循环胎儿细胞遗传分析无创产前诊断 21 三体 (ISETTRI21)

研究人员计划并开发了以下方法：首先使用 ISET（按上皮肿瘤细胞大小分离）技术从妊娠 7 至 12 周的孕妇血液中富集胎儿细胞。 对推测为胎儿来源的细胞进行显微解剖，随后使用 STR 标记进行基因分析，以验证其胎儿性质。 研究人员随后计划测试两种策略，以评估 21 号染色体的拷贝数。 第一个涉及用 CGH（比较基因组杂交）阵列分析单个胎儿细胞的 DNA。 事实上，我们的团队已经开发了一种将中期 CGH 方法应用于 ISET 分离的单个细胞的方法，在该方法中，我们能够证明从唐氏综合症胎儿的脐带血中分离出的单个胎儿细胞中 21 号染色体 DNA 的增加。 第二种策略将通过使用应用于单细胞的短串联重复序列 (STR) 的定量荧光 PCR 分析来实现。 将测试至少 5-8 个高度多态性的 21 号染色体特异性 STR 标记，以尽量减少称为等位基因丢失现象的影响，其中一个等位基因无法扩增，并最大限度地增加三等位信号的数量，以准确诊断二体性或 21 三体。

这项调查是与克拉玛的 Antoine Béclère 医院妇产科 - 生殖医学科合作进行的。 参与调查的女性将在侵入性检查（羊膜穿刺术）之前采集 20 毫升血样和宫颈子宫颈抹片检查。 血液样本将在收集后 3 小时内通过 ISET 方法进行处理，过滤器将在 - 20°C 下储存。 通过巴氏涂片获得的细胞将保存在适当的液体中，然后在内克医院的生化实验室通过 ISET 方法进行处理。 针对 21 三体 NI-PND 的滋养层细胞的分子分析将在盲法研究中进行。

发起人计划在盲法研究中使用 ISET 方法，包括 100 例 21 三体和 300 例核型正常的对照病例。 该研究将允许获得灵敏度高于 97% 且特异性高于 99%（IC 95% [70-100]）的结果。 验证将通过盲法研究的开始以及通过侵入性方法（羊膜穿刺术）和非侵入性方法获得的结果的比较来获得。