Efecto del CO2 humidificado y calentado en el peritoneo durante la laparotomía

Cuarenta pacientes sometidos a cirugía colorrectal abierta serán reclutados en este ensayo controlado aleatorio.

El grupo de estudio recibirá dióxido de carbono calentado (37°C), humidificado (98% HR). El gas entregado estará definido por la Farmacopea de los Estados Unidos y el Formulario Nacional, que requiere una impureza de menos de 200 partes por millón, incluido el vapor de agua. Este CO2 de grado médico se calentará a 37 °C y se humidificará a 98 % de HR mediante un sistema de humidificación. La esterilidad del sistema se evaluará periódicamente según el protocolo.

El grupo de control no recibirá insuflación de gas en la herida de laparotomía abierta. Esta es la práctica estándar actual para todos los pacientes sometidos a laparotomía abierta para resección colorrectal.

El dispositivo que se utilizará para la insuflación de CO2 estéril, humidificado y calentado es el HUMIGARD de Fisher & Paykel (Fisher & Paykel Healthcare Ltd, Auckland, Nueva Zelanda).

Consiste en un filtro bacteriano y una cámara de humidificación con 180 ml de agua estéril, colocados en un controlador de humidificador que incluye un sensor integrado de temperatura y flujo. La salida de la cámara de humidificación está conectada a un tubo de insuflación calentado de 2,5 m de largo aislado térmicamente que mantiene la temperatura y la humedad del gas a su salida. El CO2 tibio y humidificado ingresa a un difusor de gas (ST300DF VITA-diffuserTM, Cardia Innovation AB, Estocolmo, Suecia) que consta de un tubo de cloruro de polivinilo de 25 cm de largo (diámetro interior de 2,5 mm) con espuma de poliuretano en su extremo. La punta cilíndrica de espuma de poliuretano desvía el chorro de gas en múltiples direcciones a través de los muchos caminos pequeños dentro de la espuma. De este modo, el gas se distribuye uniformemente y la gran superficie del difusor reduce en gran medida la velocidad del flujo de salida. Así, el sistema entrega CO2 humidificado al 100 % de humedad relativa y 37 °C a la herida quirúrgica. El difusor de gas se colocará dentro de la cavidad de la herida abdominal abierta (en el cuadrante craneal derecho) a una profundidad de aproximadamente 4 cm de la piel tan pronto como se haya realizado la retracción de la pared abdominal. La insuflación de CO2 tibio y humidificado comenzará y continuará hasta que se retiren los retractores de la pared abdominal y se comience a cerrar la pared abdominal.

Cálculo de la potencia: los investigadores estimaron el tamaño de la muestra de 40 pacientes para una potencia del 80 % utilizando la desviación estándar informada en la literatura de los niveles de 3-clorotirosina (que es uno de los principales marcadores bioquímicos de inflamación del estudio)

ANÁLISIS DE MARCADORES BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES: Cuando se adquieran, las muestras del tejido humano obtenido (arriba) se homogeneizarán y se asignarán a análisis bioquímicos y moleculares. El ARN total se extraerá con un kit comercial, se convertirá en ADN clonado y luego se analizarán varios genes proinflamatorios. Cuando se observe un cambio en la regulación génica, los investigadores evaluarán el cambio correspondiente en el nivel de proteína utilizando un enfoque combinado que consiste en ELISA multiplex para cuantificar los cambios en los niveles de proteína y una mayor confirmación con Western Blot utilizando los anticuerpos específicos correspondientes.

ANÁLISIS ESTADÍSTICO: El análisis estadístico se realizará utilizando SPSS para Windows versión 18.0 GradPack (IBM, Nueva York, EE. UU.). Las variables continuas no paramétricas se evaluarán mediante pruebas U de Mann-Whitney y las variables continuas paramétricas se evaluarán mediante la prueba t/ANOVA. Las variables categóricas se evaluarán mediante la prueba exacta de Fisher.

RESULTADO Y PUNTO FINAL DEL ESTUDIO:

El estudio incluirá trabajo tanto clínico como de laboratorio, y los resultados son los siguientes.

1. Trabajo de laboratorio:

   De cada paciente se tomarán 4 muestras y por tanto se analizarán 160 muestras.

   De cada muestra, los investigadores analizarán la activación de células proinflamatorias (polimorfos, macrófagos), nivel de ARN mensajero.

   Los investigadores analizarán el nivel de citocinas (pro)inflamatorias: IL1,2,6,9,10 y TNF.

   Los investigadores evaluarán la relación entre el tiempo (duración de la operación) y los marcadores inflamatorios.

   El estudio tendrá como objetivo demostrar que, a medida que aumenta la duración de la operación, aumenta el grado de inflamación de la superficie del intestino, y que este proceso puede mitigarse mediante el uso de gas de dióxido de carbono calentado y humidificado.

2. Trabajo basado en la clínica:

El estudio determinará si el uso de gas de dióxido de carbono calentado y humidificado da como resultado:

• Mejor control de la temperatura corporal central
• Menos dolor postoperatorio
• estancia hospitalaria más corta
• Menos riesgo de complicaciones, incluida la infección de la herida, fugas anastomóticas.