Badanie bezpieczeństwa i immunogenności szczepionki Bacille Calmette Guerin (BCG).

Rekombinowane wirusy jako szczepionki.

Rekombinowane wirusy stosowane samodzielnie od kilku lat stanowią obiecujący system dostarczania szczepionek, szczególnie do indukowania komórkowych odpowiedzi immunologicznych8. Rekombinowany wirus koduje białko lub peptyd immunizujący. Immunizacja szczepionką z rekombinowanym wirusem ma miejsce, gdy komórki gospodarza pobierają i eksprymują zaszczepiony atenuowany wirus kodujący ochronny antygen. Wyrażane białko często ma natywną konformację, glikozylację i inne modyfikacje potranslacyjne, które występują podczas naturalnej infekcji. Rekombinowane szczepionki wirusowe mogą wywoływać zarówno przeciwciała, jak i cytotoksyczne limfocyty T, które utrzymują się bez dalszych immunizacji.

Wiele wirusów zostało zbadanych jako potencjalne szczepionki rekombinowane. Udana ogólnoświatowa eradykacja ospy prawdziwej poprzez szczepienie żywym wirusem krowianki wskazała krowiankę jako kandydata do zastosowania rekombinacyjnego. Uznanie w ostatnich latach, że niereplikujące się szczepy wirusa ospy, takie jak wektory MVA i ptasiej ospy, mogą być bardziej immunogenne niż tradycyjne replikujące się szczepy krowianki, zwiększyło atrakcyjność tego podejścia. MVA (zmodyfikowany wirus krowianki Ankara) jest szczepem wirusa krowianki, który był pasażowany ponad 570 razy przez komórki ptasie, jest niezdolny do replikacji w ludzkich liniach komórkowych i ma dobre wyniki w zakresie bezpieczeństwa. Został podany ponad 120 000 zaszczepionych w ramach programu zwalczania ospy prawdziwej, bez skutków ubocznych, pomimo celowego szczepienia grup wysokiego ryzyka. To bezpieczeństwo u ludzi jest zgodne z brakiem zjadliwości MVA w modelach zwierzęcych. MVA ma sześć głównych delecji genomowych w porównaniu z genomem rodzicielskim, co poważnie upośledza jego zdolność do replikacji w komórkach ssaków. Replikacja wirusa jest blokowana późno podczas infekcji komórek, ale co ważne, synteza białek wirusowych i rekombinowanych pozostaje nienaruszona nawet podczas tej nieudanej infekcji. Rekombinowany MVA z niedoborem replikacji był postrzegany jako wyjątkowo bezpieczny wektor wirusowy. Podczas testowania na modelach zwierzęcych wykazano, że rekombinowane MVA są niezjadliwe, ale ochronnie immunogenne jako szczepionki przeciwko chorobom wirusowym i nowotworom. Najbardziej przydatne dane dotyczące bezpieczeństwa i skuteczności różnych dawek rekombinowanej szczepionki MVA pochodzą z danych z badań klinicznych z rekombinowanym MVA wykazującym ekspresję szeregu epitopów CTL z antygenów przederytrocytowych Plasmodium falciparum połączonych z całkowitym antygenem w stadium przederytrocytarnym, trombospondyną Pokrewne białko adhezyjne (TRAP). Próby te dały w sumie 169 szczepień tym rekombinowanym MVA 49 szczepionym w Wielkiej Brytanii 38 szczepionkami z Gambii (w tym 20 dzieci w wieku 1-5 lat). Podano 6 dawek 1 x 10^7 pfu, 139 dawek 5 x 10^7 pfu, 6 dawek 1 x 10^8 pfu i 18 dawek 2,5 x 10^8 pfu, wszystkie bez poważnych skutków ubocznych.

Rekombinowany MVA kodujący antygen 85A

Antygeny wydzielane przez M. tuberculosis są uwalniane z aktywnie metabolizujących bakterii i są ważnymi celami odporności ochronnej. Antygen 85A jest głównym antygenem wydzielanym przez M. tuberculosis, który tworzy część kompleksu antygenu 85 (A, B i C). Kompleks ten stanowi główną część wydzielanych białek zarówno M.tb, jak i BCG. Bierze udział w wiązaniu fibronektyny w ścianie komórkowej i wykazuje aktywność mykolilotransferazy.

MVA85A indukuje zarówno epitop CD4+, jak i CD8+, gdy jest stosowany do immunizacji myszy. Kiedy myszy są szczepione BCG, a następnie otrzymują MVA85A jako dawkę przypominającą, poziomy indukowanych limfocytów T CD4+ i CD8+ są wyższe niż po podaniu samego BCG lub MVA85A.

Oceniamy bezpieczeństwo i immunogenność następujących 3 grup:

1. tylko BCG
2. sam MVA85A
3. Doładowanie BCG prime-MVA85A

BCG-BCG zapewnia grupę kontrolną dla BCG-MVA85A. W wielu krajach istnieje tradycja powtarzania szczepień BCG, a kryteria ponownego szczepienia różnią się w poszczególnych krajach.