Kvantiferon - Cytomegalovirus (CMV) a predikce CMV infekce u vysoce rizikových příjemců transplantací pevných orgánů

CMV je nejčastější virovou infekcí po transplantaci solidních orgánů (SOT) a je spojena s významnou morbiditou1. Bez profylaxe se většina CMV onemocnění vyskytuje v prvních 3 měsících po transplantaci během období intenzivní imunosuprese.2 Nejrizikovější příjemci SOT jsou ti, kteří jsou séronegativními příjemci orgánů od séropozitivních dárců (CMV D+/R-).3, 4 Antivirová činidla se ukázala být užitečná v prevenci CMV infekce a onemocnění u příjemců SOT, včetně vysoce -rizikové D+/R- pacienti.5-9 Po dokončení profylaxe se však CMV infekce a onemocnění objeví u přibližně 50 % a 25–30 % příjemců D+/R-SOT během prvního roku po transplantaci [30% míra CMV onemocnění léčených zkoušejícím u PV16000].9 Incidence CMV infekce po profylaxi u příjemců transplantátu plic D+/R- může dosahovat až 80 %.10 Protože onemocnění CMV vyskytující se po profylaxi bude nadále ovlivňovat morbiditu a mortalitu příjemců SOT, bylo by žádoucí být schopni předpovědět, u kterého pacienta se tato komplikace rozvine. V současné době neexistují žádné spolehlivé metody, které by byly běžně dostupné k predikci rizika CMV infekce nebo onemocnění u jednotlivého pacienta. Ukázalo se, že testování virové zátěže CMV po profylaxi u pacientů s D+/R- má nízkou prediktivní hodnotu pro následné onemocnění CMV.11 CMV sérologie (míra humorální imunity) se také ukázala být pouze okrajovým využitím při predikci rizika pozdního nástupu onemocnění.12 Je známo, že buňkami zprostředkovaná imunita (CMI) je při kontrole CMV infekce důležitější než humorální imunita. CMV infekce vyvolává silnou virově specifickou odpověď CD4+ a CD8+ T-buněk. Odpovědi CD8+ T-buněk na virus často obsahují mnohočetné antigen-specifické reaktivity včetně virových antigenů pp65 nebo IE-1, stejně jako pp50, glykoproteinu B a IE-2 a dalších antigenů.13 CD4+ T buňky také hrají roli v CMV kontrole prostřednictvím podpory aktivace, expanze a udržování CD8+ CMV-specifických CTL.14 Měření individuální CMI odpovědi na CMV může být užitečným prediktorem rizika CMV infekce nebo onemocnění po profylaxi. Pacienti se špatnou odpovědí CMI (zejména špatnou odpovědí CD8+ T-buněk) by pak mohli být zaměřeni na delší cykly antivirové profylaxe.

Testování imunity zprostředkované buňkami Většina předchozích studií se zaměřila na odpovědi CTL na CMV fosfoprotein pp65.15-17 Protože však odpovědi CD8+ T-buněk na CMV často obsahují mnohočetné antigen-specifické reaktivity, měření CMI pomocí epitopů omezených na jeden protein nemusí poskytnout adekvátní výsledky. Ve spolupráci s Dr. Rajivem Khannou (Queensland Institute of Medical Research, Austrálie) a Cellestis Ltd (Sydney, Austrálie) jsme provedli předběžné ověření a posouzení testu CMI (Quantiferon-CMV), ve kterém měříme IFN-γ reakce na řadu T-buněčných epitopů virových proteinů CMV včetně pp65, pp50, glykoproteinu gB a bezprostředního časného antigenu IE-1, které jsou specifické pro širokou škálu specifit HLA třídy I [viz příloha Tabulka 1]. Test využívá peptidový pool pro stimulaci plné krve a je vhodný pro rutinní klinické použití a hodnocení v multicentrických studiích.

Test Quantiferon-CMV byl srovnáván s testem ELISPOT ve studii zahrnující 37 zdravých dobrovolníků a 25 příjemců SOT.18 V této studii byl test Quantiferon-CMV alespoň stejně citlivý jako ELISPOT pro některé epitopy CMV a citlivější pro jiné epitopy CMV. Navíc výsledky Quantiferonu-CMV vysoce korelovaly se sérostatem CMV, a to jak u zdravých dobrovolníků, tak u příjemců transplantátu. V jiné studii19 byl test Quantiferon-CMV použit u jedinců infikovaných HIV s anamnézou CMV onemocnění i bez něj. CMV specifická imunitní odpověď měřená testem Quantiferon-CMV byla vyšší u pacientů bez onemocnění CMV v anamnéze, což naznačuje, že pozitivní výsledek testu Quantiferon-CMV může předpovídat pravděpodobnost rozvoje ochranné imunitní odpovědi proti CMV.