Desensibilisering af cøliakipatienter med den menneskelige hageorm (NaCeD)

Eksperimentel: Necator americanus, glutenudfordring

Enkeltarm, lodret.

Biologisk: Necator americanus

Tidligere inokulerede forsøgspersoner vil blive yderligere inokuleret som tidligere udført med 20 3. trins infektiøse Na-larver (10 + 10 over 4 uger). Fire uger efter 2. podning vil hver deltager modtage en mikrodosis gluten (10 mg dagligt) som pasta i 8 uger, efterfulgt af en lav dosis gluten (50 mg dagligt) i 8 uger. Herefter vil der blive foretaget en detaljeret vurdering, der involverer øvre endoskopi og duodenal biopsi, før det på et individuelt grundlag besluttes, at det er sikkert for deltageren at fortsætte med udfordringen. En glutenudfordring på 1 G (15-20 G pasta eller en ½ skive standard hvidt brød) to gange om ugen i 12 uger vil begynde.

Andre navne:

• Hageorm

Biologisk: Necator americanus

Efter afslutning af den tidligere planlagte udfordring vil frivillige blive inviteret til at forlænge glutenudfordringen. Forlængelsen er på i alt 4 uger. Glutenudfordringen er trinvis: gluten 10 mg dagligt i en uge, 50 mg dagligt i en uge og til sidst 3 gram dagligt i 2 uger. Resultatmålet er serumvævstransglutaminase, der skal sammenlignes før og efter interventionen.

Andre navne:

• Hageorm

Duodenal Villus Højde: Krypteringsdybde

Biopsier blev fikseret i neutral bufret formalin, behandlet og omhyggeligt orienteret og indlejret i paraffinvoks. Sektioner (3 µm) blev farvet med H&E. Objektglas fra begge tidspunkter blev afidentificeret, blandet og bedømt af Dr. John Croese, hvorefter resultater fra dårligt orienterede objektglas blev verificeret af Dr. Andrew Clouston. Vh:Cd-forholdene blev målt på 5 tilfældigt udvalgte velorienterede steder. Nulhypotesen er, at hageormsinfektion ikke vil beskytte mod slimhindeskader efter 12 ugers eksponering for gluten ved cøliaki.

Intraepitelial lymfocyttælling

Biopsier blev fikseret i neutral bufret formalin, behandlet og omhyggeligt orienteret og indlejret i paraffinvoks. Sektioner (3 µm) blev farvet med anti-CD3. Alle objektglas blev afidentificeret og bedømt af Dr. John Croese. IEL-procenterne blev målt på 2 eller flere tilfældigt udvalgte velorienterede villi. Nulhypotesen er, at hageormsinfektion ikke vil beskytte mod slimhinde-IEL-tilstrømning efter 12 ugers eksponering for gluten ved cøliaki.

Antal deltagere med 2 point stigning i Marsh Score Post GC-1g

Marsh-scoren er en defineret, men kvalitativ vurdering, der tildeles en værdi for at muliggøre sammenligning. Resultaterne blev evalueret ved konsensus mellem den primære (chef) investigator og undersøgelsens patolog. Marsh-scoren blev bedømt til 0, 1, 2, 3A (tildelt-4), 3B (-5) og 3C (-6); raseri 1-6 med normal=0 og svær betændelse=6. Fordi scoringen er sårbar over for artefakter, blev kun et 2-punkts skift betragtet som en signifikant intra-individuel ændring. Resultaterne blev klassificeret efter uge-36 på biopsier afidentificeret blandet. Et opadgående skift blev fortolket til at afspejle en signifikant forværring af gluten-associeret inflammation. Sammenligningen rapporterede evaluerede ændringer fra baseline (uge-24) til post-lavdosis gluten-challenge (uge-24; GC-1g). Formålet med at bruge Marsh-scoren var at identificere individer, der kunne have oplevet en alvorlig forværring i patologi på grund af GC-1g, som muligvis ikke afspejles i Vh:Cd-gruppeanalysen.

Serum anti-væv transglutaminase antistoffer målt som internationale enheder/ml (IE/ml)

Forsøget blev udvidet med anti-tTG-antistofniveauer før og midt i forsøget, der blev brugt til at sammenligne med niveauerne efter forsøget. Anti-tTG er et serologisk mål for vævstransglutaminase-2-antistoffer. Ved aktiv cøliaki øges niveauet. Ved behandlet sygdom er niveauerne lave (normal cut-off var <15 IE/ml). En signifikant stigning i forhold til baseline i tTG kan forventes 2 uger efter indtagelse af 3 g gluten dagligt i 2 uger hos personer med cøliaki, som har holdt en glutenfri diæt, men som ikke tager anden behandling.