L'effetto del singolo probiotico sul controllo metabolico nel diabete di tipo 2

I dati basati sull'evidenza hanno dimostrato che il microbiota intestinale (IM) svolge un ruolo nello sviluppo delle malattie metaboliche. Studi recenti hanno riportato che la disbiosi dell'IM e l'infiammazione di basso grado sono efficaci nella patogenesi del diabete mellito di tipo 2 (T2DM), che è aumentato in dimensioni epidemiche negli ultimi 20 anni. I rapporti di Firmicutes, Bacteroidetes e Proteobacteria nei pazienti obesi e con T2DM sono risultati diversi rispetto ai soggetti sani. In questi casi, esiste un'associazione tra l'aumento della percentuale di batteri gram-negativi nell'intestino e l'infiammazione subclinica.

I probiotici sono microrganismi vivi destinati ad avere benefici per la salute regolando l'immunità della mucosa e sistemica, se consumati come integratore alimentare. Esistono studi che indagano gli effetti dell'uso di probiotici sulla sensibilità all'insulina, sul controllo glicemico, sul profilo lipidico e sui parametri infiammatori nei pazienti con T2DM. Tuttavia, in questi studi sono stati utilizzati frequentemente diversi ceppi probiotici, oppure probiotici e prebiotici sono stati somministrati come cocktail. I loro effetti potrebbero essere insieme o addirittura sinergici. Lactobacillus rhamnosus GG (o Lactobacillus GG: LGG) è un microrganismo probiotico ampiamente utilizzato. Gli studi hanno dimostrato che il LGG previene la diarrea e la dermatite atopica, fornisce attività antitumorale, migliora il sistema immunitario e abbassa i livelli sierici di colesterolo. Tuttavia, ci sono dati limitati sugli effetti del LGG sul controllo glicemico dei modelli animali diabetici, ma gli studi sull'uomo sono scarsi.

Pertanto, il presente studio è progettato per determinare gli effetti di LGG sul controllo glicemico, sul profilo lipidico, sui parametri di infiammazione e sull'espressione di alcuni geni legati al T2DM.

I soggetti verranno assegnati in modo casuale a ricevere il probiotico "Lactobacillus Rhamnosus GG (ATCC 53103)" o placebo per 8 settimane somministrato come formulazione in gocce. I pazienti nel gruppo di intervento ricevono 10 gocce di probiotici (1x1010 cfu LGG) una volta al giorno con la colazione. I soggetti saranno contattati telefonicamente ogni settimana per una valutazione degli eventi avversi e della compliance probiotica/placebo. Verranno prelevati campioni di sangue a digiuno al basale e dopo il trattamento per misurare il metabolismo dei carboidrati (glucosio, insulina, fruttosamina e HbA1c), il profilo lipidico (trigliceridi; colesterolo totale, HDL e LDL) e i biomarcatori dell'infiammazione (hs-CRP e IL- 6). L'espressione dei geni TLR2, TLR4, MUC2 e MUC3A sarà studiata su campioni di feci al basale e dopo il trattamento. I campioni di feci saranno conservati a -80°C fino all'isolamento dell'RNA. I livelli di espressione genica saranno determinati mediante PCR quantitativa in tempo reale utilizzando i campioni di cDNA determinati. L'assunzione dietetica sarà valutata dal registro alimentare di 3 giorni. Durante la 4a e l'8a settimana dello studio, verrà effettuata una registrazione del consumo alimentare di 3 giorni. Ai diabetici verranno fornite istruzioni orali e scritte dettagliate in merito al completamento del registro alimentare, composto da 2 giorni infrasettimanali e 1 giorno del fine settimana. Per determinare correttamente le quantità di alimenti consumati, verranno fornite informazioni su misurini come bicchiere per acqua, bicchiere per tè, cucchiaino, cucchiaio, cucchiaio da portata, ciotola. L'assunzione dietetica sarà valutata utilizzando un database sulla composizione degli alimenti del programma BEBIS che include specifici alimenti turchi. Tutte le misurazioni antropometriche saranno condotte a digiuno al basale e dopo un intervento di 8 settimane da parte di un esaminatore esperto (dietista). Il peso corporeo e la composizione corporea saranno valutati mediante dispositivo di analisi dell'impedenza bioelettrica (Tanita BC-420 MA). L'indice di massa corporea (BMI) sarà calcolato come peso (kg) diviso altezza al quadrato (m2). La circonferenza della vita (misurata a metà strada tra la costola più bassa e la cresta iliaca) verrà misurata utilizzando un nastro di misurazione non estensibile.

Tutte le analisi saranno eseguite utilizzando il programma del pacchetto Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 21.0 e la significatività sarà definita come p<0.05. Le statistiche descrittive saranno fornite come media, deviazione standard e mediana (dal minimo al massimo) per misure continue. Le variabili categoriali saranno espresse come numeri di casi e valori percentuali. I test di Shapiro-Wilk verranno utilizzati per determinare se la distribuzione delle misure continue è normale. Il test t di Student e il test U di Mann-Whitney saranno utilizzati per i confronti tra i due gruppi a seconda che le variabili abbiano mostrato una distribuzione normale. I confronti dei cambiamenti nei gruppi al loro interno (prima e dopo la somministrazione di probiotici o placebo) verranno effettuati utilizzando il test t se le varianze sono normali e se il test di Wilcoxon non è normale nella coorte. Il programma web-based RT2 Profiler PCR Array Data Analysis verrà utilizzato per determinare la variazione dei valori ΔCt ottenuti dallo studio di espressione genica Real Time-PCR (prima e dopo la somministrazione di probiotici e placebo). p<0.05 sarà considerato statisticamente significativo.