실험실 모델 시스템을 이용한 바이러스 발암에서의 작은 DNA 바이러스 암호화 종양유전자 연구

연구 주제:

1. 포함 기준:

   • 나이: 18 - 65세.
   • 일상적인 선별 검사에서 HPV 양성 진단을 받은 여성. 연구에 참여하고 정보에 입각한 동의서에 서명할 의향이 있는 여성

2. 제외 기준:

   • 극한 연령(18세 미만 또는 65세 이상).
   • 면역체계가 손상된 환자, 스테로이드 요법 또는 화학 요법을 받고 있는 환자 또는 면역 체계에 영향을 미칠 수 있는 심각한 의학적 질병이 있는 환자.
   • 알 수 없는 병력.

   스터디 그룹:

   • 1군(사례): 악성도와 상관없이 자궁경부암이 있는 것으로 알려진 환자(일상적인 선별검사 또는 기타 진단 검사로 진단됨)
   • 그룹 2(대조군): 동일한 포함 및 제외 기준을 공유하지만 자궁경부암이 있는 것으로 알려지지 않은 여성

   연구 목적:

   1. 세포 변형 및 발암에서 작은 DNA 바이러스의 예로서 HPV의 역할을 연구합니다.
   2. 암 자궁 경부 발생의 높은 위험과 관련된 대부분의 HPV 유전자형을 결정합니다.
   3. 세포 형질전환 및 악성종양 역할을 하는 HPV 발암유전자의 검출.

   4. 세포 변형 및 발암에서 바이러스 DNA 통합의 역할을 연구합니다.

      연구 방법:

      샘플 수집 및 보관:

      • 수집 장치 유형에 해당하는 지침에 따라 브러시나 면봉으로\ 자궁 경부에서 샘플을 채취합니다.

      • 수집 튜브는 실온(15-30 °C)에서 보관됩니다.

      • 샘플은 수집 후 14일 이내에 실험실로 보내집니다.
      • 튜브는 실온에서 2~3주 동안 보관할 수 있습니다.

      HPV 감지:

      • HPV는 조직 배양에서 전파될 수 없으므로 대부분의 경우 정확한 식별은 중합효소 연쇄 반응(PCR)과 같은 분자 생물학 기술에 의존합니다.

      HPV 유전자형:

      • PCR-RFLP는 HR과 LR HPV 유전자형을 구별하여 좋은 판별력을 보이며 단일 또는 다중 감염을 식별할 수 있습니다.

      • 이 기술에서 증폭된 DNA는 제한 효소에 의해 분해되어 다양한 길이의 DNA 조각이 됩니다. 각 조각 길이는 특정 HPV 유전자형의 특징입니다.

      • 가장 일반적인 제한 효소는 BamHI, Dd6eI, HaeIII, HinfI, PstI 및 RsaI입니다.

      HPV 종양유전자 및 종양단백질:

      • E6/E7 종양 유전자에 대한 mRNA를 검출하는 데 사용되는 주요 기술은 PreTectW Proofer 및 APTIMAW HPV Assay의 두 가지 상업용 분석입니다. 이러한 기술은 PCR을 사용하여 전장 E6/E7 전사체의 전사 매개 증폭을 기반으로 합니다.

      통계 분석:

      • 데이터는 SPSS 소프트웨어 버전 24.0을 사용하여 단방향 분산 분석으로 분석됩니다. 값은 평균 ± S.D로 표시됩니다. 두 그룹 간의 비교를 위해 사례가 대조군과 유의미하게 다른지 여부를 결정하기 위해 스튜던트 t 테스트가 사용됩니다. 차이는 P<0.05에서 통계적으로 유의한 것으로 간주되는 반면 P<0.01은 더 중요한 변화를 나타냅니다.