Anti-gp100-Zellen plus ALVAC gp100-Impfstoff zur Behandlung von fortgeschrittenem Melanom

Hintergrund:

• Wir haben humane periphere Blutlymphozyten (PBLs) so manipuliert, dass sie einen T-Zell-Rezeptor exprimieren, der ein auf humane Leukozyten-Antigene (HLAA) 0201 beschränktes Epitop erkennt, das vom gp100-Protein stammt.
• Wir konstruierten einen einzigen retroviralen Vektor, der sowohl Alpha- als auch Infinity-Ketten enthält und den genetischen Transfer dieses T-Zell-Rezeptors (TCR) mit hoher Effizienz (mehr als 30 Prozent) vermitteln kann, ohne dass eine Selektion durchgeführt werden muss.
• In Co-Kulturen mit HLA-A 0201-positivem Melanom gp100:154-162 sezernierten TCR-transduzierte T-Zellen eine signifikante Menge an Interferon (IFN) (jedoch wurde keine signifikante Sekretion in Kontroll-Co-Kulturen mit Zelllinien beobachtet.

gp100:154-162 TCR-transduzierte PBL konnten -HLA-A 0201-positive Tumore effizient abtöten. Es gab wenig oder keine Erkennung normaler Fibroblastenzellen.

• Dieser TCR ist über 10-mal reaktiver mit Melanomzellen als das von T-Zellen erkannte Melanom-Antigen (MART)-1 TCR, das bei zwei Patienten mit metastasierendem Melanom eine Tumorregression vermittelte.
• In dieser Studie möchten wir unsere Hypothese testen, dass die Zugabe eines Anti-Tumor-ALVAC-Impfstoffs zu einer klinischen Tumorregression und einer Persistenz der übertragenen Zellen führt (wie es in Mausmodellen der Fall ist).

Ziele:

Hauptziele:

- Bestimmen Sie, ob die Verabreichung von Anti-gp100:154-162 TCR-modifizierten peripheren Blutlymphozyten, ALVAC Anti-Tumor-Immunisierung und Aldesleukin an Patienten nach einer nicht-myeloablativen, aber lymphoiddepletierenden präparativen Behandlung zu einer klinischen Tumorregression bei Patienten mit metastasierendem Melanom führt.

Sekundäre Ziele:

• Bestimmen Sie das In-vivo-Überleben von gentechnisch veränderten TCR-Zellen.
• Bestimmen Sie das Toxizitätsprofil dieses Behandlungsschemas.
• Bestimmen Sie, ob behandelte Patienten Anti-Maus-TCR-Antikörper entwickeln.

Teilnahmeberechtigung:

Patienten, die HLA-A 0201 positiv sind und 18 Jahre oder älter sind, müssen Folgendes haben:

• metastasierendes Melanom;
• zuvor erhalten und nicht auf Aldesleukin angesprochen haben oder danach wieder aufgetreten sind;
• Normalwerte für grundlegende Laborwerte.

Patienten haben möglicherweise nicht:

• gleichzeitige schwere medizinische Erkrankungen;
• jede Form von primärer oder sekundärer Immunschwäche;
• schwere Überempfindlichkeit gegen einen der in dieser Studie verwendeten Wirkstoffe;
• Kontraindikationen für die Verabreichung von hochdosiertem Aldesleukin.

Design:

• Durch Leukapherese gewonnene periphere mononukleäre Blutzellen (PBMC) (ca. 5 mal 10^9 Zellen) werden in Gegenwart von Anti-CD3 (OKT3) und Aldesleukin kultiviert, um das T-Zellwachstum zu stimulieren.
• Die Transduktion wird initiiert, indem ungefähr 10^8 bis 5 mal 10^8 Zellen einem Überstand ausgesetzt werden, der den anti-gp100:154-162-TCR-retroviralen Vektor enthält. Diese transduzierten Zellen werden expandiert und auf ihre Anti-Tumor-Aktivität getestet.
• Sobald gentechnisch veränderte PBMC gemäß den strengen Kriterien, die im Analysenzertifikat dargelegt sind, nachgewiesenermaßen biologisch aktiv sind, erhalten die Patienten ein nicht-myeloablatives, aber lymphozytendepletierendes präparatives Regime, bestehend aus Cyclophosphamid und Fludarabin, gefolgt von einer intravenösen Infusion von ex vivo tumorreaktivem, TCR-Gen-transduziertem PBMC plus intravenöses (i.v.) Aldesleukin (720.000 IE/kg alle 8 Stunden für maximal 15 Dosen). Etwa 2 Stunden vor der Zellinfusion werden die Patienten mit ALVAC-Virus immunisiert, das das Tumorantigen exprimiert. Die ALVAC-Immunisierung wird nach 2 Wochen wiederholt.
• Die Patienten werden vier bis sechs Wochen nach der Behandlung und dann monatlich für etwa 3 bis 4 Monate oder bis die Kriterien außerhalb der Studie erfüllt sind, einer vollständigen Beurteilung des Tumors mit körperlicher Untersuchung, Computertomographie (CT) von Brust, Bauch und Becken und klinischer Laboruntersuchung unterzogen.
• Die Studie wird unter Verwendung eines optimalen Phase-II-Designs durchgeführt, in das zunächst 21 auswertbare Patienten aufgenommen werden. Wenn bei 0 oder 1 der 21 Patienten ein klinisches Ansprechen auftritt, werden keine weiteren Patienten aufgenommen, aber wenn 2 oder mehr der ersten 21 aufgenommenen auswertbaren Patienten ein klinisches Ansprechen zeigen, wird die Rekrutierung fortgesetzt, bis insgesamt 41 auswertbare Patienten aufgetreten sind eingeschrieben.
• Das Ziel besteht darin, festzustellen, ob die Kombination aus hochdosiertem Aldesleukin, Lymphozyten-depletierender Chemotherapie, ALVAC-Immunisierung und Anti-gp100:154-162 TCR-Gen-modifizierten Lymphozyten mit einer klinischen Ansprechrate in Verbindung gebracht werden kann, die 5 Prozent ausschließen kann ( p0=0,05) zugunsten einer bescheidenen Rate von 20 Prozent partiellem Ansprechen (PR) plus vollständigem Ansprechen (CR) (p1=0,20).