Genetische achtergrond van patiënten met lage Von Willebrand-factorniveaus (LOVMIC)

Ondanks de afwezigheid van mutatie in het VWF-gen bij een aanzienlijk aantal personen met verlaagde VWF-waarden en ook het gebrek aan kennis over de verantwoordelijke mechanismen, trachtte deze studie de volgende doelen te bepalen:

• Evaluatie van de genetische achtergrond van het dilemma van een laag VWF-niveau en het identificeren van de genen buiten het VWF-gen die geassocieerd zijn met verlaagde VWF-niveaus.
• Evalueren van de correlatie tussen kandidaat-varianten en de bloedingsmanifestaties van patiënten.

Studie ontwerp:

Niet-farmacologische interventionele nationale monocentrische studie. Promotor: Fondazione IRCCS Ca' Granda Ospedale Maggiore Policlinico Coördinatiecentrum en patiëntenwervingseenheid: Afdeling Algemene Geneeskunde - Hemostase en Trombose - Angelo Bianchi Bonomi Hemofilie- en Trombosecentrum

Omgeving: polikliniek

De onderzoekspopulatie zal worden geselecteerd uit de doorverwezen volwassen patiënten/gezonde controles naar het A. Bianchi Bonomi Hemophilia and Thrombosis Centre in het Fondazione IRCCS Ca' Granda Maggiore Polikliniek.

Wervingsmethode:

Geselecteerde patiënten (op basis van de eerdere laboratoriumresultaten) zullen door artsen in het centrum via telefoongesprekken worden uitgenodigd om deel te nemen aan de studie. Ook zullen normale controles (leeftijd en geslacht overeenkomend met patiënten) in het onderzoek worden opgenomen. Gegevens met betrekking tot de gezonde controles zullen worden verkregen uit de beschikbare openbare database of worden verkregen door evaluatie van verzamelde monsters van de normale proefpersonen die zijn geselecteerd door het A. Bianchi Bonomi Hemophilia and Thrombosis Center.

Inschrijving, bezoek en bloedafname:

Nadat de patiënten hebben ingestemd met deelname aan het onderzoek en de geïnformeerde toestemming hebben ondertekend, worden 3 buisjes (elk 3,5 ml) van het bloedmonster afgenomen voor het uitvoeren van VWD-gerelateerde laboratoriumtesten (VWF-antigeen (VWF:Ag), VWF-ristocetine-cofactor ( VWF:RCo), Factor VIII-stollingsassay (FVIII:C)) en Whole-exome sequencing (WES). Daarnaast zal er routinematig een klinisch onderzoek worden uitgevoerd door gespecialiseerde artsen, volgens een Case Report Form (CRF) om de gegevens te verzamelen met betrekking tot leeftijd, geslacht, bloedgroep en klinische manifestaties, waaronder de International Society on Thrombosis and Haemostasis Bleeding Assessment Tool ( ISTH-BAT).

Genetische analyse:

• Genomisch DNA zal worden geëxtraheerd met behulp van het geautomatiseerde instrument van QIAGEN dat beschikbaar is in het centrale genetische laboratorium van het Fondazione IRCCS Ca' Granda Maggiore Polikliniek
• WES zal worden uitgevoerd op alle monsters met behulp van het NextSeq 2000-instrument in het centrale genetische laboratorium van het Fondazione IRCCS Ca' Granda Maggiore Polikliniekziekenhuis.
• De gegevens worden in beide gevallen en controles volgens dezelfde strategie geanalyseerd. Eerst zal het VWF-gen worden geëvalueerd. Vervolgens zal de analyse worden uitgebreid naar de andere genen waarvan eerder werd beschreven dat ze verband houden met VWF-niveauvariaties. Ten slotte zullen exome-gegevens worden overwogen.
• De associatie tussen VWF-niveaus en kandidaat-varianten zal worden beoordeeld.
• Alle analyses zullen worden uitgevoerd rekening houdend met de minor allel frequency (MAF), leeftijd, geslacht, ABO van varianten om te controleren op confounding.