콩고민주공화국 남부 키부에서 단순 말라리아에 대한 Artesunate-amodiaquine 및 Artemether-lumefantrine의 효능

3.1 연구 설계 포함 기준을 충족하는 단순한 말라리아가 있는 어린이를 등록하고(부모/보호자가 동의한 후) 평가 중인 약물로 현장에서 치료하고 42일 동안 후속 조치를 취합니다. 약물은 진료소나 집에서 직접 감독하에 투여됩니다. 후속 조치는 고정된 일정의 임상 및 실험실 검사로 구성됩니다. 임상 및 검사 결과에 따라 소아는 치료 실패(조기 또는 후기) 또는 적절한 반응자로 분류됩니다.

추적 기간 동안 생체 내 치료 실패를 경험한 사례의 비율은 약물 요법의 효능에 대한 추정치를 제공할 것입니다. 치료 실패로 인한 진정한 재발과 재감염 에피소드를 구별하기 위해 PCR(Polymerase Chain Reaction) 분석이 수행됩니다. 이 제안은 높은, 중간 또는 낮은 전송 영역11에서 항말라리아 효능 모니터링에 대한 최신 WHO 권장 사항을 준수합니다.

3.2 연구 장소 연구 장소는 Baraka 보건 센터, MSF-OCA Baraka, South Kivu, DRC의 MSF 집수 지역이 될 것입니다.

3.3 연구 모집단 연구 모집단은 단순 P. falciparum 말라리아에 걸린 6개월에서 59개월 사이의 어린이입니다. 이 연령대는 나이가 많은 어린이 및 성인에 비해 가장 취약한 것으로 간주되고 자발적으로 감염을 제거할 가능성이 적기 때문에 선택되었습니다. 고풍병 지역에서는 말라리아로 사망할 위험이 가장 높습니다.

3.4 정의 3.4.1 부모/보호자의 정의 부모/보호자는 환자를 돌보고 환자와 관련된 모든 인구통계 및 건강 문제에 대해 정확한 정보를 제공할 수 있는 18세 이상의 가구 구성원으로 정의되며, 설문조사 시간.

3.5 포함 및 제외 기준

아동은 다음 포함 기준을 모두 충족하는 경우 연구 참여 자격이 있습니다.

• 6개월에서 59개월 사이의 나이
• 무게 ≥ 5kg
• Plasmodium falciparum만으로 슬라이드 확인 감염(혼합 감염 없음)
• 2000~200000/µl 혈액의 무성 기생충 밀도
• 측정된 겨드랑이 온도 ≥ 37.5°C
• 경구용 약물을 삼킬 수 있는 능력
• 후속 방문을 존중할 가능성이 높음(OPD에서 도보로 1시간 이내 거주, 예정된 여행 계획 없음 등)
• 최소 18세 이상의 부모 또는 보호자의 정보에 입각한 동의서.

아동은 다음 제외 기준 중 하나를 충족하는 경우 연구 참여에서 제외됩니다.

• WHO 정의에 따른 일반적인 위험 징후(부록 5.1.1)
• WHO 정의에 따른 중증/복합 말라리아의 징후(부록 5.1.2)
• 심한 빈혈(헤모글로빈 < 5g/dL)
• 임의의 연구 약물에 대한 과민증의 알려진 이력
• 심각한 급성 영양실조(-3 Z-점수 미만의 키 대비 체중 및/또는 적어도 발을 포함하는 대칭적 부종으로 정의됨)
• 연구 결과를 혼동시킬 가능성이 있는 말라리아 이외의 원인으로 인한 수반되는 열성 질환(홍역, 급성 하기도 감염, 중이염, 편도선염, 농양, 탈수를 동반한 심한 설사).
• 이전 28일 동안(부모/보호자가 표시한 대로) 연구 중인 전체 치료 과정(또는 치료 중 하나)을 이미 받은 경우. 이전에 연구 중인 치료의 불완전한 항말라리아제 섭취 또는 연구 중이 아닌 이전의 항말라리아제 섭취는 제외 기준이 아니지만 그러한 섭취에 대한 세부 사항을 주의 깊게 기록해야 합니다.
• 과민 반응의 병력 또는 시험 중인 약물에 대한 금기 사항.

3.6 샘플 크기 최근 연구에서는 Coartem® 요법14;17;21;22에서 아동의 재발(치료 실패)로 인한 재발성 기생충혈증의 42일 위험이 0.9-6% 범위인 것으로 나타났습니다. 따라서 5%의 재발성 기생충혈증(재발성, PCR 교정으로 인한)의 보수적 추정 위험에 기초하여 치료군당 120명의 환자가 필요하지 않은 치료군 사이의 재발성 기생충혈증 위험의 차이를 감지하는 데 필요하다고 계산했습니다. 7% 이상(단측 제1종 오류 5%, 검정력 80%)23.

재감염, 확인되지 않은 PCR 결과 또는 후속 조치에 대한 손실이 샘플의 20%에서 발생한다고 가정하면, 이 연구의 총 추정 샘플 크기는 6-59개월의 어린이 288명(팔당 144명)이 될 것입니다.

3.7 평가 일정 0일은 임상 평가, 초기 말라리아 혈액 도말 검사, 첫 번째 헤모글로빈 측정, PCR을 위한 전처리 모세혈관 샘플, 연구 중인 약물의 첫 번째 용량 등록 및 투여로 선별하는 날입니다. 1일차와 2일차에는 치료가 계속되고 어린이들은 국경없는의사회 진료소에서 재평가를 받게 됩니다.

아이들은 3일, 7일, 14일, 21일, 28일, 35일, 42일의 의무적인 날에 클리닉으로 돌아갑니다. 각 예정된 방문에서 임상 검사 및 혈액 도말 검사가 수행됩니다. 진료소 출석을 장려하기 위해 비누, 담요 및 여행 경비 상환과 같은 작은 인센티브가 제공됩니다. 연구에 모집된 모든 어린이는 오래 지속되는 살충 처리된 모기장을 받습니다.

아이들이 예정되지 않은 방문을 위해 클리닉에 돌아와야 하는 경우, 필요에 따라 매번 임상 및 실험실 검사가 실시됩니다. 7일 이후 치료 실패 시 PCR을 위한 모세혈관 혈액 샘플을 채취합니다.

3.8 연구 종점 연구 종점은 유효성 연구의 맥락에서 환자를 더 이상 추적하지 않는 시점입니다. 유효한 연구 종점에는 치료 실패, 치료 실패 없이 후속 기간 완료, 후속 조치 실패, 연구 철회(자발적 및 비자발적) 및 프로토콜 위반이 포함됩니다11.

3.8.1 조기 치료 실패(ETF)

• 기생충혈증이 있는 상태에서 1일, 2일 또는 3일에 위험 징후 또는 중증 말라리아 발생, 또는
• 겨드랑이 온도와 상관없이 2일차에 0일차보다 높은 기생충혈증, 또는
• 3일째 겨드랑이 온도가 37.5°C 이상인 기생충혈증, 또는
• 3일째 기생충혈증 ≥ 겨드랑이 온도와 관계없이 0일째 카운트의 25%.

3.8.2 후기 임상 실패(LCF)

• 4일차부터 42일차까지 기생충혈증이 있는 상태에서 위험 징후 또는 중증 말라리아 발생(이전에 ETF 기준을 충족하지 않음), 또는
• 4일차부터 42일차까지 기생충혈증 및 겨드랑이 온도 ≥ 37.5°C 존재(이전에 ETF 기준을 충족하지 않음) 3.8.3 LATE 기생충학적 실패(LPF)
• 7일차부터 42일차까지 37.5°C 미만의 기생충혈증 및 겨드랑이 온도(ETF 또는 LCF 기준을 이전에 충족하지 않음) 3.8.4 적절한 임상 및 기생충학적 대응(ACPR)
• 겨드랑이 온도와 관계없이 42일째 기생충혈증 부재(이전에 ETF, LCF 또는 LPF의 기준을 충족하지 않음) 3.8.5 NON ANALYSABLE ENDPOINTS 환자가 등록 후 다음 기준 중 하나를 충족하는 경우 환자의 종료점을 분석할 수 없습니다. 연구에서. 비열등성 연구에서 ITT(Intention-to-treat) 분석은 종종 비열등성(제1종 오류)을 잘못 주장할 위험을 증가시키므로 여기서는 수행하지 않습니다24.

3.8.5.1 프로토콜 위반:

• 구토로 인한 것이 아닌 전체 연구 치료 요법을 완료하지 못한 경우,
• 환자의 잘못된 등록(모든 포함/제외 기준이 존중되지 않음),
• 항말라리아제 또는 항말라리아 활성이 있는 항생물질(코트리목사졸, 안연고를 제외한 테트라사이클린, 독시사이클린, 에리스로마이신, 클린다마이신, 아지스로마이신)을 제3자가 투여하거나 자가 치료를 통해 복용하는 경우,
• (실험실 또는 임상 오류로 인해) 환자의 종료점을 잘못 분류하여 구조 치료의 부당한 관리로 이어짐,
• PCR 결과가 없거나 확인되지 않은 LCF 또는 LPF. 3.8.5.2 철회:
• 등록 후 0일째에 발생하는 중증 말라리아,
• 열대열이 아닌 종으로 (혼합 또는 단일) 감염의 검출,
• 임의의 연구 용량을 1회 이상 구토,
• 치료 중단이 필요할 정도로 심각한 연구 약물의 부작용,
• 말라리아 이외의 이유로 입원하여 정상적인 후속 방문이 불가능합니다.
• 동의 철회

3.8.6 안전 종점 부작용의 발생은 문서화됩니다. 모든 환자는 이전 증상과 이전 후속 방문 이후 나타난 증상에 대해 일상적으로 질문을 받게 됩니다. 임상적으로 필요한 경우 환자를 적절하게 평가하고 치료합니다. 모든 심각한 유해 사례는 증례 보고서 양식에 기록됩니다.

3.9 연구 치료 3.9.1 시험된 요법

• 아르테수네이트-아모디아퀸 고정 용량 조합, ASAQ FDC(아르테수네이트-아모디아퀸 Winthrop® Sanofi Aventis)를 3일 동안 1정/일로 제공:

  • 아르테수네이트 25mg / 아모디아퀸 67.5mg : 소아 5~8.9kg
  • 아르테수네이트 50mg / 아모디아퀸 135mg: 9~17.9kg 어린이의 경우 1정/일
  • Artesunate 100mg / amodiaquine 270mg: 18~34.9kg 어린이의 경우 1정/일

• Artemether 20mg / lumefantrine 120mg 복합제형 정제(Coartem®, Novartis)는 3일에 걸쳐 1일 2회 6회 투여합니다.

  • 5~14.9kg 어린이용 1정/용량 (총 6정)
  • 15~24.9kg 어린이용 2정/용량 (총 12정)
  • 체중 15-24.9kg의 경우 2정/용량 (총 12개 탭)
  • 체중 25-34.9의 경우 3정/용량 Kg(총 18정) Coartem®의 두 번째 용량은 등록 시 제공되는 첫 번째 용량 후 8시간(h)에 제공됩니다. 다음 용량은 첫 번째 용량 후 24시간, 36시간, 48시간 및 60시간 후에 제공됩니다. 환자는 우유나 지방이 많은 음식을 한 잔 먹거나 각 용량을 복용하기 전에 모유 수유를 하도록 권장됩니다.

연구 중인 약물은 동일한 배치에서 나옵니다. 모든 연구 용량은 감독될 것입니다. 30분 동안 섭취 후 환자를 직접 관찰한다. 구토가 발생하면 반복 용량이 투여됩니다. 반복 투여량도 구토하는 경우 아동은 연구에서 제외되고 구조 치료가 시작됩니다.

Coartem®의 저녁 용량을 투여하기 위해 가정 방문/마을 보건 요원이 첫 번째 투여 후 8시간, 32시간 및 56시간 후에 환자의 집을 방문합니다. 따라서 이 연구에 대한 모집은 오후 12시 이전에 OPD에서만 이루어집니다. 3.9.2 병용 치료 38°C 이상의 발열은 파라세타몰 또는 아세트아미노펜으로 치료할 수 있으며, 파라세타몰 20mg/kg의 1회 용량에 이어 가정 치료를 위해 4~6시간 간격으로 15mg/kg을 투여합니다. 미지근한 스폰지는 약물 섭취 전에 열을 내리는 데 사용할 수 있습니다.

치료가 필요한 부작용은 현지 관행에 따라 치료할 수 있습니다. 연구 의약품과 관련된 부작용을 치료하기 위해 투여된 의약품을 포함하여 연구 과정 동안 추가 의약품에 대한 임상 적응증이 있는 경우 의약품 이름, 용량 및 투여 날짜와 시간을 기록해야 합니다. 사례 보고서 양식. 항말라리아 활성이 있는 항생제(코트리목사졸, 안연고를 제외한 테트라사이클린, 독시사이클린, 에리스로마이신, 클린다마이신, 아지스로마이신)는 동등한 효과가 없는 경우가 아니면 처방되지 않지만, 등록 시 또는 말라리아 이외의 상태에 대한 후속 조치 중에 추가 처방이 제공될 수 있습니다. 대안을 사용할 수 있습니다. 그러한 처방은 주의 깊게 기록됩니다.

연구 중 약초 요법의 사용을 피해야 하며, 참가자가 몸이 좋지 않은 경우 치료를 위해 연구 장소로 돌아가도록 권장해야 합니다. 연구 중에 한약을 복용한 경우 증례 보고 양식의 '연구 약물 투여' 항목에 기록해야 합니다.

필요한 경우 WHO25에 따라 빈혈을 개선하기 위해 조혈제(황산제일철 및 엽산 등)를 처방합니다.

3.9.3 구조 치료

다음과 같은 경우 WHO 지침25에 따라 말라리아 구제 치료를 즉시 시작해야 합니다.

• 등록 후 0일에 중증 말라리아로의 진행
• 임의의 연구 용량을 1회 이상 구토
• 조기 치료 실패
• 늦은 임상 실패
• 후기 기생충 실패
• 비 P의 후속 조치 중 감지. 열에 관계없이 열대열(혼합 또는 단일) 감염 구조 치료는 ASAQ를 연구 치료로 받은 어린이의 경우 3일 동안 6회 용량 Coartem®으로 구성하거나 연구 치료로 Coartem®을 받은 어린이를 위한 ASAQ로 구성됩니다. .
• 중증 말라리아의 경우 구조 치료는 0, 12 및 24시간에 2.4mg/kg의 용량으로 아르테수네이트를 정맥 주사한 다음 환자가 경구 치료를 받을 수 있을 때까지 24시간마다 한 번씩(이후 3일 동안 전체 ACT 과정) P. vivax 또는 P. ovale 감염 시 3일간 Chloroquine을 투여한다.

구조 치료가 시작되면 종점에 도달함에 따라 환자에 대한 정상적인 연구 후속 조치가 종료됩니다. 다만, 구조치료를 받은 환자는 적어도 한 번은 연구진료소에 재방문을 요청해 연구팀이 치료 효과를 확인할 수 있도록 할 예정이다.

3.10 연구 절차 3.10.1 스크리닝 및 등록(0일) Baraka Health 클리닉에 발열 또는 발열 병력이 있고 RDT 양성이며 위험 징후가 없는 6개월에서 59개월 사이의 모든 어린이(부록 5.1.1) 스크리닝을 위해 연구 클리닉으로 보내질 것입니다.

선별 과정에 들어가는 모든 환자에게는 연속된 선별 번호가 할당됩니다. 스크리닝 양식(부록 5.2)은 스크리닝 중인 각 환자의 일반 정보 및 임상 관찰을 기록하는 데 사용됩니다. 각 환자는 위험 징후와 중증 말라리아 징후에 대해 다시 평가됩니다. 그런 다음 중간 상완 둘레(MUAC)가 영양실조 선별 도구로 사용됩니다. 포함 및 제외 기준, 이전 치료 이력(모든 항말라리아제 복용 포함), 임상 검사 및 MUAC가 있는 어린이의 신장 체중을 포함한 초기 임상 평가가 수행됩니다.

말라리아 이외의 열성 질환의 초기 징후를 감지하기 위해 주의를 기울일 것입니다. 왜냐하면 이들의 존재는 연구에서 제외되어야 하기 때문입니다. 이러한 환자는 등록되지 않지만 말라리아(기생충혈증이 있는 경우)와 다른 감염에 대해 적절하게 치료해야 합니다.

환자가 임상적 포함 기준을 충족하는 경우 혈액 포함 기준에 대해 검사를 받게 됩니다(P. Falciparum 단일 감염, 기생충 밀도 및 헤모글로빈 수치). 두꺼운 말라리아 도말 및 얇은 말라리아 도말 표본을 동일한 슬라이드에서 중복하여 채취하고 하나의 도말 표본을 염색합니다. 동시에 모세혈관 혈액 샘플은 Fast Technology for Analysis(핵산) 또는 FTA 카드에서 PCR 분석을 위해 채취됩니다. 환자는 두꺼운 도말 결과를 기다립니다.

모든 포함 기준이 충족되면 환자는 연구에 등록하도록 초대됩니다. 18세 이상이어야 하는 부모/보호자에게 연구 목적을 설명하고 서면 동의서를 요청합니다(부록 5.4). 모든 부모/보호자는 연구 목적과 연구 팀 연락처가 포함된 정보 시트를 받게 됩니다(부록 0).

부모/보호자가 아동을 연구에 포함시키는 데 동의하면 아동에게 고유한 환자 식별 번호가 할당되고 식별 번호가 있는 손목 밴드가 제공됩니다. 관리 데이터는 사례 기록 양식(부록 5.5)에 기록됩니다(아동 및 부모/보호자의 이름, 성별, 연령, 주소 및 방향). 예약 일정을 명확하게 설명하고 고유 환자 식별 번호가 표시된 추적 카드를 나눠줍니다.

각각의 고유한 환자 식별 번호는 연구가 시작되기 전에 치료 요법에 무작위로 지정되며 이 정보는 밀봉된 봉투에 포함됩니다. 연구 약물의 첫 번째 용량은 건강 클리닉에서 분배됩니다(삼킬 수 없는 어린이의 경우 Coartem® 정제가 용해되고 ASAQ 정제는 최소량의 물에 분쇄되어 주사기 또는 드로퍼를 사용하여 분배됩니다). 섭취량은 30분 동안 관찰됩니다. 아이가 토하는 경우 반복 투여를 시도하기 전에 15분의 휴식 시간을 관찰합니다. 수반되는 모든 처방전은 지정된 약국에서 수집되며 가정 치료에 대한 지침이 부모/보호자에게 명확하도록 주의를 기울일 것입니다.

집으로 보내기 전에 환자의 부모/보호자는 증상이 지속되거나 악화될 경우 언제든지 연구 클리닉으로 데려오도록 반복적으로 조언합니다.

Coartem®의 저녁 용량을 투여하기 위해 가정 방문/마을 보건 요원이 첫 번째 투여 후 8시간, 32시간 및 56시간 후에 환자의 집을 방문합니다. 따라서 이 연구에 대한 모집은 오후 12시 이전에 OPD에서만 이루어집니다.

3.10.2 후속 조치(1일차부터 42일차까지) 1일차와 2일차에 연구 약물 치료를 계속합니다. 네 번째(1일) 및 여섯 번째(2일) Coartem® 용량은 집 방문자가 위에서 설명한 대로 집에서 투여됩니다. 그러나 모든 환자는 임상 평가(겨드랑이 온도 측정 포함) 및 말라리아 슬라이드에 의한 기생충 검사를 위해 국경없는의사회 진료소로 돌아올 것입니다. 모든 ASAQ 및 3차 및 5차 Coartem® 용량은 이러한 클리닉 방문 중에 관찰됩니다.

3일, 7일, 14일, 21일, 28일, 35일, 42일에 모든 환자는 임상 평가(겨드랑이 체온 포함) 및 혈액 도말 검사를 위해 국경없는의사회 진료소로 돌아갑니다.

치료 실패가 관찰되면(ETF, LCF 또는 LPF) 구조 치료가 시작됩니다. 7일 이후에 발생하는 LCF 또는 LPF의 경우(재감염이 있는 경우 7일 이전에 임상 증상으로 이어지지 않으므로 재발이라고 가정할 수 있음) PCR 분석을 위해 FTA 카드에서 두 번째 혈액 샘플을 수집합니다.

환자의 예정되지 않은 방문에 대해 임상 평가가 수행되며 말라리아의 징후 및 증상이 있는 경우 말라리아 슬라이드(및 치료 실패 시 PCR을 위한 혈액 샘플)를 채취할 수 있습니다.

매번 방문 후 집으로 보내기 전에 부모/보호자는 질병이 있는 경우 언제든지 환자를 국경없는의사회 진료소로 다시 데려오도록 조언을 받을 것입니다. 근무 시간 외에 응급 상황이 발생하는 경우, 부모/보호자는 예약 카드를 지참하고 응급 직원에게 자녀가 연구에 포함되었음을 알리도록 조언받을 것입니다.

다음날 아침 연구 코디네이터에게 이벤트에 관한 모든 정보를 보고하도록 응급 직원에게 지시가 주어질 것입니다.

예정된 방문 시간에 돌아오지 못한 아동을 추적하려는 시도는 후속 조치에 대한 손실을 최소화하기 위해 가정 방문자가 즉시 수행합니다.

1일과 2일에 복귀하지 않고 치료의 한 용량을 놓친 환자는 연구에서 제외됩니다. 3일 후, 7일째에 복귀하지 않았지만 6일 또는 8일(마찬가지로 13/15일, 20/22일, 27/29일, 34/36일 및 41/43일)에 존재하는 환자는 여전히 분석에 포함됩니다.

3.10.3 측정 기술

• 아동의 속옷만 착용한 상태에서 적절하게 보정된 행잉 저울(Salter)에서 체중을 100g 단위로 측정합니다.
• 키가 85cm 이상이면 아이를 일어서게 하고, 85cm 미만이면 아이를 수평으로 눕혀 나무 높이 판에서 키를 측정합니다.
• MUAC는 왼쪽 팔, 팔꿈치와 어깨 사이의 중간 지점에서 측정되며 가장 가까운 mm로 기록됩니다.
• 부종은 두 발의 등쪽 표면에 3초 동안 엄지손가락으로 압력을 가하여 평가합니다.
• 겨드랑이 온도는 0.1°C의 정밀도로 섭씨 눈금이 있는 보정된 디지털 온도계로 측정됩니다. 결과가

3.11 실험실 기법 3.11.1 말라리아 슬라이드

두껍고 얇은 도말은 동일한 슬라이드에 준비되고 10-15분 동안 10% Giemsa 용액(pH 7.2)에서 염색됩니다. 모든 스미어는 음성으로 선언되기 전에 100 필드까지 읽어야 합니다. 종은 얇은 도말에서 확인됩니다. 두꺼운 얼룩에 대한 P. falciparum 무성 기생충의 정량화는 WHO 프로토콜26에 따라 수행됩니다. 기생충은 최소 200개의 백혈구/백혈구(WBC)에 대해 계산되며 기생충 밀도(혈액 μL당 기생충으로 표현됨)는 8000 WBC/μL의 정상 수준을 가정하여 계산됩니다.

기생충 밀도(/µL) = 계산된 기생충 수 x 8000 / 계산된 WBC 수 200 WBC에 도달하기 전에 500개의 기생충이 계산되면 계산은 해당 필드의 끝에서 중지되고 기생충혈증은 위 공식으로 계산됩니다. 200 WBC 후에 10개 미만의 기생충이 계산되면 계산이 500개의 백혈구로 확장됩니다.

P. falciparum gametocytes의 존재 또는 부재는 종점 분류에 영향을 미치지 않지만 신중하고 체계적으로 기록됩니다. 스미어에 gametocytes가 포함되어 있지만 trophozoites(무성 기생충)가 없는 경우 음성으로 간주됩니다.

자격을 갖춘 두 명의 현미경 검사자가 모든 슬라이드를 독립적으로 읽고 기생충 밀도는 두 수치의 평균을 내어 계산합니다. 일치하지 않는 결과가 있는 혈액 도말(종 진단에서 두 현미경 검사자 간의 차이, 기생충 밀도 >50% 또는 기생충 존재 시)은 세 번째 독립 현미경 검사자가 재검사하고 기생충 밀도는 두 가지를 평균하여 계산됩니다. 가장 가까운 카운트.

모든 혈액 도말 검사는 데이터 분석이 완료되면 폐기됩니다. 3.11.2 헤모글로빈 측정 HemoCue B-헤모글로빈 분석기(스웨덴 엥겔홀름) 장치는 임상적으로 보증되는 경우 0일 또는 다른 날에 헤모글로빈을 측정하는 데 사용됩니다.

3.11.3 PCR 유전형 분석 PCR 유전형 분석은 새로 획득한 감염(다른 기생충 계통)과 진정한 재발(동일한 기생충 계통)을 구별하기 위해 수행됩니다. PCR을 위한 모세혈관 혈액 샘플은 7일 이후 LCF 또는 LPF의 경우 등록 시 및 후속 조치 동안 모든 환자에 대해 수집됩니다.

2-3 방울의 모세혈을 FTA 카드에 채취하여 건조제와 함께 지퍼백에 개별적으로 보관하고 습기, 과도한 열 및 빛을 피하십시오.

유전자형 분석은 Tom van Gool 교수의 감독하에 Academic Medical Center(Amsterdam, The Netherlands)의 의료 미생물학과에서 수행됩니다. 자재 이전 계약이 체결됩니다. 유전자형 분석 절차는 P. falciparum MSP-1 및 MSP-2 유전자 대립유전자의 발현으로 인한 두 유전자좌 유전자형의 비교를 기반으로 합니다. 유전자형이 유사한 치료 전 및 치료 후 쌍은 재발성(실패)으로 분류되고 유전자형이 다른 쌍은 재감염으로 분류됩니다.

3.11.4 말라리아 진단의 품질 관리 연구가 시작되기 전에 염색 기술, 염색 시간, 희석 및 데이터 보고와 같은 올바른 실험실 절차가 확립됩니다. 일상적인 말라리아 슬라이드(적어도 20개가 양성일 것임)의 맹검 재독이 수행되고 불일치가 검토될 것입니다.

0일과 42일 사이에 수집된 20개의 양성 슬라이드의 무작위 샘플에 대한 연구가 끝날 때 참조 기생충 실험실을 갖춘 외부 품질 관리가 예상됩니다.

3.11.5 항말라리아 약물 내성에 대한 분자 마커 현재 ACT에 대한 감수성 감소와 관련된 명확한 분자 마커는 없습니다. 따라서 우리는 현재로서는 ACT 저항성의 분자 마커를 연구할 것으로 예상하지 않습니다. 그러나 P. falciparum 게놈의 13번 염색체 영역은 ACT에 대한 반응으로 감소된 기생충 제거율과 관련이 있는 것으로 확인되었습니다28. 향후 5년 내에 아르테미시닌 내성의 추정 마커가 확인되면 이 연구의 FTA 카드는 분석을 위해 WWARN(World Wide Antimalarial Resistance Network)에서 사용할 수 있어야 합니다. 따라서 연구 종료 후 5년 동안 네덜란드 암스테르담 의료 센터에서 -70⁰C에 FTA 카드를 보관할 수 있는 권한과 저항의 분자 마커 결정을 위한 사용에 대한 허가는 정보에 입각한 동의서 양식에서 요청됩니다.

3.12 데이터 분석 3.12.1 데이터 관리 모든 사례 기록 양식(CRF)은 EpiData 3.1 소프트웨어(Odense, 덴마크)를 사용하여 매일 이중 입력되고(불일치 확인 포함) Stata(Stata Corporation, 미국) 통계 소프트웨어를 사용하여 분석됩니다. . 조기 치료 실패에 대한 중간 분석은 모든 참가자가 3일차에 도달하고 혈액 도말 결과를 사용할 수 있게 되면 수행됩니다. 이는 초기 치료 실패에 대한 비열등성 가설을 기각해야 하는지 여부를 조기에 평가하기 위함이다. 연구 분석이 끝나면 모든 CRF 및 기타 소스 데이터(동의서 양식, 실험실 등록, 스크리닝 양식 등)는 자본 수준에서 안전하게 저장됩니다. 데이터는 항말라리아제 내성에 대한 국제 모니터링을 위해 WWARN 데이터베이스에도 제출됩니다. CRF 사본은 암스테르담의 MSF-OCA에 최소 5년 동안 보관됩니다. 주임 조사관은 모든 선별 검사 양식, 증례 보고서 양식 및 완성된 피험자 식별 코드 목록을 안전한 장소에 보관할 책임이 있습니다.

3.12.2 분석 계획

• 연구 설명: 선별된 환자 수, P. falciparum 감염 환자 수, 다른 Plasmodium 종에 감염된 환자 수, 제외된 환자 수(및 가능한 경우 부적격 사유), 포함된 수, 무작위 및 분석 가능한 환자
• 연구의 유효성: 내부 및 외부 실험실 품질 관리에 대한 결과, 분석 불가능한 전체 환자의 % 및 전체 분석 불가능한 환자의 % 및 후속 조치에 대한 손실 %
• 포함된 환자의 특성: 연령, 성별, 키 대비 체중, 말라리아 예방약의 이전 섭취, 겨드랑이 온도, 기생충 밀도, gametocyte 운송, 헤모글로빈. 무작위화의 적합성을 테스트하기 위해 카이제곱 테스트를 수행합니다.
• 연구 종점 설명: 42일째 ETF, LCF, LPF 및 ACPR의 수. 유사한 결과가 42일째 효능과 비교하기 위해 28일째에 평가될 것이다.
• 부작용: 각 약물에 대한 연구에 포함된 모든 환자의 부작용 및 심각한 부작용의 비율;
• PCR 유전자형 분석: 분석된 샘플 수, 재발 및 재감염 수, 혼합 및 미확인 결과 수
• 효능 추정치: Kaplan-Meier 생존 분석 방법은 유전자형 조정 유무에 관계없이 사용됩니다. 철수, 후속 조치 실패 또는 재감염 환자는 당일 분석에서 검열됩니다. 기생충혈증이 재발했지만 PCR 결과가 누락되었거나 확인되지 않은 환자는 말라리아 도말 검사가 음성으로 판명된 마지막 방문에서 검열해야 합니다(그 시점에서 환자가 '치료'된 것으로 알려짐).
• 데이터 분석: 프로토콜별 분석 후 Kaplan-Meier 방법을 사용한 생존 분석. 위에 나열된 철회 이유 외에도 PCR 결과를 분류할 수 없거나 PCR 결과 실패가 P. vivax로 인한 재감염으로 인한 것으로 나타나는 경우 환자는 분석에서 철회된 것으로 간주됩니다. P. malariae 또는 P. ovale. 각 약물에 대해 28/42일, PCR-미교정 및 PCR-교정에서의 성공률 및 실패율의 누적 발생률; 조기 치료 실패, 후기 임상 실패, 후기 기생충 실패 및 28/42일에 적절한 임상 및 기생충 반응의 비율, 95% 신뢰 구간, PCR 비보정 및 PCR 보정이 계산됩니다. 3.12.3 연구 보고서 연구가 끝나면 연구 책임자는 연구와 그 주요 결과에 대한 보고서를 제출합니다. 이 보고서는 국가 말라리아 통제 프로그램 및 보건부와 공유됩니다.

연구 결과는 적절한 과학 회의에서 발표되고 동료 검토 저널에 게시될 가능성이 있습니다. 데이터는 항말라리아제 내성에 대한 국제 모니터링을 위해 WWARN 데이터베이스에도 제출됩니다.

연구 결과는 지역 사회 지도자 및 환자 회의에서 공유됩니다. 결과는 건강 클리닉에서 일반 언어로 표시됩니다.