Studio sull'HIV e sulle infezioni parassitarie (HAPI). (HAPI)

Questo è uno studio prospettico in cui i partecipanti saranno arruolati in cliniche ambulatoriali per l'HIV associate al Kamuzu Central Hospital di Lilongwe, in Malawi, dove ci sono oltre 25.000 pazienti in cura con oltre il 90% di soppressione virale in ART.

Tutti i soggetti che soddisfano i criteri di inclusione e mancano di criteri di esclusione che attualmente ricevono cure presso le cliniche affiliate al Kamuzu Central Hospital o al Bwaila Hospital potranno partecipare a questo studio. Dopo la firma del consenso informato, verranno raccolti un totale di 10 ml di sangue, 20 g di campione di feci e 20 ml di campione di urina. Ad ogni partecipante verranno poste una serie di domande. Le variabili cliniche tra cui età, sesso, conta delle cellule T CD4+ e CD4% saranno raccolte dalla cartella clinica del partecipante.

I campioni di feci verranno elaborati mediante microscopia delle feci nel laboratorio locale UNC Project Malawi e il campione rimanente verrà conservato a -80 gradi Celsius (C) fino al trasporto al Laboratorio di parassitologia Scuola nazionale di medicina tropicale Baylor College of Medicine a Houston, Texas per il rilevamento di 9 diversi parassiti e la quantificazione del carico parassitario mediante qPCR fecale. I campioni di sangue saranno raccolti in provette per il prelievo di sangue EDTA e centrifugati. Il plasma sarà congelato a -80 gradi C presso l'UNC Project Malawi fino al trasporto alla National School of Tropical Medicine Baylor College of Medicine per la determinazione dei livelli di attivazione immunitaria e compromissione della mucosa intestinale (sCD14, sCD163 e I-FABP) e Strongyloides stercoralis IgG. I campioni di urina saranno valutati al microscopio per cercare Schistosoma haematobium presso il laboratorio UNC Project Malawi.

La PCR quantitativa multi-parallela in tempo reale (qPCR) eseguita sulle feci valuterà 9 diversi parassiti tra cui Ascaris lumbricoides, Ancylostoma duodenale, Necator americanus, Schistosoma mansonii, Strongyloides stercoralis, Taenia solium, Trichuris trichiura, Entamoeba histolytica e Giardia lamblia.

I partecipanti che risultano positivi al test per l'infezione parassitaria verranno contattati e verrà somministrato un trattamento appropriato secondo lo standard di cura locale. Verrà somministrata una singola dose di albendazolo da 400 mg per l'infezione da Ascaris lumbricoides, Ancylostoma duodenale, Necator americanus, Trichuris trichiura. Verrà somministrato albendazolo 400 mg al giorno per 5 giorni per Strongyloides stercoralis. Verrà somministrata una singola dose di praziquantel 40 mg/kg per l'infezione da Schistosoma mansoni e Schistosoma haematobium. Verrà somministrata una singola dose di praziquantel 10 mg/kg per trattare l'infezione intestinale da Taenia solium. Metronidazolo 500 mg due volte al giorno x 5 giorni per Giardia lamblia e 500 mg tre volte al giorno x 7 giorni per Entamoeba histolytica.

Gli appuntamenti di follow-up verranno eseguiti 8-12 settimane dopo il trattamento e includeranno la raccolta ripetuta di campioni di sangue e feci.

Il team dello studio prevede l'arruolamento di 100 pazienti in un periodo di 8-12 settimane. Con una prevalenza stimata del parassita intestinale del 30%, il team di studio prevede che verranno arruolati 30 casi e 70 controlli. I partecipanti trovati positivi sia alla visita iniziale che a quella di follow-up saranno considerati reinfettati piuttosto che fallimento del trattamento. Questi saranno inclusi nell'analisi della prevalenza, ma il cambiamento nei marcatori di attivazione immunitaria non sarà misurato in questo gruppo poiché la clearance del parassita non è stata stabilita. Utilizzando il test t non appaiato di Student per confrontare i valori medi dei biomarcatori tra i gruppi di studio, ci sarà una potenza dell'80% per rilevare una differenza di 0,434 x 106 pg/ml, 0,56 mg/l e 598 pg/ml tra i gruppi per i biomarcatori sCD14, sCD163 e I-FABP, rispettivamente con dimensioni dell'effetto all'interno dell'intervallo di studi precedenti. Utilizzando t-test accoppiati per confrontare i livelli di biomarcatori pre e post trattamento, ci sarà una potenza dell'80% per rilevare variazioni post trattamento di 0,317 x106/ml, 0,41 mg/l e 435 pg/ml in sCD14, CD163 e I-FABP rispettivamente.

Verranno registrate variabili cliniche tra cui età, sesso e conta CD4 più recente. I predittori clinici di infezione parassitaria (es. CD4%) saranno determinati mediante regressione logistica multivariata. Verrà utilizzata la regressione lineare univariata per determinare le associazioni tra marcatori di attivazione immunitaria (variabile di esito continua) e predittori comprese le variabili cliniche di cui sopra, nonché la presenza di più infezioni parassitarie.