Účinnost metod hubnutí na délku života u metabolického syndromu

V 1. etapě studie provede screening 71 dospělých pacientů ve věku 35 až 65 let s T2D a hypertenzí pro RF. T2D byl léčen metforminem, sulfonylureou, agonisty GLP-1 (exenatid, liraglutid), glitazony v různých kombinacích; hypertenze byla léčena beta-blokátory, blokátory kalciových kanálů, diuretiky, inhibitory SGLT-2 (empagliflozin, kanagliflozin) v různých kombinacích. Zařazeni budou také pacienti se srdečním selháním (SS) v jejich lékařské dokumentaci a anamnéze se sníženou ejekční frakcí < 55 %; I-II stupně funkční klasifikace NYHA.

Kritéria zařazení: 1) písemný informovaný souhlas; 2) 35≤ věk <65 let; 2) jakékoli BMI a WC; 3) diagnóza T2D a hypertenze ≥3 roky a léčba nehormonálními konvenčními farmakologickými léky; 4) jakákoli hladina triglyceridů, cholesterolu, % tělesného tuku; 5) hubnutí na RF po dobu 30 dnů.

Kritéria vyloučení: 1) věk <35 nebo ≥65 let; 1) T2D závislý na inzulínu a nekontrolovaný vysoký TK; 2) pacienti užívající inhibitory gastrointestinální lipázy atd.; 3) přítomnost akutních infekčních onemocnění nebo exacerbace chronických onemocnění; 4) ejekční frakce <30 %; 5) anamnéza konzumace alkoholu >30 g/den během posledních 5 let; 6) malignita během posledních 5 let; těhotenství nebo laktace; selhání ledvin; dědičné choroby; nebo známá přecitlivělost na kteroukoli z testovaných látek.

Výsledky měření: Primární cílové parametry: ztráta hmotnosti, glykémie nalačno, hladina inzulínu v krvi, systolický/diastolický TK. Sekundární cílové parametry: krevní lipidy, minerální hustota patních kostí (HBMD) a EF.

Zásah. Účastníci dodržovali půst v sezóně RF. Striktně se drželi dvou zásad výživy během RF: 1) „bez krve, bez zápachu tuku“ což znamená „nejezte maso a nejezte tučná jídla“; 2) „Sehri time“ (jídlo konzumované před úsvitem) zahrnovalo pouze 1,5–2,0 sklenice vody a ovoce 80-100 g (jablko, datle a tomel). Pacienti skutečně dodržovali dietu, ve které jedli jedno jídlo denně – účastníci jedí během „iftarského času“ (jídlo konzumované po západu slunce). Účastníci také dodržovali chůzi alespoň 3 000 kroků denně, sexuální sebekontrolu.

Během 30denního období studie probíhá kombinace osobních rozhovorů a telefonních hovorů: základní/7denní/14denní a 30denní RF.

Ve 2. fázi studie bude zahrnovat celkem 150 dospělých pacientů s RS rozdělených do tří srovnávacích skupin: medikamentózní léčba, chirurgie a dietoterapie.

Design studie je prospektivní, protože vyšetřovatelé musí porovnávat TL před/po intervencích; studie nemusí být pozorovací studií. Kvůli studii budou nerandomizovaní pacienti rozděleni do každé skupiny na základě stejných výchozích charakteristik podle kritérií pro zařazení/vyloučení a včetně úprav výchozích a matoucích charakteristik.

Pacienti budou rozděleni do každé skupiny na základě rozhodnutí pacienta a dvou lékařů (chirurga a terapeuta), aby se předešlo riziku „zkreslení výběru“. Normalizace parametrů se zaměří na práci potřebnou k začlenění procesů do statistiky.

Kritéria zařazení: 1) písemný informovaný souhlas; 2) T2D≥3 roky s terapií snižující hladinu glukózy včetně inzulínu; 3) 35-55 let; 4) BMI≥27 kg/m2 pro obě pohlaví, pro asijské etnikum; 5) pokračující léčba antihypertenzní léčbou; 6) úbytek hmotnosti 15–20 % na začátku a dynamické sledování až 24 týdnů.

Všichni zahrnutí pacienti před náborem do studie dostávali standardní péči pro T2D a AH podle regionálních doporučení.

Kritéria vyloučení: T1D; <34 věk >56 let; nestabilní srdeční poruchy (srdeční selhání třídy IV podle New York Heart Association, refrakterní angina pectoris, nekontrolované arytmie, kritické onemocnění chlopní nebo těžká nekontrolovaná hypertenze); rychlost glomerulární filtrace <30 ml/min a/nebo dialýza během 14 dnů před screeningem; malignita během posledních 5 let; těhotenství nebo laktace; dědičné choroby; známá přecitlivělost na kteroukoli z testovaných látek.

1. skupina (n=50) dostává subkutánně semaglutid (GLP-1RA) 1 mg jednou denně 7 dní s perorálním empagliflozinem (SGLT-2i) 25 mg jednou denně, což je nová kombinace navíc ke standardní lékařské léčbě včetně antidiabetik, antihypertenzní, hypolipidemická, symptomatická léčba.

2. skupina (n=50) dostává operační metodu (laparoskopická MGB). Tito pacienti absolvují další předoperační vyšetření (krevní testy a elektrokardiografie, ezofagogastroskopie, ultrazvuk a další nezbytné standardní metody).

3. skupina (n=50) dostává dietu s velmi nízkým obsahem kalorií („analytická detoxikace“) včetně <100 kcal/den se zeleninou bez tuku (rajče/okurka) a příjmem soli (5–6 g/den). ), optimální fyzická aktivita a sexuální sebeovládání. Další výstupy programu jsou: a) využití vlastní tukové zásoby; b) kontrola endogenní intoxikace; c) opětovné použití přechodných metabolických substrátů.

Kombinace osobních rozhovorů a telefonních hovorů během studijního období.

Zdůvodnění velikosti vzorku. Odhadovaný rozdíl v léčbě bude nastaven na 10 % se standardní odchylkou 8 % a hranicí nadřazenosti 5 % (5=0,05) na základě oboustranného testování hypotéz. Při použití SPSS,Sample-Power,V23.0, počet hodnotitelných jedinců potřebných na léčebné rameno >32. Nejméně 150 pacientů bude vyšetřeno a přijato do srovnávací klinické studie.

Cílové body: Primární cílové parametry: snížení tělesné hmotnosti o 15-20 % oproti výchozí hodnotě; leukocytární TL. Sekundární koncové body: HbA1c; glykémie nalačno a 2hodinový orální glukózový toleranční test (OGTT); systolický/diastolický TK; lipidový profil; imunotest inzulínu v krvi; nežádoucí příhody.

Metody:

• Kritéria pro diagnostiku RS. Diagnóza RS (IDF-2005). Diagnóza T2D: HbA1c≥6,5 %, hladina plazmatické glukózy nalačno ≥7,0 mmol/l, nebo pacient dostává antidiabetickou léčbu [ADA, 2023]. [55] AH: systolický TK≥130 a/nebo jejich diastolický TK≥90 mmHg po opakovaném vyšetření nebo pacient dostává antihypertenziva.
• Obecná obezita bude měřena stanovením BMI (kg/m2). Abdominální obezita se posuzuje podle obvodu pasu pomocí standardů pro asijské národnosti podle IDF(2018). [56]
• Parametry tělesného složení včetně tukové hmoty, viscerálního tuku, beztukové hmoty, celkové tělesné vody, svalové/kostní hmoty, metabolického věku, bazální metabolické rychlosti a bioimpedance budou hodnoceny Tanita-MC-980MA Multi-Frequency Segmental Body -Analyzátor složení (TanitaCorp, Japonsko).
• Fyzická aktivita bude hodnocena jako počet kroků, které pacient ušel, jak je určeno individuálními krokoměry Hoffmann-La-Roche (Švýcarsko) nebo jiným individuálním digitálním systémem.
• Laboratorní studie. Na stejných krevních vzorcích standardní laboratoř kompletní krevní obraz, sedimentace erytrocytů, močovina, kreatinin, glukóza, elektrolyty, HbA1c, lipidový profil (celkový cholesterol, HDL/LDL, triglyceridy), celkové proteiny, koagulační profil, bilirubin, jaterní aktivity enzymů, ketolátek v krvi/moči.
• Test hormonů. Inzulín v séru nalačno metodou imunoanalýzy (Česká republika). Indexy homeostasis Model Assessment inzulinové rezistence (HOMA-IR) budou použity jako náhradní měření citlivosti na inzulin takto: HOMA-IR=((inzulín nalačno v nU/l)×(glukóza nalačno v mmol/l)/22,5) .
• Měření TL. TL bude měřena v poměru T/S s adaptací metod kvantitativní polymerázové řetězové reakce (q-PCR). Bude ukázána intraassay a interassay variabilita (CV) pro kvantitativní polymerázovou řetězovou reakci.

Vzorky krve pro měření TL budou odebrány do sterilního vakuového kontejneru a doručeny do laboratoře Genom a personalizované lékařské laboratoře (Nazarbayev University). DNA byla purifikována pomocí systému Promega Wisard DNA v -20 °C. Stručně řečeno, pro měření opakujících se kopií telomer budou přidány primery. V každém experimentu budou provedeny dva kontrolní vzorky, aby se umožnila normalizace mezi experimenty, a budou se provádět periodické experimenty reprodukovatelnosti, aby byla zaručena správná měření. Vypočítaný poměr je úměrný průměrné TL na buňku.

• Kvalitu života hodnotí mezinárodní dotazník BAROS Bariatric Analysis and Reporting Outcome System, EuroQoL.
• Analýza nákladové efektivity využívá jako výsledky klinické i EuroQol k odhadu přírůstkové nákladové efektivity tří alternativních intervencí. Analýza bere v úvahu specifické náklady (a) přímé lékařské náklady (včetně samotného zásahu a následné péče o stav), (b) nepřímé nelékařské náklady a (c) dodatečné nelékařské náklady. Náklady na lékařskou péči získává z ekonomických oddělení zúčastněných lékařských středisek identifikujících zdroje spotřebované během intervencí. Nepřímé náklady vznikají od pacientů. Vzhledem k omezenému časovému horizontu této studie bude nutné použít model k extrapolaci pozorovaného účinku léčby hodnocené v dlouhodobém horizontu.
• Konzultace specialistů probíhají před/během/po studiu 24 týdnů.
• Zobrazovací metody: Ultrazvuk vnitřních orgánů (GE Vivid 7 Ultrasound; GE Healthcare Worldwide USA, Michigan); EKG.

Interpretace dat. Primární hypotéza je, že pacienti léčení srovnávacími metodami by zaznamenali větší redukci hmotnosti a zlepšení v primárních/sekundárních koncových bodech; pak se skupiny vyberou k porovnání mezi sebou v souhrnu pomocí vícenásobné lineární regresní analýzy. Stanovit účinnost srovnávacích metod na základě principu: H0 (nulová hypotéza) jedna metoda se neliší od druhé/jiné; a Ha (alternativa) jedna metoda se liší od druhé/jiné.

Statistická analýza. Plán statistické analýzy zohledňuje nesoulad, ztrátu sledování a chybějící data. Vícenásobné logistické regresní modely, ANOVA/ANCOVA používá k predikci pravděpodobnosti specifických proměnných. Modely smíšených efektů nebo zobecněné odhadovací rovnice (GEE) vyhodnocuje se statistiky. Studentův dvoufaktorový t-test, OR (95 %, CI), Pearsonovo kritérium-χ2 bude použito k posouzení rozdílů v proporcích. Pro neparametrické se používá Mann-Whitney U-test a Kruskal-Wallisův test. Pearsonův nebo Spearmanův korelační koeficient (r). K určení závislých/nezávislých proměnných a ke kontrole zmatených diskusí mezi týmy používají data z literatury.

Regresní analýza se provádí pomocí nejmodernějších algoritmů strojového učení v kódu pythonu. Patří mezi ně aplikace algoritmů jako KNN, SVM a Random Forests. Kromě toho vyšetřovatelé použijí metodologii hlubokého učení pro vytvoření modelu pro testování testování hypotéz jako binárního klasifikátoru. Tento model učení využívá neuronovou síť, díky novým datům bude možné personalizovat efekty tří léčebných metod. Data studie jsou v tabulkách prezentována jako M±SE nebo medián (25-75%) na základě distribuce proměnných. Analýza přežití (Kaplan-Meierova nebo Coxova regrese) používá k posouzení úmrtnosti ve třech srovnávacích léčbách. Statistická analýza pomocí SPSS pro Windows, verze 28.0.

Etika. Příslušné národní a institucionální regulační orgány a etické komise schválí návrh studie a všichni účastníci poskytnou písemný informovaný souhlas. Studie bude realizována v Univerzitním lékařském centru společně s lékařskou fakultou Nazarbajevovy univerzity a Národní laboratoří Astana a Astana Medical University.