Prognosi e trattamento delle infezioni dei tessuti molli necrotizzanti: uno studio prospettico di coorte (ProTreat)

Introduzione:

Le infezioni necrotizzanti dei tessuti molli (NSTI) sono tra le infezioni più gravi e mortali conosciute. Sono caratterizzati da un'infiammazione dei tessuti molli in rapida progressione con necrosi e possono causare rapidamente insufficienza multiorgano e morte. È stato dimostrato che la mortalità è del 25-35%, con i sopravvissuti che affrontano amputazioni e riabilitazione prolungata.

Attualmente mancano strumenti adeguati per valutare la gravità e la prognosi delle NSTI nei singoli pazienti. Ciò si traduce in uno sbrigliamento chirurgico necessario, ma a volte troppo zelante, che culmina in una prolungata riabilitazione e invalidità del paziente. L'ossigenoterapia iperbarica (HBOT) può essere aggiunta come terapia aggiuntiva dell'NSTI. Tuttavia, non vi è una chiara comprensione dell'efficacia dell'HBOT su NSTI. I ricercatori cercano di porre rimedio a questi due problemi esaminando più biomarcatori nel corso di diversi studi.

Metodologia:

Ubicazione: Ospedale universitario di Copenaghen, Rigshospitalet, Danimarca.

Design: studio di coorte osservazionale.

Coorte: tutti i pazienti NSTI in Danimarca dal 2013.

Controlli: 50-100 Pazienti sottoposti a chirurgia ortopedica elettiva presso Rigshospitalet.

Biomarcatori: trombomodulina solubile, syndecan-1, sE-selectina, VE-caderina, proteina C, suPAR.

Calcolo delle dimensioni del campione:

1: I kit di test che i ricercatori utilizzeranno per misurare l'outcome primario sTM (kit ELISA Human sCD141, Nordic Biosite) hanno una variazione standard interdosaggio di 0,58 ng/ml. Per essere certi che le variazioni misurate nella concentrazione di sTM non siano il risultato di una deviazione standard interdosaggio, i ricercatori hanno impostato la differenza minima rilevante in sTM a 3 volte la variazione standard interdosaggio, quindi 1,75 ng/ml.

I ricercatori hanno preparato un calcolo della potenza utilizzando un test della somma dei ranghi di Wilcoxon. Supponendo una deviazione standard stimata di 4,6 ng/ml e una media di 9,9 ng/ml, i ricercatori dovranno includere un massimo di 150 pazienti con NSTI e 50 pazienti sottoposti a chirurgia elettiva per raggiungere una potenza statistica di almeno il 60% (a stima molto prudente) e presumibilmente più vicino all'85 % (stima più realistica) a un livello di significatività del 5 %. Le stime dipendono dalla distribuzione dei dati.

2: I kit di test che i ricercatori utilizzeranno per misurare l'esito primario sE-selectina (kit ELISA CD62E umano, Diaclone) hanno una variazione standard interdosaggio di 0,37 ng/ml. Per essere certi che i cambiamenti misurati nella concentrazione di sE-selectina non siano il risultato della variazione standard interdosaggio, i ricercatori hanno impostato la differenza minima rilevante nella sE-selectina a 3 volte la variazione standard interdosaggio, quindi 1,1 ng/ml.

Supponendo una deviazione standard stimata di 209 ng/ml (shock settico) rispetto a 23 ng/ml (sepsi grave e sepsi) e una media di 295 rispetto a 181 ng/ml, rispettivamente, i ricercatori dovranno includere almeno 132 pazienti NSTI e 50 pazienti sottoposti a chirurgia elettiva per raggiungere una potenza statistica del 90% con un livello di significatività del 5%.

3: i livelli di suPAR durante NSTI non sono mai stati esaminati in precedenza. Al fine di stimare la dimensione del campione e poiché anche i pazienti con NSTI sono settici, i ricercatori stanno basando il calcolo della dimensione del campione su uno studio precedente riguardante la correlazione tra suPAR e sepsi. Questo studio ha trovato una correlazione statisticamente significativa tra i livelli di suPAR e la mortalità in 141 pazienti. Questo è anche l'obiettivo di questo studio. Ulteriori studi hanno anche trovato correlazioni significative tra suPAR, sepsi e mortalità in 132 pazienti. Gli investigatori includeranno almeno 150 pazienti NSTI durante questo studio.

Considerazioni statistiche:

Per verificare se il trattamento HBOT ha un effetto sulla gamma di biomarcatori, i ricercatori analizzeranno le medie e le varianze dei biomarcatori nel gruppo NSTI e nei due gruppi di controllo, i pazienti ortopedici e i pazienti con sepsi. I dati non parametrici saranno trasformati in log e presentati come valori mediani con IQR. I test di somma dei ranghi di Wilcoxon saranno utilizzati per i confronti di gruppo. Per i dati categorici verrà utilizzato il test esatto di Fisher. L'analisi di correlazione verrà eseguita utilizzando la correlazione di rango di Spearman o la correlazione di Pearson. Per valutare la qualità del suPAR come predittore degli esiti di salute, sarà condotto un esercizio di selezione del modello con vari tipi di modelli di regressione. Il tipo di regressione varierà con il tipo di esito di salute, con suPAR come predittore in tutti i casi. L'analisi della curva delle caratteristiche operative del ricevitore (ROC) verrà applicata per determinare l'accuratezza dei suPAR come marker di gravità e mortalità nei pazienti con NSTI. Gli investigatori costruiranno curve di Kaplan-Meier per i dati di sopravvivenza. I risultati statisticamente significativi sono quando p<0,05.

Dati:

I dati saranno trattati secondo l'Agenzia nazionale per la protezione dei dati. Tutti i documenti originali (inclusi moduli di consenso e questionari) saranno archiviati presso il sito di sperimentazione per 15 anni. L'Agenzia nazionale per la protezione dei dati ha approvato la biobanca (RH-2016-199). I controlli dei dati sono stati programmati nel registro dei dati per avvisare quando le variabili di input sono al di fuori del possibile intervallo clinico predefinito. Tutti i dati del registro saranno confrontati con fonti di dati esterne, ad esempio cartelle cliniche, per garantire l'accuratezza. Sono state implementate procedure operative standard per quanto riguarda la raccolta dei dati. I pazienti con dati mancanti per il calcolo, ad esempio, dei punteggi SAPS II ecc. saranno esclusi dallo studio.

Etica:

Il processo aderirà alla Dichiarazione di Helsinki e alla legge danese. Il Comitato Etico Nazionale e il Comitato Etico Regionale (H-16021845) hanno approvato questo studio.

Le analisi dei biomarcatori, l'estrazione e l'interpretazione dei dati verranno eseguite una volta terminato il reclutamento dei partecipanti.