Expanze virově specifických lymfocytů pro buněčnou terapii

Navrhovaná klinická studie je jednoramenná infuzní studie fáze I lymfocytů specifických pro cytomegalovir (CMV) pocházejících z derivátů buffy-coat dárců krevních destiček (ImmuneCellVir-I). T lymfocyty jsou expandovány, stimulovány peptidem (pp65) z virové kapsidy a selektovány podle produkce interferonu-y (INF-y) v reakci na stimul. Po selekci budou lymfocyty zmraženy a uvolněny k infuzi příjemcům podle HLA kompatibility, výsledek aerobních/anaerobních kultur a speciálních mikroorganismů/plísní, endotoxin, sérologické testy dárce, PCR na CMV, EBV a B19 produktu, NAT HCV , HIV, HBS a HTLV-1/2 produktu a výsledky testů nečistot a účinnosti produktu.

Hlavním cílem studie je vyhodnotit bezpečnost a snášenlivost infuze lymfocytů specifických pro cytomegalovir (CMV) u pacientů s infekcí CMV, kteří nereagují na konvenční léčbu nebo jejichž farmakologická léčba může být v potransplantačním kontextu toxická. Jako sekundární výstup ke stanovení účinnosti infuze CMV-specifických lymfocytů Hlavním přínosem pro potenciální účastníky je léčba cytomegalovirové infekce u pacientů, kteří jsou refrakterní nebo netolerující zavedenou medikamentózní léčbu. Kromě toho by infuze lymfocytů specifických pro CMV mohla potenciálně pomoci při imunitní rekonstituci pacientů. Očekává se, že s touto terapeutickou modalitou bude možné léčit pacienty, kteří nemají jinou léčebnou alternativu. Zatímco známá možná rizika souvisejí s reakcemi na infuzi alogenního produktu s kryokonzervací a potenciálním rizikem reakce štěpu proti hostiteli.

Možný mechanismus účinku této terapie by byl prostřednictvím infuzí CMV-specifických dárcovských buněk, které by rozpoznaly CMV-infikované buňky u pacienta. CD4 T lymfocyty zesilují imunitní odpověď sekrecí cytokinů, CD8 T lymfocyty napadají buňky infikované CMV, uvolňují perforiny a granzymy.

Cytomegalovirus (CMV) specifické lymfocyty budou podávány intravenózně. Pacienti dostanou terapii obsahující celkové množství 1x106 CMV-specifických T lymfocytů, což odpovídá dávce 1-2x104/kg hmotnosti příjemce, kterou lze opakovat až 2krát s minimálním intervalem 2 týdnů mezi infuzemi, pokud pacient přetrvává s přítomností kritérií pro zařazení do studie. Zkouška bude provedena v souladu s protokolem, správnou klinickou praxí a regulačními požadavky.

V tuto chvíli není možné konstatovat, že z této studie budou mít přímý prospěch všichni účastníci výzkumu. Jeho vývoj však umožní lepší znalost této buněčné terapie, umožní zlepšení protokolu a větší efektivitu v budoucích protokolech, které mají být prováděny. Očekává se, že navržená léčba přinese účastníkům výzkumu alespoň lepší kvalitu života s poklesem komplikací vyplývajících z onemocnění.

Infuzní reakce, vývoj reakce štěpu proti hostiteli (GvHD) a imunogenicita Primární výsledky bezpečnosti ImmuneCellvir -I budou ověřeny u pacientů, kteří budou sledováni během infuze a 7 po sobě jdoucích týdnů po infuzi a také 100, 180 a 365 dnů . Po infuzi buněk budou pacienti každých 15 minut sledováni z hlediska vitálních funkcí (mmHg), tepové frekvence a hladiny kyslíku v krvi a musí být instruováni, aby v případě jakýchkoli neobvyklých příznaků kontaktovali studijní tým. Po infuzi bude 6 návštěv (1/týden) a 100 dní, 6 měsíců a 1 rok po infuzi. U pacientů budou sledovány klinické příznaky a symptomy akutní a chronické GvHD, jako jsou změny gastrointestinálního traktu, změny kůže, očí, jater, pohybového aparátu a plic. Pacient bude po dobu 7 týdnů testován na bilirubin (μmol/L), alkalickou fosfatázu (U/L), gama-glutamyltransferázu (U/L), glutamát-oxalooctovou transaminázu/glutamát-pyruvtransaminázu (U/L), krevní obraz (buňky/mm3), kreatinin (mg/dl), močovina (mg/dl), sérová hladina takrolimu/cyklosporinu (mg/dl). Pro imunogenicitu bude měřen vývoj protilátek proti lidskému leukocytárnímu antigenu u pacienta.

Sekundární výsledek bude měřen hodnocením skóre klinických symptomů, úrovní kopií CMV a anti-CMV odpovědi. Sekundární nebo průzkumný výsledek bude proveden jako ukazatel účinnosti. Tento výsledek bude hlášen jako skóre klinických příznaků, porovnávající příznaky před a po infuzi. Laboratorní testy budou prováděny po dobu 7 po sobě jdoucích týdnů po infuzi, aby se prokázalo klinické zlepšení pacienta jako míra CMV virové zátěže (kopie/ml), míra anti-CMV odpovědi v periferní krvi pacientů pomocí ELISpot (IFN-y spoty /10x6 buněk). Pacienti mohou být také vyšetřeni pro specifická vyšetření (v případě potřeby) v závislosti na místě infekce, jako je počítačová tomografie, kolonoskopie, vyšetření očního fundu a biopsie. Kromě toho budou provedeny testy ke stanovení buněčné biodistribuce jako chimerismu (%) po infuzi.