Vliv MI Paste Plus™ na Streptococcus Mutans a bílé skvrnité léze u fixní ortodoncie (MIPASTEORTHO)

Fixní ortodontické aparáty patří mezi nejběžnější léčby v současné stomatologii, nicméně výrazně modifikují orální prostředí a vytvářejí plak-retentivní oblasti, které podporují bakteriální kolonizaci. Závorky, ligatury a pomocné komponenty zvyšují obtížnost ústní hygieny a posouvají ekologickou rovnováhu zubního biofilmu ve prospěch acidurických a acidogenních organismů, jako je Streptococcus mutans (S. mutans). Opakovaná expozice zubního plaku nízkému pH inhibuje kyseliny citlivé druhy a podporuje S. mutans a laktobacily, jejichž metabolická aktivita produkuje kyselinu mléčnou a vede k demineralizaci skloviny. Klinicky se to projevuje jako bílé skvrnité léze (WSL), nejranější viditelné stadium zubního kazu. Takové léze se mohou objevit do jednoho měsíce po umístění aparátu, zatímco srovnatelná demineralizace u pacientů bez ortodontických zařízení obvykle vyžaduje šest měsíců nebo déle. WSL kompromitují estetiku a integritu zubu a mohou přetrvávat po ukončení ortodontické léčby, což činí včasnou prevenci nezbytnou.

Fluorid zůstává nejvíce ověřeným protikazovým činidlem a kombinace fluoridu s kasein fosfopeptid-amorfním fosforečnanem vápenatým (CPP-ACP) zlepšuje remineralizaci udržováním vápníku a fosfátu v biologicky dostupné formě. MI Paste Plus (GC Corporation, Japonsko) je topický krém obsahující 10 % CPP-ACP a 0,20 % fluoridu sodného (≈900 ppm F-), který uvolňuje ionty vápníku, fosfátu a fluoridu, které pronikají sklovinou, podporují remineralizaci a inhibují bakteriální ATPázovou aktivitu. Ačkoli slibné, jsou zapotřebí další rigorózně navržené, dostatečně silné randomizované klinické studie, aby se určilo, zda MI Paste Plus snižuje hladiny slinného S. mutans a předchází WSL během časné ortodontické léčby. Tento doktorský výzkumný projekt si klade za cíl zaplnit tuto mezeru.

Hlavními cíli je zjistit, zda denní používání MI Paste Plus mění počty slinného S. mutans po jednom a třech měsících fixní ortodontické léčby a zda předchází nebo snižuje incidenci a závažnost WSL během stejného období. Vedlejší cíle zahrnují posouzení vztahu mezi stavem rizika ústní hygieny a bazálními hladinami S. mutans nebo prevalencí WSL a zkoumání, zda věk, hygienické riziko nebo typ aparátu modifikují tyto výsledky. Nulové hypotézy uvádějí, že MI Paste Plus významně neovlivňuje hladiny S. mutans nebo vývoj WSL a že věk, úroveň hygieny a typ aparátu tyto výsledky nemodifikují.

Tato prospektivní, trojitě zaslepená, paralelní skupinová randomizovaná kontrolovaná klinická studie se bude konat ve dvou soukromých ortodontických poliklinikách v Tiraně, Albánii. Etické schválení bylo získáno od Ministerstva zdravotnictví Albánie (Zpráva č. 66/18, 4. dubna 2024) a od Universidad Cardenal Herrera CEU (12. května 2025). Všechny postupy jsou v souladu s Helsinskou deklarací, Dobrou klinickou praxí, GDPR, španělským LOPD a albánským zákonem o ochraně údajů.

Vzorek 200 pacientů (100 na skupinu) poskytne >90% sílu při α = 0,05 k detekci středních rozdílů mezi skupinami, s povolením 10% attritce. Způsobilí účastníci budou ve věku 5–45 let, začínající fixní ortodontickou léčbu, schopni dodržovat postupy a poskytující informovaný souhlas nebo assent. Vylučovací kritéria zahrnují systémové stavy ovlivňující slinný tok, použití antimikrobiálních látek do čtyř týdnů, alergie na mléčné bílkoviny nebo fluorid, rozsáhlé restaurace znemožňující hodnocení skloviny nebo neschopnost účastnit se kontrol.

Účastníci budou stratifikováni podle věku (≤15 nebo >15 let), rizika ústní hygieny (dobré nebo špatné) a typu aparátu, poté randomizováni 1:1 pomocí počítačem generovaného seznamu připraveného studijním statistikem. Skrytí alokace bude použito zapečetěných neprůhledných obálek a kódovaných nádob připravených nezávislým hygienikem. Testovací a placebové gely jsou identické ve vzhledu, textuře a balení. Účastníci, kliničtí hodnotitelé a mikrobiologové zůstanou zaslepeni až do uzamčení dat.

Testovací skupina bude aplikovat MI Paste Plus každý večer po třech měsících po čištění zubů. Kontrolní skupina bude aplikovat neaktivní bioadhezivní gel stejným způsobem. Všichni účastníci budou pokračovat v čištění zubů fluoridovanou zubní pastou. Dodržování bude monitorováno denními záznamy a vážením vrácených nádob.

Hodnocení probíhá na začátku (T0), po jednom měsíci (T1 ± 7 dní) a po třech měsících (T2 ± 14 dní). Klinické hodnocení WSL bude provedeno pomocí ICDAS. Zuby budou vyčištěny a vysušeny přibližně pět sekund pomocí stlačeného vzduchu pro zvýšení viditelnosti časných změn. Bude použito zubní operační světlo, zrcadlo a tupá sonda ke klasifikaci povrchů od 0 do 6. Povrchy s ICDAS 0 na začátku budou považovány za zdravé; ty, které se na kontrole stanou ICDAS 1 nebo 2, budou klasifikovány jako nové WSL. U povrchů s ICDAS 1–2 na začátku změny v čase budou indikovat progresi, stabilitu nebo zlepšení.

Zobrazování kvantitativní fluorescence indukované světlem (QLF™) pomocí Q-Ray Cam Pro (Inspektor Systems, Nizozemsko) doplní ICDAS. QLF detekuje demineralizovanou sklovinu jako tmavé oblasti kvůli ztrátě fluorescence a identifikuje aktivitu bakterií produkujících porfyriny jako červenou/oranžovou fluorescenci. Analýza bílých skvrn bude provedena v softwaru aktivací průvodce analýzou bílých skvrn. Systém automaticky generuje několik kvantitativních parametrů, včetně ΔF (% ztráty fluorescence), ΔF max, ΔF Average, plochy léze (WS Area) a metrik porfyrinové fluorescence (ΔR, ΔR max, ΔR area). Ačkoli všechny parametry podporují klinickou interpretaci, pouze ΔF (%) bude sloužit jako registrovaný výstupní měřítko. Záporné hodnoty ΔF indikují demineralizaci, zatímco změny v ΔF, WS Area a vzorcích ΔR v čase umožňují detekci nových lézí a posouzení, zda existující léze progresují, stabilizují se nebo remineralizují.

Stimulované vzorky slin budou odebrány nejméně dvě hodiny po jídle nebo čištění, chlazeny při 4 °C a zpracovány do 24 hodin. Sériové ředění bude naočkováno na TYCSB médium a inkubováno anaerobně po 72 hodin. Kolonie budou subkultivovány, identifikovány pomocí API 20 Strep a kvantifikovány pomocí standardních výpočtů CFU. Dva mikrobiologové budou nezávisle počítat plotny.

Primární výstupy zahrnují počty slinného S. mutans a přítomnost, počet a závažnost WSL na základě ICDAS a QLF ΔF hodnot v T1 a T2. Sekundární výstupy zahrnují index plaku, DMFT/DMFS a asociace s věkem, hygienickým rizikem a typem aparátu. Analýzy budou následovat princip záměru k léčbě. Budou použity vhodné parametrické nebo neparametrické testy a modely smíšených efektů. Chybějící data budou řešena pomocí vícenásobné imputace.

Všechna data budou zaznamenána na papírových CRF a dvojitě zadána do zabezpečené databáze. Kalibrace hodnocení ICDAS, zobrazování QLF a mikrobiologických postupů bude probíhat každých šest měsíců. Nežádoucí události se očekávají jako menší. Účastníci se mohou kdykoli odhlásit. Důvěrnost dat bude v souladu s GDPR, LOPD a albánskými předpisy o soukromí.

Přípravná fáze je z 90 % dokončena, včetně finalizace protokolu, pořízení vybavení, školení personálu a validace všech klinických a laboratorních postupů. Nábor bude probíhat od listopadu 2025 do června 2027, následován analýzou a diseminací. Výsledky budou předloženy do recenzovaných časopisů v ortodoncii, preventivní stomatologii a mikrobiologii a prezentovány na hlavních konferencích. Účastníkům bude poskytnuto shrnutí v běžném jazyce a anonymizované datové sady mohou být sdíleny na vyžádání v rámci dohod o sdílení dat.