Avansert immunologisk tilnærming i KOLS-eksacerbasjon (AIACE)

Hjelpestudie i sentrum av Genova:

For å undersøke i en undergruppe av pasienter, som deltar i AIACE-studien, evnen til PMBL til å indusere en Ig-respons, å modifisere NK-blodmønsteret og å modulere inflammatoriske parametere (f. CRP).

Materiale og metoder:

30 pasienter som ble registrert ved Respiratory Department ved Genoa University under AIACE-studien og dobbeltblindet tilfeldig behandlet med bakteriell lysat eller placebo, vil delta i denne tilleggsstudien.

Et ytterligere informert samtykke til å delta i denne laboratoriestudien vil bli bedt om til pasienten i tillegg til den allerede etiske prosedyren som er godkjent for AIACE-studien.

For å vurdere økningen av konsentrasjonen av spyttantistoffer, vil en prøve av spyttvæske (SF) samles inn på dag 0 ved bruk av Salivette (Starsted, Tyskland, brukt i henhold til produsentens instruksjoner) og oppbevares frosset til analysert. Deretter gjennomføres behandling med PMBL i ti dager. Etter tjue dagers hvile (dag 30), ved slutten av første behandlingskur (dag 90) ved begynnelsen og slutten av andre legemiddelkur (dag 180, 210) og ved slutten av studien (dag 360) , vil en SF-prøve bli samlet og lagret frossen.

I tillegg til AIACE-laboratorieprosedyren som allerede er godkjent, vil en ytterligere blodprøve (6 glassrør) tas for perifer NK-blodfenotyping og CRP-dosering.

Rensede NK-celler vil oppnås fra perifer blodprøve ved tidspunkt 0, 90 og 360 ved negativ seleksjon ved å bruke NK-celleisolasjonssettet (Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach - Tyskland) etter produsentens instruksjoner. NK-cellepopulasjonene vurderes for renhet, og bare de som homogent viser CD3-CD14-CD15-CD19- fenotype velges.

Celler oppnådd som beskrevet ovenfor vil bli analysert (tid t0) ved flowcytometri ved bruk av følgende mAbs: anti-CD3, anti-CD56, anti-NKp30, anti-NKp46, anti-NKp44, anti-NKG2D, anti-CD158B1/B2j, anti-KIR p70, anti-CD159A, anti-CD226 (Immunotech -Marseille, Frankrike).

For å vurdere effekten av PMBL på systemisk betennelse vil CRP bli evaluert på dag 0 90 og 360. Til slutt vil spesielle T-cellesubpopulasjoner, som regulatoriske T-celler, bli analysert på innsamlede prøver, sammen med konsentrasjonen av sirkulerende kjemokiner, cytokiner og betennelsesrelaterte molekyler ved bruk av en spesifikk immunkuler og flowcytometri.