実験室モデル システムを使用したウイルス発癌における小さな DNA ウイルス エンコードされた癌遺伝子の研究

研究対象:

1. 包含基準:

   • 年齢: 18 ～ 65 歳。
   • 定期検診でHPV陽性と診断された女性。 -研究に参加し、インフォームドコンセントに署名することをいとわない女性

2. 除外基準:

   • 極端な年齢 (18 歳未満または 65 歳以上)。
   • 免疫不全患者、ステロイド療法または化学療法を受けている患者、または免疫系に影響を与える可能性のある重篤な疾患を患っている患者。
   • 病歴不明。

   研究会:

   • グループ 1 (症例): 悪性度の程度にかかわらず、子宮頸がんを有することが知られている患者 (定期的なスクリーニングまたはその他の診断検査によって診断された)
   • グループ 2 (コントロール): 同じ選択基準と除外基準を共有するが、子宮頸がんがあることが知られていない女性

   研究の目的:

   1. 細胞の形質転換と発がんにおける小さな DNA ウイルスの例として HPV の役割を研究しています。
   2. 子宮頸がん発生のリスクが高い HPV 遺伝子型の決定。
   3. 細胞の形質転換や悪性腫瘍に関与する HPV 癌遺伝子の検出。

   4. 細胞の形質転換と発癌におけるウイルス DNA の統合の役割を研究しています。

      研究方法:

      サンプルの収集と保存:

      • サンプルは、収集装置のタイプに対応する指示に従って、ブラシまたは綿棒で子宮頸部から採取されます。

      • コレクション チューブは室温 (15 ～ 30 °C) で保存されます。

      • サンプルは収集後14日以内に検査室に送られます
      • チューブは室温で 2 ～ 3 週間保存できます。

      HPV 検出:

      • HPV は組織培養では増殖できないため、ほとんどの場合、その正確な同定はポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) などの分子生物学的手法に依存しています。

      HPVジェノタイピング:

      • PCR-RFLP は、HR と LR の HPV 遺伝子型を区別することで優れた識別力を示し、単一または複数の感染を識別することが可能です。

      • この手法では、増幅された DNA が制限酵素によって消化され、さまざまな長さの DNA 断片が得られます。 各フラグメントの長さは、特定の HPV 遺伝子型の特徴です。

      • 最も一般的な制限酵素は、BamHI、Dd6eI、HaeIII、HinfI、PstI、および RsaI です。

      HPV がん遺伝子とがんタンパク質:

      • E6/E7 がん遺伝子の mRNA を検出するために使用される主な技術は、PreTectW Proofer と APTIMAW HPV Assay の 2 つの市販のアッセイです。 これらの技術は、PCR を使用した全長 E6/E7 転写産物の転写媒介増幅に基づいています。

      統計分析：

      • データは、SPSS ソフトウェア バージョン 24.0 を使用して、一元配置分散分析によって分析されます。 値は平均 ± SD として表されます。 2 つのグループを比較するために、スチューデントの t 検定を使用して、ケースがコントロールと有意に異なるかどうかを判断します。 差は P < 0.05 で統計的に有意と見なされますが、P < 0.01 はより有意な変化を表します。