侣史、初次性接触年龄、危险因素史（输血、手术、吸毒、静脉注射）、HBV 疫苗接种史、性传播感染史、避孕套使用史、生殖器包皮环切术、共用牙刷或剃须刀以及家庭或自身的黄疸病史（病例报告表）。 患者的数据将在登记时收集。 将提供 CRF 表格。 这些表格必须打印清晰。 副本将保留在调查员的档案中。 CRF 和所有原始数据应在计划的监测访问期间随时可用以供审查。 对于患者识别，研究中包括的所有患者都将在研究文件中按时间顺序输入他们的医院记录号、出生日期和患者分配号。 所有相关信息的副本将由研究者在研究完成后至少保留 10 年。

实验室分析 血液分析 在登记当天，将进行床旁乙型肝炎表面抗体检测。 该测试（Nal Diagnostics）已通过 CE 认证。 根据制造商的数据，该测试的灵敏度、特异性和准确性均 > 99%，截止值为 m10 IU 抗-HBs。

血浆样本将在 -20°C 下冷冻，并在登记完成后运送用于进一步分析。 在斯泰伦博斯大学医学病毒学系，将使用 ELISA 技术对所有样本进行血清学检测和 PCR 病毒载量测量的以下检测：

• 乙型肝炎 - 表面抗原 (HBsAg)
• 乙型肝炎 - 表面抗体（抗-HBs）
• 乙型肝炎 - 核心抗体（抗-HBc）

该测试板可区分自然获得的感染、疫苗接种产生的抗体和慢性乙型肝炎。

慢性乙型肝炎病例将接受进一步检测：

• 乙型肝炎 e 抗原 (HBeAg)
• 乙型肝炎 e- 抗体（抗 HBe）

对于 HBV DNA PCR，将通过柱提取法从血浆中分离 DNA，然后进行 PCR 扩增。 阳性 PCR 反应将使用 ABI-Prism-310-Genetic-Analyzer-System 进行测序。 序列将提交给 GenBank。 用这些方法。

• 乙型肝炎病毒载量
• 乙型肝炎基因分型

将被确定。 为了检测血浆中肝转氨酶的含量，将使用分光光度法测量分析

• 天冬氨酸氨基转移酶 (AST/GOT)
• 谷丙转氨酶(ALT/GPT) 统计分析 问卷的条目将通过双录入的方式转移到EXCEL 表中。 第二个条目将独立于第一个条目及时完成，并将与第一个条目进行比较。 P < 0.05 将被视为具有统计学差异。 将使用 SPSS 和 GraphPad Prism 软件计算 95% 置信区间 (CI)。

伦理考量 伦理委员会/机构审查委员会 最终批准的协议，包括知情同意书，将提交给联合 Bugando 医学中心/天主教健康与相关科学大学 (BMC/CUHAS) 伦理与审查委员会，以进行伦理审查。 调查员将同意向伦理和审查委员会提交所需的进展报告，并报告任何严重的不良事件、危及生命的问题或死亡。 研究终止必须由研究者通知伦理委员会。 将征求研究地点诊所相关当局的许可。

患者知情同意 在纳入研究之前，患者将被告知研究的性质，并将获得有关预期目的、可能的益处和可能的不良经历的相关信息。 将解释患者暴露的程序和可能的危险。 然后将由患者、证人和研究者阅读并签署知情同意书。

对患者的可能益处 刚出生后，接种疫苗是减少乙型肝炎从受感染母亲传播给孩子的最有效方法之一。 我们的研究将使所有孕妇有机会免费进行快速检测。 如果呈阳性，母亲可以通过主动免疫保护新生儿免受 HBV 感染（以防她将在研究地点分娩。 以及在 BMC 进行免费后续筛查所带来的毁灭性后果。

尽管妇女自身无法获得任何治疗，但诊断可能会提高她们对这种感染的认识，并可能有助于减少传播。

在研究地点出生的孩子在出生后直接接种疫苗可获得额外保护。