Az emberi epidermális növekedési receptor (HER2) állapotértékelésének vizsgálata emlőrák-patológiai mintákban

Mellrák-patológiai minták

Az emlőrák patológiás mintáit 70 napig értékelték.

Az immunhisztokémiai (IHC) értékelésben résztvevők százalékos aránya az A és mások között (B, C, D és E helyek)

Az IHC egy festési eljárás, amelyet friss/fagyasztott mellrákszöveten hajtanak végre. Az IHC-t annak kimutatására használják, hogy a rákos sejtek felszínén vannak-e humán epidermális növekedési receptor (HER2) és/vagy hormonreceptorok. Az IHC teszt 0-tól 3+-ig terjedő pontszámot ad, amely a HER2 receptor fehérje mennyiségét méri a sejtek felszínén egy mellrákos szövetmintában. 0 pont: immunfestődéstől mentes sejtek, 1 (+): nem teljesen membrános foltok esetén, amelyek nem veszik körül a membránokat, függetlenül a sejtekben lévő mennyiségtől, vagy a teljes membránt körülvevő gyenge foltok esetén kevesebb, mint 10 a sejtek %-a. 2. pont (++): az invazív karcinómasejtek legalább 10%-ában mérsékelt festődés jelenlétében a citoplazma membrán körül, vagy erős membránfestődés esetén az invazív karcinómasejtek kevesebb mint 30%-ában. 3. pontszám (+++): az a következtetés, ahol az IHC erős festődést eredményez a teljes citoplazmatikus membrán körül az invazív karcinómasejtek legalább 30%-ában.

Kappa-koefficiens (K) az A hely és a többi (B, C, D és E helyszín) közötti egyetértés mértéke a mellszövetminták IHC-tesztjével kapcsolatban

A helyek közötti laboratóriumok közötti eltéréseket Kappa teszttel értékeltük, a K értékeket a következőképpen értelmeztük: a) kisebb, mint (<) 0: kisebb, mint az esélyegyezés, b) 0,01-0,20: csekély egyezés, c) 0,21-0,40: tisztességes megállapodás, d) 0,41-0,60: mérsékelt egyetértés, e) 0,61-0,80: lényeges egyetértés, és f) 0,81-0,99: szinte tökéletes egyetértés.

Az IHC-értékelésben résztvevők százalékos aránya a B és mások (C, D és E helyek) között

Az IHC egy festési eljárás, amelyet friss/fagyasztott mellrákszöveten hajtanak végre. Az IHC-t annak kimutatására használják, hogy a rákos sejtek felszínén vannak-e HER2 és/vagy hormonreceptorok. Az IHC teszt 0-tól 3+-ig terjedő pontszámot ad, amely a HER2 receptor fehérje mennyiségét méri a sejtek felszínén egy mellrákos szövetmintában. 0 pont: immunfestődéstől mentes sejtek, 1 (+): nem teljesen membrános foltok esetén, amelyek nem veszik körül a membránokat, függetlenül a sejtekben lévő mennyiségtől, vagy a teljes membránt körülvevő gyenge foltok esetén kevesebb, mint 10 a sejtek %-a. 2. pont (++): az invazív karcinómasejtek legalább 10%-ában mérsékelt festődés jelenlétében a citoplazma membrán körül, vagy erős membránfestődés esetén az invazív karcinómasejtek kevesebb mint 30%-ában. 3. pontszám (+++): az a következtetés, ahol az IHC erős festődést eredményez a teljes citoplazmatikus membrán körül az invazív karcinómasejtek legalább 30%-ában.

Kappa-együttható a B hely és a többi (C, D és E helyszín) közötti megegyezés mértéke a mellszövetminták IHC-tesztjével kapcsolatban

A helyek közötti laboratóriumok közötti eltéréseket Kappa teszttel értékeltük, a K értékeket a következőképpen kell értelmezni: a) <0: kisebb, mint az esélyegyezés, b) 0,01-0,20: csekély egyezés, c) 0,21-0,40: tisztességes megállapodás, d) 0,41-0,60: mérsékelt egyetértés, e) 0,61-0,80: lényeges egyetértés, és f) 0,81-0,99: szinte tökéletes egyetértés.

Az IHC-értékelésben részt vevők százalékos aránya a C és mások között (D és E helyek)

Az IHC egy festési eljárás, amelyet friss/fagyasztott mellrákszöveten hajtanak végre. Az IHC-t annak kimutatására használják, hogy a rákos sejtek felszínén vannak-e HER2 és/vagy hormonreceptorok. Az IHC teszt 0-tól 3+-ig terjedő pontszámot ad, amely a HER2 receptor fehérje mennyiségét méri a sejtek felszínén egy mellrákos szövetmintában. 0 pont: immunfestődéstől mentes sejtek, 1 (+): nem teljesen membrános foltok esetén, amelyek nem veszik körül a membránokat, függetlenül a sejtekben lévő mennyiségtől, vagy a teljes membránt körülvevő gyenge foltok esetén kevesebb, mint 10 a sejtek %-a. 2. pont (++): az invazív karcinómasejtek legalább 10%-ában mérsékelt festődés jelenlétében a citoplazma membrán körül, vagy erős membránfestődés esetén az invazív karcinómasejtek kevesebb mint 30%-ában. 3. pontszám (+++): az a következtetés, ahol az IHC erős festődést eredményez a teljes citoplazmatikus membrán körül az invazív karcinómasejtek legalább 30%-ában.

Kappa-koefficiens a C, D és E helyek közötti egyezés mértéke a mellszöveti minták IHC-tesztjével kapcsolatban

A helyek közötti laboratóriumok közötti eltéréseket Kappa teszttel értékeltük, a K értékeket a következőképpen kell értelmezni: a) <0: kisebb, mint az esélyegyezés, b) 0,01-0,20: csekély egyezés, c) 0,21-0,40: tisztességes megállapodás, d) 0,41-0,60: mérsékelt egyetértés, e) 0,61-0,80: lényeges egyetértés, és f) 0,81-0,99: szinte tökéletes egyetértés.

Az IHC-értékeléssel rendelkező résztvevők százalékos aránya a külföldi és a próbahelyek között (A, B, C, D és E)

Az IHC egy festési eljárás, amelyet friss/fagyasztott mellrákszöveten hajtanak végre. Az IHC-t annak kimutatására használják, hogy a rákos sejtek felszínén vannak-e HER2 és/vagy hormonreceptorok. Az IHC teszt 0-tól 3+-ig terjedő pontszámot ad, amely a HER2 receptor fehérje mennyiségét méri a sejtek felszínén egy mellrákos szövetmintában. 0 pont: immunfestődéstől mentes sejtek, 1 (+): nem teljesen membrános foltok esetén, amelyek nem veszik körül a membránokat, függetlenül a sejtekben lévő mennyiségtől, vagy a teljes membránt körülvevő gyenge foltok esetén kevesebb, mint 10 a sejtek %-a. 2. pont (++): az invazív karcinómasejtek legalább 10%-ában mérsékelt festődés jelenlétében a citoplazma membrán körül, vagy erős membránfestődés esetén az invazív karcinómasejtek kevesebb mint 30%-ában. 3. pontszám (+++): az a következtetés, ahol az IHC erős festődést eredményez a teljes citoplazmatikus membrán körül az invazív karcinómasejtek legalább 30%-ában.

Kappa-együttható a külföldi és a vizsgálati helyszínek (A, B, C, D és E) közötti megegyezés mértéke az emlőszövetminták IHC-tesztjére vonatkozóan

A helyek közötti laboratóriumok közötti eltéréseket Kappa teszttel értékeltük, a K értékeket a következőképpen kell értelmezni: a) <0: kisebb, mint az esélyegyezés, b) 0,01-0,20: csekély egyezés, c) 0,21-0,40: tisztességes megállapodás, d) 0,41-0,60: mérsékelt egyetértés, e) 0,61-0,80: lényeges egyetértés, és f) 0,81-0,99: szinte tökéletes egyetértés.

Az elsődleges daganatot diagnosztizált résztvevők százalékos aránya

Az elsődleges tumordiagnózist invazív ductalis carcinoma, invazív ductalis carcinoma + integrin linked kinase (ILK) antitest és vegyes (invazív ductalis + lobularis) csoportokba sorolták, és jelentették.

A kezdeti tumorcsomó-metasztázisban (TNM) szenvedő résztvevők százalékos aránya a Tanács határozata szerint

A TNM rendszer a primer tumor méretén (T), a nyirokcsomókba való terjedés mértékén (N) és a metasztázisok jelenlétén (M) alapul. T1: tumor ≤20 mm (mm), T2: tumor >20 mm-től ≤50 mm-ig, T3: >50 mm és TX: a daganat nem értékelhető. N0: nincs nyirokcsomó áttét, N1: metasztázis az ipsilateralis I. szintű, II hónalj nyirokcsomókba, N2: N1 metasztázis, amely klinikailag rögzített/matt vagy klinikailag kimutatott azonos oldali belső emlőcsomókban, N3: metasztázisok ipszilaterális infraclavicularis nyirokcsomókban, with/ I., II. szintű hónaljcsomó-érintettség nélkül, vagy klinikailag kimutatott azonos oldali belső emlőnyirokcsomókban és klinikailag evidens I., II. szintű hónaljnyirokcsomó-áttétben; vagy metastasis ipsilateralis supraclavicularis nyirokcsomókban, NX: A regionális nyirokcsomók nem értékelhetők. M0: nincs klinikai/radiográfiás bizonyíték távoli metasztázisra, M1: távoli kimutatható metasztázisok klinikai és radiográfiás módszerekkel meghatározva és/vagy szövettanilag igazolt >0,2 mm, és MX: metasztázisok nem értékelhetők.

A kóros pontszámmal rendelkező résztvevők százalékos aránya

Módosított Bloom-Richardson fokozatú pontozási rendszert alkalmaztunk, amely figyelembe veszi a mirigyes/tubuláris differenciálódás mértékét, a nukleáris jellemzőket és a tumorsejtek mitotikus aktivitását. Tubuláris pontszám (TS) 1: a tumor területének >75%-a (%) tubuláris struktúrákat képez, TS 2: a tumorterület 10-75%-a tubuláris struktúrákat képez, TS 3: a tumorterület <10%-a tubuláris struktúrákat képez. Nukleáris pontszám (NS) 1: a magok kicsik, méretük kis mértékben nőtt a normál emlőhámsejtekhez képest, szabályos körvonalak, egyenletes magkromatin, kis méretváltozás, NS 2: a normálnál nagyobb sejtek nyitott hólyagos magokkal, látható magvakkal és Mérsékelt változatosság mind méretben, mind alakban, NS 3: Hólyagos magok, gyakran kiemelkedő magvakkal, jelentős eltéréseket mutatnak méretben és alakban, esetenként nagyon nagy és bizarr formákkal. Mitózis pontszám (MS) 1: ≤7 mitóz 10 nagy teljesítményű mezőnként, MS 2: 8-14 mitózis 10 nagy teljesítményű mezőnként és MS 3: ≥15 mitózis 10 nagy teljesítményű mezőnként.

A kóros fokozatú résztvevők százalékos aránya

Módosított Bloom-Richardson fokozatú pontozási rendszert alkalmaztunk, amely figyelembe veszi a mirigyes/tubuláris differenciálódás mértékét, a nukleáris jellemzőket és a tumorsejtek mitotikus aktivitását. A tubuláris, nukleáris és mitózisos pontozási mintát a 11. eredmény tárgyalta, és mindegyik pontszámot hozzáadtuk, hogy a végső összpontszám 3-9 között legyen. A 3, 4 vagy 5 pontos daganatokat alacsony malignitásúnak vagy I. fokozatúnak, 6 vagy 7 ponttal közepes malignitásúnak vagy II. fokozatúnak, valamint 8 vagy 9 ponttal magas malignitásúnak vagy III.

A különböző hormonreceptorokkal rendelkező résztvevők százalékos aránya

A hormonreceptorok jelenlétét az ösztrogén és progeszteron hormonok felvételének mennyiségével vizsgáltuk IHC festési eljárással.

A meghatározott sűrűségű hormonreceptorral rendelkező résztvevők százalékos aránya

A hormonreceptorok fajlagos sűrűségét az ösztrogén és progeszteron hormonok felvételének mennyiségével vizsgáltuk IHC festési eljárással. 0 pont: immunfestődéstől mentes sejtek, 1 (+): nem teljesen membrános foltok esetén, amelyek nem veszik körül a membránokat, függetlenül a sejtekben lévő mennyiségtől, vagy a teljes membránt körülvevő gyenge foltok esetén kevesebb, mint 10 a sejtek %-a. 2. pont (++): az invazív karcinómasejtek legalább 10%-ában mérsékelt festődés jelenlétében a citoplazma membrán körül, vagy erős membránfestődés esetén az invazív karcinómasejtek kevesebb mint 30%-ában. 3. pontszám (+++): az a következtetés, ahol az IHC erős festődést eredményez a teljes citoplazmatikus membrán körül az invazív karcinómasejtek legalább 30%-ában.

A HER2 tesztlappal rendelkező résztvevők százalékos aránya az ország alapján

A referenciahelyet külföldnek tekintették, és a vizsgálatokat egy Amszterdamban, Hollandiában található laboratóriumban végezték. Összesen 150 adatnyilvántartási űrlapot gyűjtöttek össze (120 nyomtatvány a próbahelyekről [24 minden helyszínről] és 30 a referenciahelyről).

A különböző automata tárgylemezfestőkön alapuló HER2 tesztűrlappal rendelkező résztvevők százalékos aránya

Különböző tárgylemezfestőket, például Ventana, Ventana Benchmark 4XT, Ventana Benchmark Ultra és Ventana Benchmark XT használtak a HER2-teszt eredményeinek jelentésére az adatregisztrációs űrlapokon (120 űrlap a kísérleti helyszínekről [24 minden helyszínről] és 30 a referenciahelyről).

A HER2 tesztlappal rendelkező résztvevők százalékos aránya az antigén visszakeresés alapján

Szövetminták rögzítése fehérjéket térhálósít és elfedi az antigén helyeket; Az IHC-festés előtt antigén-visszakereső eljárást hajtottak végre, hogy megfordítsák az antigén helyek elfedését. Ebben a vizsgálatban az antigénvisszanyerési folyamatot a következő oldatok felhasználásával végeztük: 1 óra Cell Conditioning 1 (CC1), 30 perc (perc) CC1 enyhe, 64 perc CC1, CC1 Etilén-diamin-tetraecetsav (EDTA) standard és Cell Conditioning 2 (CC2) 30 min.

A HER2-teszttel rendelkező résztvevők százalékos aránya az elsődleges antitest alapján

Az elsődleges antitestek közé tartoznak; Biocabe EP 10454, Cerb B2 (SP3 klón), Her2 Neu (SP3) sejtmárka, neomarkerek (termo) cerb B2-Ab-17 és Thermo SP3.

A különböző IHC-eredményeket elérő résztvevők százalékos aránya

Az IHC teszt 0-tól 3+-ig terjedő pontszámot ad, amely a HER2 receptor fehérje mennyiségét méri a sejtek felszínén egy mellrákos szövetmintában. Ha a pontszám 0 és 1+ között van, azt "HER2 negatívnak" nevezik. Ha a pontszám 2+, akkor ezt "határvonalnak" nevezik. A 3+ pontszámot "HER2 pozitívnak" nevezik. 0 pont: immunfestődéstől mentes sejtek, 1 (+): nem teljesen membrános foltok esetén, amelyek nem veszik körül a membránokat, függetlenül a sejtekben lévő mennyiségtől, vagy a teljes membránt körülvevő gyenge foltok esetén kevesebb, mint 10 a sejtek %-a. 2. pont (++): az invazív karcinómasejtek legalább 10%-ában mérsékelt festődés jelenlétében a citoplazma membrán körül, vagy erős membránfestődés esetén az invazív karcinómasejtek kevesebb mint 30%-ában. 3. pontszám (+++): az a következtetés, ahol az IHC erős festődést eredményez a teljes citoplazmatikus membrán körül az invazív karcinómasejtek legalább 30%-ában.