Integrazione di una miscela di proteine ​​del latte arricchite con leucina

Approccio sperimentale:

8 partecipanti saranno inclusi in questo studio. Ciascun partecipante consumerà l'integratore solo una volta in modo casuale durante tre visite separate e ci sarà circa 1 settimana tra ciascuna visita.

Pasto standardizzato:

Ai partecipanti verrà fornita una dieta standardizzata un giorno prima della sperimentazione. Quando si eseguono ricerche che coinvolgono il metabolismo umano è importante che i partecipanti siano testati in uno stato di peso stabile. Pertanto, i ricercatori stimeranno il dispendio energetico a riposo dei partecipanti utilizzando una formula di previsione ampiamente di riferimento, nota come equazione di Harris-Benedict. Questa formula tiene conto del sesso, della massa corporea, dell'altezza, dell'età e del livello di attività auto-riferito. Una volta calcolato il dispendio energetico a riposo, i ricercatori forniranno a ciascun partecipante una dieta standardizzata preconfezionata per il giorno prima dell'esperimento progettata per garantire un bilancio energetico sufficiente.

Scansioni dell'assorbimetria a raggi X a doppia energia (DXA):

Le scansioni DXA verranno utilizzate per determinare la composizione corporea dei partecipanti. Le procedure DXA utilizzano una piccola quantità di radiazioni per determinare la quantità di grasso, ossa e massa magra presenti nei partecipanti. La procedura dura circa sette minuti e coinvolge i partecipanti sdraiati fermi su un letto aperto mentre il sensore passa sul corpo dei partecipanti.

Prelievo di sangue arterializzato:

Tutti i prelievi di sangue verranno effettuati tramite una cannula endovenosa a permanenza. Questo metodo fornisce il minimo trauma al partecipante quando sono necessari prelievi di sangue ripetuti ed è conveniente per gli investigatori. In teoria, punture ripetute di aghi possono stressare il partecipante, aumentando così l'attività del sistema nervoso simpatico, causando così cambiamenti nel metabolismo. Inoltre, un altro potenziale inconveniente del prelievo di sangue venoso è l’influenza del metabolismo tessuto-specifico regionale, che rende quindi difficile interpretare il metabolismo dell’intero corpo sulla base dei metaboliti misurati nel sangue venoso. Pertanto, il prelievo di sangue arterioso è considerato il metodo ideale per gli studi metabolici. L'incannulazione arteriosa, tuttavia, può non essere etica a fini di ricerca a causa dell'aumento del rischio di complicanze, come danni alla parete arteriosa, trombosi e formazione di coaguli, che possono causare la morte. L'arterializzazione del sangue da campionare può essere ottenuta riscaldando la vena antecubitale superficiale o la vena dorsale della mano con una coperta riscaldante o una scatola termica specializzata. In questo modo, il flusso sanguigno aumenta a causa della vasodilatazione dei vasi nella muscolatura scheletrica delle braccia e delle anastomosi artero-venose nella pelle. A causa dell'aumento del flusso sanguigno e della trascurabile massa muscolare della mano e del gomito, il sangue venoso ha una composizione simile a un campione arterioso. Questo metodo è un surrogato ampiamente utilizzato per il prelievo diretto e sicuro di sangue arterioso. Una volta ottenuti, i campioni di sangue arterializzati verranno conservati e utilizzati nelle analisi. Gli investigatori utilizzeranno coperte riscaldanti (Theratherm Large Digital Moist Heat Pad [14" x 27"]) per arterializzare i campioni di sangue e un termometro a infrarossi (Nubee, NUB8380) per determinare la temperatura cutanea (45-68∘C) prima del prelievo il sangue del partecipante.

Le condizioni per protocollo includeranno:

Consumo di un pasto standardizzato la sera prima di ogni prova ed esercizio/attività costante 2 giorni prima di ogni prova Ci sarà circa 1 settimana tra le prove (periodi di washout) I campioni di sangue verranno analizzati per gli aminoacidi plasmatici, il glucosio e l'insulina.

Interventi sperimentali (ordine casuale):

1. I partecipanti consumeranno una colazione a basso contenuto proteico (10% dell'intervallo di distribuzione accettabile dei macronutrienti secondo il Food and Nutrition Board dell'Istituto di Medicina) e 2 ore dopo i partecipanti consumeranno 17 g di proteine ​​del siero di latte arricchite con leucina - proteine ​​del siero di latte idrolizzate - Miscela di caseina micellare (siero di latte:siero di latte idrolizzato:caseina 50:43:7) contenente 600 UI di vitamina D e 3,5 g di leucina
2. I partecipanti consumeranno una colazione ad alto contenuto proteico (25% dell'intervallo di distribuzione accettabile dei macronutrienti secondo il Food and Nutrition Board dell'Istituto di Medicina)
3. I partecipanti consumeranno una colazione a basso contenuto proteico (10% dell'intervallo di distribuzione accettabile dei macronutrienti secondo il Food and Nutrition Board dell'Istituto di Medicina)

Le proteine ​​sono state fornite da Covance Laboratories, Inc. di proprietà di Eurofins.

Le proteine ​​del siero di latte e la caseina micellare sono proteine ​​del latte derivate dal latte vaccino. I partecipanti consumeranno i 17 g di proteine ​​contenute in una barretta semisolida pari a ∼40 g, che è la dimensione di una tipica barretta per il recupero sportivo.

Dimensione del campione e analisi dei dati:

La dimensione del campione è stata determinata mediante un'analisi statistica della potenza (software G*Power 3.1, versione 3.1.9, 2014) che ha rivelato una grande dimensione dell’effetto. Questo studio è stato alimentato sulla base di studi precedenti. Pertanto, nelle analisi verranno utilizzati un totale di 8 partecipanti (n = 8/gruppo). Vedi sotto:

Analisi: A priori: Calcolare la dimensione del campione richiesta ANOVA: Misure ripetute, interazione intermedia Dimensione dell'effetto di input f = 0,5 α err prob = 0,05 Potenza (1-β err prob) = 0,95 Numero di gruppi = 3 Numero di misurazioni = 14 Corr . Tra il rappresentante misure = 0,5 Correzione della non sfericità ε = 1 Output Parametro di non centralità ƛ = 63 F critico = 1,6380186 Numeratore df = 26 Denominatore df = 78 Campione totale = 9 Potenza effettiva = 0,997