Wpływ pojedynczego probiotyku na kontrolę metabolizmu w cukrzycy typu 2

Dane oparte na dowodach wykazały, że mikroflora jelitowa odgrywa rolę w rozwoju chorób metabolicznych. Ostatnie badania dowiodły, że dysbioza IM i stanu zapalnego o niskim stopniu złośliwości jest skuteczna w patogenezie cukrzycy typu 2 (T2DM), której rozmiary epidemii wzrosły w ciągu ostatnich 20 lat. Stwierdzono, że proporcje Firmicutes, Bacteroidetes i Proteobacteria u pacjentów otyłych i pacjentów z T2DM są inne niż u osób zdrowych. W takich przypadkach istnieje związek między zwiększeniem odsetka bakterii Gram-ujemnych w jelitach a subklinicznym stanem zapalnym.

Probiotyki to żywe mikroorganizmy, które mają przynosić korzyści zdrowotne poprzez regulację odporności śluzówkowej i ogólnoustrojowej, gdy są spożywane jako suplement diety. Istnieją badania oceniające wpływ stosowania probiotyków na wrażliwość na insulinę, kontrolę glikemii, profil lipidowy i parametry stanu zapalnego u pacjentów z T2DM. Jednak w badaniach tych często stosowano kilka szczepów probiotycznych lub probiotyki i prebiotyki podawano w postaci koktajli. Ich efekty mogą być ze sobą połączone lub nawet synergiczne. Lactobacillus rhamnosus GG (lub Lactobacillus GG: LGG) jest szeroko stosowanym mikroorganizmem probiotycznym. Badania wykazały, że LGG zapobiega biegunkom i atopowemu zapaleniu skóry, działa przeciwnowotworowo, poprawia układ odpornościowy i obniża poziom cholesterolu w surowicy. Istnieją jednak ograniczone dane dotyczące wpływu LGG na kontrolę glikemii w modelach zwierzęcych z cukrzycą, ale badań na ludziach jest niewiele.

Dlatego niniejsze badanie ma na celu określenie wpływu LGG na kontrolę glikemii, profil lipidowy, parametry stanu zapalnego i ekspresję niektórych genów związanych z T2DM.

Pacjenci zostaną losowo przydzieleni do otrzymywania probiotyku „Lactobacillus Rhamnosus GG (ATCC 53103)” lub placebo przez 8 tygodni, podawanych w postaci kropli. Pacjenci z grupy interwencyjnej otrzymują 10 kropli probiotycznych (1x1010 jtk LGG) raz dziennie ze śniadaniem. Pacjenci będą kontaktować się telefonicznie co tydzień w celu oceny zdarzeń niepożądanych i zgodności probiotyków/placebo. Próbki krwi na czczo będą pobierane na początku leczenia i po leczeniu w celu pomiaru metabolizmu węglowodanów (glukozy, insuliny, fruktozaminy i HbA1c), profilu lipidowego (trójglicerydy; cholesterol całkowity, HDL i LDL) oraz biomarkerów stanu zapalnego (hs-CRP i IL- 6). Ekspresje genów TLR2, TLR4, MUC2 i MUC3A będą badane na próbkach kału na początku leczenia i po leczeniu. Próbki kału będą przechowywane w temperaturze -80°C do czasu izolacji RNA. Poziomy ekspresji genów zostaną określone metodą ilościowego PCR w czasie rzeczywistym przy użyciu określonych próbek cDNA. Spożycie w diecie zostanie ocenione na podstawie 3-dniowego zapisu żywności. W 4. i 8. tygodniu badania sporządzony zostanie 3-dniowy zapis spożycia pokarmu. Diabetycy otrzymają szczegółowe ustne i pisemne instrukcje dotyczące wypełniania rejestru żywności, składającego się z 2 dni w środku tygodnia i 1 dnia weekendu. W celu prawidłowego określenia ilości spożywanych pokarmów podane zostaną informacje o miarkach typu szklanka do wody, szklanka do herbaty, łyżeczka, łyżka stołowa, łyżka do serwowania, miska. Spożycie w diecie zostanie ocenione przy użyciu bazy danych składu żywności programu BEBIS, w tym określonych tureckich potraw. Wszystkie pomiary antropometryczne zostaną przeprowadzone na czczo w punkcie wyjściowym i po 8-tygodniowej interwencji doświadczonego egzaminatora (dietetyka). Masa ciała i skład ciała zostaną ocenione za pomocą urządzenia do analizy impedancji bioelektrycznej (Tanita BC-420 MA). Wskaźnik masy ciała (BMI) zostanie obliczony jako waga (kg) podzielona przez wzrost do kwadratu (m2). Obwód w pasie (mierzony w połowie odległości między dolnym żebrem a grzebieniem biodrowym) będzie mierzony nierozciągliwą taśmą mierniczą.

Wszystkie analizy zostaną przeprowadzone przy użyciu pakietu Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 21.0, a istotność zostanie zdefiniowana jako p<0,05. Statystyki opisowe zostaną podane jako średnia, odchylenie standardowe i mediana (minimum do maksimum) dla pomiarów ciągłych. Zmienne kategoryczne zostaną wyrażone jako liczby przypadków i wartości procentowe. Testy Shapiro-Wilka zostaną wykorzystane do określenia, czy rozkład miar ciągłych jest normalny. Test t Studenta i test Manna-Whitneya-U zostaną użyte do porównań dwóch grup w zależności od tego, czy zmienne wykazywały rozkład normalny. Porównań zmian w grupach w obrębie siebie (przed i po podaniu probiotyku lub placebo) dokona się za pomocą testu t, jeśli wariancje są normalne, a jeśli test Wilcoxona nie jest normalny w kohorcie. Internetowy program RT2 Profiler PCR Array Data Analysis zostanie wykorzystany do określenia zmiany wartości ΔCt uzyskanych z badania ekspresji genów metodą Real Time-PCR (przed i po podaniu probiotyku i placebo). p<0,05 będzie uważane za statystycznie istotne.