Účinnost probiotik při léčbě poruch spojených s užíváním alkoholu u dospělých mužů

Studie bude provedena ve druhé přidružené nemocnici Xinxiang Medical University (Henan Mental Hospital), Xinxiang, Henan, Čína a psychiatrické ambulanci v Advanced Medical and Dental Institute, Universiti Sains Malajsie.

Schválení studie bylo získáno od Etického výboru pro lidský výzkum Lékařské univerzity Xinxiang (kód: XYEFYLL-(výzkum)-2022-28) a od Etického výboru pro lidský výzkum Universiti Sains Malajsie (kód: USM/JEPeM/22080546) . Před účastí ve studii budou účastníci informováni o svém právu ze studie kdykoli odstoupit a shromážděná data budou okamžitě smazána a nebudou použita pro studii. Účastníkům bude připomenuto, že nebudou použity žádné osobní údaje a že budou analyzována a zveřejněna pouze skupinová data. Budou mít jistotu své anonymity pro účast v procesu. Účastníci budou mít jistotu, že shromážděná data budou použita pouze pro výzkumné účely a zjištění nebudou zaznamenána v jejich spisech. Všem účastníkům bude přiděleno výzkumné číslo pro účely identifikace, například „PROB 001“. Všechna data získaná od účastníků budou uložena ve výzkumném souboru, který bude uzamčen v kartotéce, přičemž klíč bude uchováván hlavním řešitelem. Shromážděná data mohou být také uložena na flash disku a notebooku, ke kterým má přístup pouze výzkumný tým a hlavní řešitel.

Aby bylo možné sledovat nežádoucí účinek (AE) během studie, všichni účastníci obdrží zkušební kartu, která obsahuje jméno, kontaktní číslo a e-mail členů výzkumného týmu. Doporučujeme jim, aby v případě výskytu AE kontaktovali odpovědného člena výzkumného týmu. Výskyt AE bude poté hlášen do části „nežádoucí účinek“ ve formuláři kazuistiky studie. Nežádoucí účinky, které mohou vést k stažení účastníků ze studie, jsou: (1) nežádoucí reakce, která nesouvisí s intervencí studie, ale způsobuje účastníkům nepohodlí, (2) nežádoucí reakce, která souvisí s intervencí studie (probiotika, ACT a/nebo placebo) a (3) jakékoli změny v chování, temperamentu, osobnosti, psychotických symptomech a sebevražedných sklonech, ke kterým došlo po zahájení studijní intervence (probiotika, ACT a/nebo placebo). Všechny AE by měly být hlášeny Etickému výboru pro lidský výzkum Lékařské univerzity Xinxiang a Universiti Sains Malajsie a mělo by být provedeno vyšetřování.

Hlavní zkoušející povede centrum hodnocení a bude úzce koordinovat každodenní koordinaci s výzkumnými a místními koordinátory zahrnujícími provádění klinického hodnocení, nábor subjektů a sběr dat. Bude také zřízena jednotka pro sledování hodnocení, které bude předsedat hlavní zkoušející, přičemž se bude konat týdenní setkání, na kterém se bude diskutovat o průběhu hodnocení, auditu hodnocení a připravovat zprávu, která má být předložena Výboru pro humánní etiku Xinxiang Medical University a Universiti Sains Malajsie. Monitorování údajů ze studií a auditování studie bude řízeno koordinační jednotkou klinických studií 2. přidružené nemocnice lékařské univerzity Xinxiang a pokročilého lékařského a zubního institutu, Universiti Sains Malaysia, které jsou nezávislé na sponzorovi. Prozatímní analýza bude provedena, pokud existuje taková potřeba předčasného ukončení hodnocení na základě posouzení a auditu údajů ze studie.

Primární cíl:

Stanovit rozdíly v závažnosti závislosti na alkoholu, abstinenci alkoholu a bažení mezi pacienty s Lactobacillus sp., placebem a ACT ve 4 časových liniích (výchozí stav, 8 týdnů po zahájení intervence, 12 týdnů po zahájení intervence a 24 týdnů po zahájení intervence což je 12 týdnů po ukončení intervence).

Sekundární cíle:

1. Stanovit rozdíly v závažnosti příznaků deprese a úzkosti, změny charakteristik EEG a sérové ​​hladiny prozánětlivých cytokinů u pacientů na Lactobacillus sp., placebo a ACT, ve 4 časových liniích (výchozí stav, 8 týdnů po zahájení intervence, 12 týdnů po zahájení intervence a 24 týdnů po zahájení intervence, což je 12 týdnů po ukončení intervence).
2. Posoudit rozdíly v profilech střevní mikroflóry pacientů na Lactobacillus sp., placebo a ACT pomocí vzorků stolice ve 3 časových liniích (základní stav, 2 týdny po zahájení intervence a 8 týdnů po zahájení intervence).

V této studii budou účastníci rekrutováni ze zdrojové populace. Zdrojovou populací jsou všichni pacienti registrovaní pod 2. přidruženou nemocnicí lékařské univerzity Xinxiang (XXMU), Čína a ambulantní psychiatrickou klinikou Advanced Medical and Dental Institute, Universiti Sains Malaysia s duševním onemocněním souvisejícím s alkoholem. Reklama s plakáty bude vystavena ve 2. přidružené nemocnici XXMU, ​​Psychiatrické klinice XXMU a Advanced Medical and Dental Institute, Universiti Sains Malaysia, aby pomohla při náboru subjektů. V této studii byli jako experimentální skupina vybráni pacienti se závislostí na alkoholu, kteří splnili diagnostická kritéria „porucha užívání alkoholu“ v DSM-5. Zdraví lidé, kteří splňovali normy WHO pro zdravé pití nebo nepili, byli použiti jako zdravá kontrolní skupina. Poté začne základní hodnocení (t0) následované přijetím subjektů experimentální skupiny na počáteční 2 týdny k detoxifikaci (rutinní léčbě). Hodnocení pro subjekty v experimentální skupině zahrnuje hodnocení klinického institutu pro odstoupení od smlouvy pro alkohol-revidovaný (CIWA-Ar), Penn Alcohol Craving Scale (PACS), Alcohol Use Disorder Identification Test (AUDIT), Hamilton Depression Rating Scale (HAMD) a Hamilton Anxiety Rating Skóre stupnice (HAMA), analýza ERP, hladiny prozánětlivých cytokinů v séru a analýza fekální mikroflóry. Zatímco hodnocení zdravých kontrol zahrnuje analýzu ERP, hladiny prozánětlivých cytokinů v séru a analýzu fekální mikroflóry. Při detoxifikaci byla podávána léčba abstinenčních příznaků především substituční terapií benzodiazepiny, při adekvátní suplementaci vitamínů B, posílení symptomatické podpůrné léčby a odpovídajících antipsychotik, antidepresiv nebo emočních stabilizátorů dle stavu. Po odeznění abstinenčních příznaků se benzodiazepiny postupně vysazují. Poté budou subjekty v experimentální skupině náhodně rozděleny do tří skupin, jako je skupina probiotika + rutinní léčba, skupina placebo + rutinní léčba a skupina akceptační a závazkové terapie (ACT) + rutinní léčebná skupina. Specifická intervence bude prováděna v příslušných skupinách.

Odhadovaná velikost vzorku potřebná pro srovnání fekální mikroflóry, sérových cytokinů a EEG a fyziologických ukazatelů mezi subjekty s poruchou užívání alkoholu a zdravými kontrolami byla vypočtena pomocí G*Power kalkulátoru 3.1.9.7 pro výpočet průměrných rozdílů mezi dvěma nezávislými skupinami. přičemž chyba typu I = 0,05, síla = 0,8, alokační poměr = 1:1 a velikost účinku = 0,4 [De Giani et al. (2020)]. Odhadovaná potřebná velikost vzorku byla 120 subjektů na skupinu (včetně 20 % vyřazených). Odhadovaná velikost vzorku potřebná pro experimentální subjekt byla vypočtena pomocí G*Power calculator 3.1.9.7 pro výpočet velikosti vzorku pro opakované měření ANOVA, v rámci interakce mezi tím, kde chyba typu I = 0,05, síla = 0,8, počet skupin = 3 , počet měření = 3, velikost účinku = 0,15 [Kazemi et al. (2019)]. Odhadovaná potřebná velikost vzorku byla 120 subjektů, 40 subjektů na skupinu (včetně 30% vyřazených).

Bylo zvoleno jednoslepé provedení randomizované kontrolované studie. Vhodní pacienti s AD budou randomizováni v poměru 1:1:1 do tří ramen studie podle počítačem generovaného, ​​blokovaného randomizačního seznamu. Způsobilí pacienti budou zařazeni do skupiny probiotik, skupiny ACT a kontrolní skupiny s kódem léčby ukrytým v uzavřené obálce. Randomizaci provede statistik studie, který nebyl v kontaktu s pacienty a nezapojil se do výzkumného projektu. Statistik je vyškolen k tomu, aby randomizoval subjekty, které se nejprve zapsaly do studie, do tří skupin pomocí počítačového systému pro účely randomizace. Alokační sekvence nebude dostupná žádnému členovi výzkumného týmu, dokud nebudou databáze dokončeny a uzamčeny. Sběr dat bude provádět výzkumní asistenti, kteří nebyli zapojeni do studie a neznají cíle studie. Zatímco analýzu dat provedou statistici, kteří se studie nezapojí. Proto je tato studie pro výzkumníky zaslepená, ale ne zaslepená pro subjekty, protože skupina ACT nemá žádnou paralelní kontrolní skupinu.

Veškerá analýza dat bude provedena pomocí softwaru SPSS verze 26.0. Budou vypočítány popisné statistiky pro sociodemografické a klinické charakteristiky, CIWA-Ar), PACS, AUDIT, HAMD a HAMA skóre, ERP analýza a hladiny prozánětlivých cytokinů v séru. Všechny kategoriální proměnné budou uvedeny ve frekvenci a procentech, zatímco všechny spojité proměnné budou uvedeny v průměru a směrodatné odchylce nebo mediánu a mezikvartilním rozmezí, závisí na normalitě. Nejprve bude mezi experimentálními subjekty a zdravými kontrolami porovnána ERP, obsah fekální mikrobioty a sérové ​​hladiny prozánětlivých cytokinů (IL-1β, IL-6 a TNF-α). Sérové ​​hladiny prozánětlivých cytokinů (IL-1β, IL-6 a TNF-α) budou porovnány pomocí nezávislého t-testu (pokud jsou data normálně distribuována) nebo Mann-Whitney U testu (pokud data nejsou normálně distribuována). . Průměrný rozdíl v primárním výsledku (skóre CIWA-Ar, PACS a AUDIT) pro tři randomizované skupiny (ACT, probiotické a palcebo skupiny) v každém konkrétním časovém bodě (před intervencí, 2 týdny po dokončení konvenční léčby [ t0], po léčbě v 8 týdnech [t1], po léčbě ve 12 týdnech [t2] a po léčbě ve 24 týdnech [t3]) budou hodnoceny pomocí jednosměrné analýzy rozptylu (ANOVA) následované falešným zjištěním úprava sazby. Pro analýzu hlavního souboru se smíšená ANOVA používá ke stanovení interakce mezi skupinami (ACT, probiotické a placebové skupiny) a časovými body primárního výsledku; interakce = zásah × čas; kde čas je vnitrosubjektová proměnná a intervenční efekt je mezipředmětová proměnná). Hlavní účinky intervence ve skupinách a časových bodech budou prezentovány jako odhadovaný mezní průměr a standardní chyba průměru. Primární analýza studie se bude řídit principem intence-to-treat (ITT). Analýza dat pro sekundární výsledky studie (závažnost symptomů úzkosti a deprese, prozánětlivé cytokiny, EEG charakteristiky a fekální mikrobiota) bude provedena podobně jako výpočet primárních výsledků. Statistická významnost bude dvoustranná a bude nastavena na p < 0,05.

Pokud chybějící data představují méně než 5 % celkových shromážděných dat studie, budou při zpracování jakýchkoli chybějících dat ignorována. Pokud chybějící data představují více než 5 %, ale méně než 40 % z celkového počtu shromážděných dat a předpokládá se, že chybějí náhodně, provede se vícenásobná imputace (omezený odhad maximální pravděpodobnosti) pomocí Stata 15. Pokud však chybějící data představují více než 40 % celkových shromážděných dat nebo se předpokládá, že chybí buď ne náhodně, nebo zcela náhodně, pak budou pro analýzu studie použita pouze shromážděná data a chybějící data budou vysvětlena jako omezení výzkumu v jakýchkoli publikacích výsledků studie.