L'efficacia dei probiotici per il trattamento del disturbo da uso di alcol tra i maschi adulti

Lo studio sarà condotto nel secondo ospedale affiliato della Xinxiang Medical University (Henan Mental Hospital), Xinxiang, Henan, Cina e nella clinica psichiatrica ambulatoriale presso l'Istituto medico e dentale avanzato, Universiti Sains Malaysia.

L'approvazione dello studio è stata ottenuta dallo Human Research Ethics Committee della Xinxiang Medical University (codice: XYEFYLL-(research)-2022-28) e dallo Human Research Ethics Committee dell'Universiti Sains Malaysia (codice: USM/JEPeM/22080546) . Prima della partecipazione allo studio, i partecipanti saranno informati del loro diritto di ritirarsi dallo studio in qualsiasi momento e i dati raccolti verranno immediatamente eliminati e non saranno utilizzati per lo studio. Ai partecipanti verrà ricordato che tutte le informazioni di identificazione personale non verranno utilizzate e che verranno analizzati e pubblicati solo i dati del gruppo. Saranno assicurati del loro anonimato per aver partecipato al processo. I partecipanti avranno la certezza che i dati raccolti saranno utilizzati solo per scopi di ricerca e che i risultati non saranno registrati nei loro fascicoli. A tutti i partecipanti verrà assegnato un numero di ricerca a fini identificativi, ad esempio "PROB 001". Tutti i dati raccolti dai partecipanti saranno archiviati nel fascicolo di ricerca che sarà chiuso a chiave in un archivio, la cui chiave sarà conservata dal ricercatore principale. I dati raccolti possono anche essere archiviati in pen drive e laptop, accessibili solo al team di ricerca e al ricercatore principale.

Al fine di monitorare gli effetti avversi (AE) durante lo studio, a tutti i partecipanti verrà consegnata una scheda di prova che contiene il nome, il numero di contatto e l'e-mail dei membri del gruppo di ricerca. Sono incoraggiati a contattare il membro del team di ricerca responsabile in caso di occorrenza di AE. L'occorrenza dell'AE verrà quindi segnalata nella sezione "effetti avversi" del modulo di segnalazione del caso clinico. Gli eventi avversi che possono portare al ritiro dei partecipanti dallo studio sono: (1) reazione avversa non correlata all'intervento dello studio ma che causa disagio ai partecipanti, (2) reazione avversa correlata all'intervento dello studio (probiotici, ACT e/o placebo) e (3) eventuali cambiamenti nel comportamento, nel temperamento, nella personalità, nei sintomi psicotici e nella tendenza al suicidio verificatisi dopo l'inizio dell'intervento dello studio (probiotico, ACT e/o placebo). Tutti gli eventi avversi devono essere segnalati al Comitato etico della ricerca umana della Xinxiang Medical University e dell'Universiti Sains Malaysia e devono essere condotte indagini.

Il ricercatore principale guiderà il centro di sperimentazione e si coordinerà a stretto contatto con la ricerca e i coordinatori del sito su base quotidiana, coinvolgendo la conduzione della sperimentazione clinica, il reclutamento dei soggetti e la raccolta dei dati. Verrà inoltre istituita un'unità di monitoraggio della sperimentazione, presieduta dal ricercatore principale, durante la quale si terrà una riunione settimanale per discutere sulla conduzione della sperimentazione, l'auditing della sperimentazione e preparare la relazione da presentare al Comitato etico umano di Xinxiang Medical University e Universiti Sains Malesia. Il monitoraggio dei dati della sperimentazione e la verifica della sperimentazione saranno gestiti dall'unità di coordinamento della sperimentazione clinica del 2° ospedale affiliato della Xinxiang Medical University e dell'Advanced Medical and Dental Institute, Universiti Sains Malaysia, che sono indipendenti dal finanziatore. L'analisi intermedia sarà effettuata se vi è tale necessità di terminare anticipatamente lo studio sulla base della valutazione e dell'auditing dei dati dello studio.

Obiettivo primario:

Per determinare le differenze nella gravità della dipendenza da alcol, astinenza da alcol e craving tra i pazienti trattati con Lactobacillus sp., placebo e ACT, a 4 linee temporali (basale, 8 settimane dopo l'inizio dell'intervento, 12 settimane dopo l'inizio dell'intervento e 24 settimane dopo l'inizio dell'intervento ovvero 12 settimane dopo la cessazione dell'intervento).

Obiettivi secondari:

1. Per determinare le differenze nella gravità dei sintomi di depressione e ansia, cambiamenti delle caratteristiche EEG e livelli sierici di citochine pro-infiammatorie tra i pazienti trattati con Lactobacillus sp., placebo e ACT, a 4 linee temporali (basale, 8 settimane dopo l'inizio dell'intervento, 12 settimane dopo l'inizio dell'intervento e 24 settimane dopo l'inizio dell'intervento, ovvero 12 settimane dopo la fine dell'intervento).
2. Per valutare le differenze nei profili del microbiota intestinale dei pazienti trattati con Lactobacillus sp., placebo e ACT tramite l'uso di campioni fecali, a 3 linee temporali (basale, 2 settimane dopo l'inizio dell'intervento e 8 settimane dopo l'inizio dell'intervento).

In questo studio, i partecipanti saranno reclutati dalla popolazione di origine. La popolazione di origine è costituita da tutti i pazienti che si sono registrati presso il 2nd Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University (XXMU), China and Outpatient Psychiatry Clinic of Advanced Medical and Dental Institute, Universiti Sains Malaysia con malattie mentali correlate all'alcol. La pubblicità con poster sarà esposta nel 2° ospedale affiliato della XXMU, ​​nel dipartimento di psichiatria, XXMU e nell'istituto medico e dentistico avanzato, Universiti Sains Malaysia per aiutare nel reclutamento dei soggetti. In questo studio, i pazienti con dipendenza da alcol che soddisfacevano i criteri diagnostici di "disturbo da uso di alcol" nel DSM-5 sono stati selezionati come gruppo sperimentale. Le persone sane che soddisfacevano gli standard di consumo salutare dell'OMS o che non bevevano sono state utilizzate come gruppo di controllo sano. Quindi, inizierà la valutazione di base (t0) seguita dall'ammissione dei soggetti del gruppo sperimentale per le prime 2 settimane per la disintossicazione (trattamento di routine). La valutazione per i soggetti del gruppo sperimentale include il Clinical Institute Withdrawal Assessment for Alcohol-Revised (CIWA-Ar), Penn Alcohol Craving Scale (PACS), Alcohol Use Disorder Identification Test (AUDIT), Hamilton Depression Rating Scale (HAMD) e Hamilton Anxiety Rating Punteggi della scala (HAMA), analisi ERP, livelli sierici di citochine pro-infiammatorie e analisi del microbiota fecale. Mentre la valutazione per i controlli sani include l'analisi ERP, i livelli sierici di citochine pro-infiammatorie e l'analisi del microbiota fecale. Durante la disintossicazione, il trattamento dei sintomi di astinenza principalmente con la terapia sostitutiva delle benzodiazepine, mentre un'adeguata integrazione di vitamine del gruppo B, rafforzamento del trattamento sintomatico di supporto e corrispondenti farmaci antipsicotici, antidepressivi o stabilizzatori emotivi sono stati somministrati a seconda della condizione. Le benzodiazepine vengono sospese gradualmente dopo che i sintomi di astinenza si sono risolti. Quindi, i soggetti nel gruppo sperimentale saranno randomizzati in tre gruppi, come probiotici + gruppo di trattamento di routine, placebo + gruppo di trattamento di routine e terapia di accettazione e impegno (ACT) + gruppo di trattamento di routine. Interventi specifici saranno somministrati nei rispettivi gruppi.

La dimensione del campione stimata necessaria per confrontare il microbiota fecale, le citochine sieriche e l'EEG e gli indicatori fisiologici tra soggetti con disturbo da uso di alcol e controlli sani è stata calcolata utilizzando il calcolatore G*Power 3.1.9.7 per calcolare le differenze medie tra due gruppi indipendenti, per cui errore di tipo I = 0,05, potenza = 0,8, rapporto di allocazione = 1:1 e dimensione dell'effetto = 0,4 [De Giani et al. (2020)]. La dimensione stimata del campione necessaria era di 120 soggetti per gruppo (incluso il 20% di abbandono). La dimensione stimata del campione necessaria per il soggetto sperimentale è stata calcolata utilizzando il calcolatore G*Power 3.1.9.7 per calcolare la dimensione del campione per l'ANOVA a misura ripetuta, all'interno dell'interazione, in cui errore di tipo I = 0,05, potenza = 0,8, numero di gruppi = 3 , numero di misurazioni = 3, dimensione dell'effetto = 0,15 [Kazemi et al. (2019)]. La dimensione stimata del campione necessaria era di 120 soggetti, 40 soggetti per gruppo (compreso il 30% di abbandono).

È stato scelto un disegno di studio controllato randomizzato in singolo cieco. I pazienti affetti da AD idonei saranno randomizzati in rapporto 1:1:1 rispetto ai tre bracci dello studio in base a un elenco di randomizzazione bloccato generato dal computer. I pazienti idonei verranno assegnati al gruppo probiotici, al gruppo ACT e al gruppo di controllo con un codice di trattamento nascosto in una busta chiusa. La randomizzazione sarà eseguita dallo statistico dello studio, che non ha avuto contatti con i pazienti e non è coinvolto nel progetto di ricerca. Lo statistico è addestrato a randomizzare i soggetti che per primi si iscrivono allo studio nei tre gruppi utilizzando il sistema informatico a scopo di randomizzazione. La sequenza di assegnazione non sarà disponibile per nessun membro del gruppo di ricerca finché i database non saranno stati completati e bloccati. La raccolta dei dati sarà eseguita da assistenti di ricerca che non sono stati coinvolti nello studio e non conoscono gli obiettivi dello studio. Mentre l'analisi dei dati sarà effettuata dagli statistici non coinvolti nello studio. Quindi, questo studio è cieco per i ricercatori ma non cieco per i soggetti poiché il gruppo ACT non ha un gruppo di controllo parallelo.

Tutte le analisi dei dati verranno eseguite utilizzando il software SPSS versione 26.0. Saranno calcolate statistiche descrittive per caratteristiche socio-demografiche e cliniche, punteggi CIWA-Ar), PACS, AUDIT, HAMD e HAMA, analisi ERP e livelli sierici di citochine pro-infiammatorie. Tutte le variabili categoriche saranno presentate in frequenza e percentuale, mentre tutte le variabili continue saranno riportate in media e deviazione standard o mediana e intervallo interquartile, a seconda della normalità. Inizialmente, l'ERP, il contenuto di microbiota fecale e i livelli sierici di citochine pro-infiammatorie (IL-1β, IL-6 e TNF-α) saranno confrontati tra i soggetti sperimentali e i controlli sani. I livelli sierici di citochine pro-infiammatorie (IL-1β, IL-6 e TNF-α) saranno confrontati utilizzando il t-test indipendente (se i dati sono distribuiti normalmente) o il test U di Mann-Whitney (se i dati non sono distribuiti normalmente) . La differenza media nell'outcome primario (punteggi CIWA-Ar, PACS e AUDIT) per i tre gruppi randomizzati (gruppi ACT, probiotici e palcebo) in ogni momento specifico (pre-intervento, 2 settimane al completamento del trattamento convenzionale). t0], post-trattamento a 8 settimane [t1], post-trattamento a 12 settimane [t2] e post-trattamento a 24 settimane [t3]) saranno valutati utilizzando l'analisi della varianza unidirezionale (ANOVA) seguita da falsa scoperta adeguamento tariffario. Per l'analisi del pool principale, l'ANOVA mista viene utilizzata per determinare l'interazione tra i gruppi (gruppi ACT, probiotici e placebo) e i punti temporali sull'esito primario; interazione = intervento × tempo; dove il tempo è una variabile all'interno del soggetto e l'effetto dell'intervento è una variabile tra i soggetti). I principali effetti dell'intervento nei gruppi e nei punti temporali saranno presentati come media marginale stimata ed errore standard della media. L'analisi primaria dello studio seguirà il principio dell'intenzione di trattare (ITT). L'analisi dei dati per gli esiti secondari dello studio (gravità dell'ansia e dei sintomi depressivi, citochine pro-infiammatorie, caratteristiche EEG e microbiota fecale) sarà condotta in modo simile al calcolo degli esiti primari. La significatività statistica sarà a due code e impostata su p < 0,05.

Per gestire eventuali dati mancanti, se i dati mancanti rappresentano meno del 5% dei dati totali raccolti dallo studio, verranno ignorati. Se i dati mancanti rappresentano più del 5% ma meno del 40% del totale raccolto e si presume che siano casualmente mancanti, verrà eseguita un'imputazione multipla (stima di massima verosimiglianza ristretta) utilizzando Stata 15. Tuttavia, se i dati mancanti rappresentano più del 40% dei dati totali raccolti o si presume che manchino in modo non casuale o completamente casuale, solo i dati raccolti verranno utilizzati per l'analisi dello studio e i dati mancanti saranno spiegati come una limitazione della ricerca in qualsiasi pubblicazione dei risultati dello studio.