Prebióticos para reducir la inflamación y criterios de valoración clínicos en la colitis ulcerosa (PRInCE-UC) (PRInCE-UC)

Este estudio de intervención dietética se llevará a cabo de manera doble ciego y cruzada, mediante el cual a 44 participantes con CU leve a moderadamente activa se les pedirá que consuman una dosis adecuada del prebiótico candidato (2'-fucosillactosa, un oligosacárido de la leche humana ) durante 28 días seguido de un período de alimentación de 28 días con un placebo equivalente (maltodextrina), o viceversa. Los prebióticos generalmente están disponibles en forma de bolsitas y se indicará a los participantes cómo tomarlos cada día.

Diarios de hábitos intestinales, puntuación de síntomas y estado de ánimo de los voluntarios: durante los períodos de suplementación y lavado, los voluntarios recibirán un diario para registrar sus hábitos intestinales y su estado de ánimo, uso de medicamentos y eventos adversos. Los voluntarios registrarán la cantidad de deposiciones por día, las puntuaciones de la escala de heces de Bristol y cualquier síntoma de hinchazón o malestar abdominal (calificado como ninguno, leve, moderado o grave). Se pedirá a los voluntarios que califiquen su flatulencia en una escala de cinco puntos (con una puntuación de 0 para "normal", +1 o +2 para más de lo habitual y - 1 o - 2 para menos de lo habitual). El estado de ánimo autoinformado se evaluará utilizando una escala de cinco puntos, registrándose la vitalidad, el estrés, la felicidad y el estado de alerta. También incluiremos cuestionarios sobre bienestar general y sueño. La actividad específica de la enfermedad validada se registrará utilizando el Índice de actividad de colitis clínica simple.

Índice de selectividad: El impacto de la alimentación prebiótica sobre el número relativo de Bifidobacterium, Roseburia, Faecalibacteria y Lactobacilli (beneficiosos) potencialmente promotores de la salud, sobre el número de comensales Eubacterium spp., Atopobium spp. y sobre la cantidad de miembros potencialmente perjudiciales de la microflora intestinal, a saber, Escherichia coli, proteolíticos Bacteroides spp. y el grupo Clostridium perfringens/histolyticum se determinará dentro de la microflora fecal. Además, la capacidad funcional del microbioma y el impacto en el fenotipo metabólico del huésped se determinarán mediante metabonómica basada en espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) 1H. Estos perfiles globales contienen información relacionada directamente con los procesos metabólicos microbianos, las interacciones transgenómicas y el metabolismo endógeno del huésped. Mediante la aplicación de este enfoque de biología de sistemas de arriba hacia abajo, se pueden caracterizar las respuestas bioquímicas del huésped y la microbiota a la exposición prebiótica.

Estudios de composición de la microbiota intestinal: se utilizará hibridación fluorescente in situ (FISH) para identificar y enumerar las principales bacterias anaeróbicas en los estudios en humanos, y la citometría de flujo permitirá un alto rendimiento y sensibilidad. Además, una evaluación cualitativa completa de la estructura comunitaria a través de un enfoque metagenómico utilizando secuenciación de alta capacidad (454 pirosecuenciación o similar) se aplicará.

Estudios de perfiles metabólicos basados ​​en espectroscopia de 1H-NMR: en esta propuesta, se aplicará la espectroscopia de 1H-NMR para caracterizar firmas metabólicas globales de muestras biológicas recolectadas durante los ensayos en humanos, utilizando experimentos estándar de RMN unidimensional. La microbiología intestinal y los datos metabonómicos se integrarán mediante técnicas de fusión de datos (por ejemplo, análisis de datos multibloque de mínimos cuadrados parciales bidireccionales) para generar comprensión mecanicista de los cambios a nivel del sistema y optimizar la extracción de información molecular clínicamente relevante. Se anticipa que este análisis proporcionará una medida de cómo la intervención basada en prebióticos durante el ensayo clínico ha afectado el metabonoma humano de una manera más cercana a la "salud".

Evaluaciones inmunológicas: se utilizarán muestras de sangre y heces para determinar los recuentos y fenotipos de células inmunitarias. Estos datos mostrarán el estado inmunológico de los pacientes en cualquier momento particular del ensayo, incluidos los problemas inflamatorios.

Subconjuntos de células inmunes que interactúan con poblaciones de células de presentación de antígenos: compararemos la presentación de antígenos por tipos de células diferenciadas (profesionales y estromales) y el grado en que interactúan con los subconjuntos de células T efectoras. Es probable que la presentación inicial del antígeno al sistema inmunológico difiera entre estos grupos y la cuantificación de estas interacciones mediante inmunohistología de fluorescencia de 4 colores proporcionará información mecanicista de estos procesos y la progresión del estado de la enfermedad de la CU.

Los datos recopilados serán perfiles de comunidades bacterianas, marcadores inmunológicos, mediciones de sangre/suero, cuestionarios de voluntarios, datos metabonómicos basados ​​en RMN, productos finales microbianos y síntomas del paciente. Estos datos serán en su mayoría numéricos y estarán en forma de hojas de cálculo de Excel, pero también incluirán archivos de datos de espectros, archivos de secuencias sin procesar y registros de diarios de alimentos (MS Word/REDCap). El software para el análisis de datos será SAS (software de análisis estadístico). Sólo la espectroscopia de RMN metabonómica y los archivos de datos de secuenciación microbiana generarán volúmenes de datos moderadamente grandes. Identificaremos estándares comunitarios para el formato de datos para su eventual depósito en repositorios de datos.