同種幹細胞移植後の選択されたドナー NK 細胞の注入のフェーズ I (DLI-NK)

• 細胞採取

  o リンパ球は、移植後 60 日前後にできるだけ早く元の同意ドナーから採取されます。

• NK細胞の選択

  o 細胞は二重選択後に取得されます: ヨーロッパで承認された装置 (Miltenyi Corporation) を使用した CD3+ 除去とそれに続く CD56+ 選択

• NK細胞の体外活性化

  o ex vivo 活性化: 古典的な手順に従ったインターロイキン-2 (10% ウシ胎児血清、0.5 x 106 細胞 / ml、1000 U/ml d'IL-を補充した RPMI 臨床グレード培地を用いて 37°C で 7 日間) 2 (インターロイキン、プロロイキン)

• NK細胞注入（移植後60～90日後）

• レベル 1: 1 x 10e6 NK 細胞 /kg;
• レベル 2: 5 x 10e6 NK 細胞 /kg;
• レベル 3: > 5.10e6 かつ ≤ 5.10e7 細胞 NK/kg

免疫モニタリング: in vivo 導入後の NK 個体発生、KIR 発現の特徴付け (表現型および遺伝子型)、腫瘍細胞株および EBV 形質転換 B 細胞株に対する機能活性の記録。 これらの研究により、NK細胞の機能（細胞毒性とサイトカイン産生）の動態をさらに調整することが可能になるだけでなく、基本的な免疫学のさまざまな疑問に答えることができるようになります。

次の研究が実行されます。

1. aGVHD の初期段階、免疫活性化および毒性の分析
2. NK再構成および樹状細胞を含む骨髄細胞に対する注入の影響
3. 抗白血病効果