Diagnostika infekce rohovky

Mikrobiální keratitida je běžné závažné oční onemocnění v Edinburghu. Rychlá léčba antibiotiky může zabránit ztrátě zraku a identifikace mikroorganismu a jeho citlivosti jsou klíčem k odpovídající léčbě. Standardní praxí je odebírat více vzorků z rohovky pomocí jehly nebo čepele a materiálu destičky z vředu na kultivační médium. To však může být pro pacienta stresující a postup může být obzvláště obtížný u těch, kteří nespolupracují nebo kde existuje riziko perforace rohovky. Seškrabování rohovky je také časově náročné na přípravu a provedení. Rohovkové impresní membrány (CIM) byly nedávno zavedeny do klinické praxe na oční jednotce St Paul's Eye Unit v Liverpoolu poté, co studie zjistila výrazně vyšší izolaci mikroorganismů z CIM ve srovnání s rohovkovým seškrábnutím (40,8 % vs. 26,9 % u n=130 očí) . CIM se však v současné době ve Skotsku v klinické praxi nepoužívají a výsledky z Liverpoolu zatím nebyly replikovány v druhé studii.

Na jaké otázky má studie odpovědět?

1. Je CIM lepší při zachycení zárodku způsobujícího infekci rohovky než škrábání rohovky v Edinburghu?
2. Je CIM přijatelná z hlediska vedlejších účinků ve srovnání s rohovkovým škrábáním?
3. Lze na CIM použít nové diagnostické techniky k detekci mikroorganismů?

Jaké nové informace výzkum přinese? Zda jsou CIM v Edinburghu klinicky užitečné nebo ne. Je možné, že tato studie najde vyšší frekvenci kontaminantů s CIM a výzkumníci zaznamenají konkrétní organismus i frekvenci pro analýzu. Projekt také určí, zda lze na CIM od pacientů použít nové diagnostické techniky vyvíjené na Edinburské univerzitě.

Jedná se o průřezovou studii, jejímž cílem je porovnat diagnostickou přesnost korneální impresní membrány (CIM) s klinickým referenčním standardem rohovkového seškrabu.

Hypotéza spočívá v tom, že CIM je lepší ve sběru choroboplodných zárodků z oka než tradiční škrábání rohovky. Druhou hypotézou je, že CIM je pro pacienta přijatelnější.

Studie se řídí metodami předchozí studie v Liverpoolu a získá po sobě jdoucí sérii pacientů s bakteriální, plísňovou nebo akantamébovou mikrobiální keratitidou. K účasti budou pozváni pacienti, kteří budou navštěvováni v akutní referenční klinice Princess Alexandra Eye Pavilion nebo večer nebo o víkendech na zavolání. Cílem studie je získat 120 očí (detekovat rozdíl 0,15 mezi nesouhlasnými proporcemi (80% síla, 2-stranná významnost 5%; McNemarův test; na základě výsledků Liverpoolské studie).

Po informovaném souhlasu lékař provede anestezii rohovky a odebere rohovkový materiál z vředu pomocí chirurgických čepelí. Seškrab rohovky bude proveden jednou pro každou misku s kultivačním médiem, jednou pro nátěr Gramovým barvením a jednou pro akantamébu (pokud je indikována) na oko. Jedná se o standardní klinickou péči.

Poté bude na vřed aplikována série čtyř CIM, zatímco oko je stále v anestezii. CIM je kruh z filtračního papíru na plastovém aplikátoru. Dotýká se vředu po dobu 3-5 sekund a poté se umístí do sterilní nádoby s vývarem.

Vzorky z rohovky budou zaslány na mikrobiologii ke zpracování podle standardní klinické praxe spolu s jednou CIM pro srovnání. Tři další CIM budou odeslány na University of Edinburgh k analýze pomocí nových mikrobiologických testů. Pacienti budou léčeni empiricky v souladu s aktuální místní standardní praxí během čekání na výsledky mikrobiologie.

Jak se keratitida diagnostikuje? Lékař může zjistit, zda došlo k infekci rohovky (tj. diagnostikovat mikrobiální keratitidu) pouhým vyšetřením oka. Aby se však zjistilo, který zárodek způsobuje infekci, musí být vzorky vředu odeslány do mikrobiologické laboratoře. Tradičně se to provádí oškrábáním rohovky čepelí nebo jehlou, ale to je nepříjemné a ne vždy se z oka vychytají zárodky. Vyšetřovatelé si myslí, že CIM zachytí více choroboplodných zárodků a bude pro pacienta méně nepříjemná.

Co budou nové mikrobiologické testy na univerzitě zahrnovat? CIM odeslaný na univerzitu bude testován v laboratoři pomocí nových metod, které jsou v současné době ve vývoji. Ty využívají k detekci bakterií speciální sondy. Vyšetřovatelé určí, zda optické chytré sondy, které jsou schopny detekovat grampozitivní nebo gramnegativní bakterie nebo houby v reálném čase (vyvinuté v rámci skupiny Proteus (proteus.ac.uk) na univerzitě v Edinburghu), jsou schopny identifikovat infekční patogen na CIM.

Jak a kde budou pacienti nabíráni? Pacienti, kteří se dostaví do očního pavilonu princezny Alexandry, budou pozváni, aby se zúčastnili, pokud mají symptomy a příznaky typické pro mikrobiální keratitidu. Tito pacienti budou přijímáni z kliniky akutního doporučení nebo z pohotovostní služby mimo pracovní dobu.

Jak dlouho budou návštěvy trvat? Běžná návštěva akutní referenční kliniky nebo očního lékaře na zavolání pro mikrobiální keratitidu může trvat až hodinu. Je nepravděpodobné, že by dodatečná práce se souhlasem pacienta a aplikací CIM nepřinesla významné množství času návštěvě. Vyšetřovatelé odhadují přidání ve většině případů na méně než 30 minut. Přestože pacientům může trvat déle, než se rozhodnou zúčastnit se, proces aplikace CIM je sám o sobě velmi rychlý (celkově přibližně 5 minut, CIM jsou na oku každý pouze 3-5 sekund).

Existují nějaké následné návštěvy? Pacienti budou sledováni v rámci standardní péče, ale tento projekt nezahrnuje žádné sledování pro výzkumné účely.

Jak se zachází s účastníky? Standardní péčí o mikrobiální keratitidu jsou širokospektrální antibiotické oční kapky. Ty se podávají ihned po seškrábnutí rohovky. Léčba antibiotiky se později změní, pokud výsledky laboratorních testů ukazují, že je to nutné. Vyšetřovatelé budou postupovat podle standardní praxe.

Potřebují oftalmologové speciální školení pro aplikaci CIM? Vyšetřovatelé poskytnou lékařům jedno školení o správných postupech při škrábání a CIM. Kromě toho budou pro každého účastníka k dispozici pokyny k použití CIM v sáčku s CIM.

Pokud je vřed v obou očích, odeberete vzorky z obou? Ano

Absolvoval účastník nějakou léčbu před náborem? Možná. Někdy byli pacienti s mikrobiální keratitidou ošetřeni svým optikem nebo praktickým lékařem před odesláním do očního pavilonu. To neovlivní způsobilost pro studii, ale vyšetřovatelé zaznamenají, která antibiotika byla použita před náborem.

Jak se CIM připravuje? CIM jsou dodávány společností Merck ve sterilním balení. Jsou připraveny k použití. Žádné další zpracování neprobíhá.