Vliv jediného probiotika na metabolickou kontrolu u diabetu 2. typu

Data založená na důkazech ukázala, že střevní mikrobiota (IM) hraje roli ve vývoji metabolických onemocnění. Nedávné studie uvádějí, že dysbióza IM a zánět nízkého stupně jsou účinné v patogenezi diabetes mellitus 2. typu (T2DM), jehož velikost epidemie za posledních 20 let narostla. Bylo zjištěno, že poměry Firmicutes, Bacteroidetes a Proteobacteria u obézních pacientů a pacientů s T2DM jsou jiné než u zdravých subjektů. V těchto případech existuje souvislost mezi zvýšením podílu gramnegativních bakterií ve střevech a subklinickým zánětem.

Probiotika jsou živé mikroorganismy, které mají mít přínos pro zdraví regulací slizniční a systémové imunity, jsou-li konzumovány jako doplněk výživy. Existují studie zkoumající vliv užívání probiotik na inzulínovou senzitivitu, glykemickou kontrolu, lipidový profil a zánětlivé parametry u pacientů s T2DM. V těchto studiích však bylo často používáno několik probiotických kmenů nebo byla probiotika a prebiotika podávána jako koktejly. Jejich účinky mohou být společné nebo dokonce synergické. Lactobacillus rhamnosus GG (nebo Lactobacillus GG: LGG) je široce používaný probiotický mikroorganismus. Studie ukázaly, že LGG zabraňuje průjmu a atopické dermatitidě, poskytuje protinádorovou aktivitu, zlepšuje imunitní systém a snižuje hladinu cholesterolu v séru. Existují však omezené údaje o účincích LGG na glykemickou kontrolu u diabetických zvířecích modelů, ale studie na lidech jsou vzácné.

Proto je tato studie navržena tak, aby určila účinky LGG na glykemickou kontrolu, lipidový profil, parametry zánětu a expresi určitých genů spojených s T2DM.

Subjekty budou náhodně rozděleny tak, aby dostávaly probiotikum "Lactobacillus Rhamnosus GG (ATCC 53103)" nebo placebo po dobu 8 týdnů podávané jako formulace po kapkách. Pacienti v intervenční skupině dostávají 10 probiotických kapek (1x1010 cfu LGG) jednou denně se snídaní. Subjekty budou každý týden telefonicky kontaktovány za účelem posouzení nežádoucích účinků a dodržování probiotik/placeba. Na začátku a po léčbě budou odebrány vzorky krve nalačno pro měření metabolismu sacharidů (glukóza, inzulín, fruktosamin a HbA1c), lipidového profilu (triglyceridy; celkový, HDL- a LDL-cholesterol) a biomarkerů zánětu (hs-CRP a IL- 6). Exprese genů TLR2, TLR4, MUC2 a MUC3A budou zkoumány na vzorcích stolice na začátku a po léčbě. Vzorky stolice budou skladovány při -80°C až do izolace RNA. Hladiny genové exprese budou stanoveny metodou kvantitativní PCR v reálném čase za použití určených vzorků cDNA. Dietní příjem bude hodnocen 3denním záznamem o jídle. Během 4. a 8. týdne studie budou pořízeny 3denní záznamy o spotřebě potravy. Diabetici dostanou podrobné ústní a písemné pokyny týkající se vyplnění záznamu o jídle, který se skládá ze 2 dnů uprostřed týdne a 1 víkendového dne. Pro správné určení množství zkonzumovaných potravin budou uvedeny informace o odměrkách jako je sklenice na vodu, sklenice na čaj, lžička, polévková lžíce, servírovací lžička, miska. Dietní příjem bude hodnocen pomocí databáze složení potravin programu BEBIS včetně konkrétních tureckých potravin. Všechna antropometrická měření budou prováděna nalačno na začátku a po 8týdenní intervenci zkušeným vyšetřujícím (dietologem). Tělesná hmotnost a složení těla budou hodnoceny přístrojem pro analýzu bioelektrické impedance (Tanita BC-420 MA). Index tělesné hmotnosti (BMI) se vypočítá jako hmotnost (kg) dělená na druhou mocninu výšky (m2). Obvod pasu (měřeno uprostřed mezi nejnižším žebrem a hřebenem kyčelního kloubu) bude měřen pomocí nepružné měřicí pásky.

Všechny analýzy budou provedeny pomocí programu balíčku Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 21.0 a významnost bude definována jako p<0,05. Popisné statistiky budou uvedeny jako průměr, směrodatná odchylka a medián (minimum až maximum) pro kontinuální měření. Kategorické proměnné budou vyjádřeny jako čísla případů a procentuální hodnoty. Shapiro-Wilkovy testy se použijí ke zjištění, zda je rozložení kontinuálních měření normální. Studentův t test a Mann-Whitney-U test budou použity pro srovnání dvou skupin podle toho, zda proměnné vykazovaly normální rozdělení. Srovnání změn ve skupinách uvnitř nich samotných (před a po podání probiotik nebo placeba) bude provedeno pomocí t-testu, pokud jsou rozptyly normální a pokud Wilcoxonův test není v kohortě normální. Webový program RT2 Profiler PCR Array Data Analysis bude použit ke stanovení změny hodnot ΔCt získaných ze studie genové exprese Real Time-PCR (před a po podání probiotik a placeba). p<0,05 bude považováno za statisticky významné.