NEUROGENETICA ED EMODINAMICA DELL'AURA EMICRANICA E DEL FORAME OVALE PERVIOSO (PFOCUS)

Lo studio PFOCUS è un'indagine osservazionale prospettica caso-controllo progettata per esplorare i fattori biologici, vascolari e genetici associati alla coesistenza di emicrania con aura (MA) e forame ovale pervio (PFO). Le evidenze epidemiologiche indicano che gli individui con MA hanno un rischio maggiore di ictus ischemico anche in assenza di tradizionali fattori di rischio vascolari. Parallelamente, è stata costantemente riportata una maggiore prevalenza di PFO nei pazienti con MA, suggerendo un potenziale ruolo del PFO come modificatore del rischio cerebrovascolare. I meccanismi alla base di questa associazione non sono completamente compresi e potrebbero coinvolgere fattori oltre l'embolia paradossa, inclusa la disfunzione vascolare, l'emodinamica cerebrale alterata, l'attivazione piastrinica e la suscettibilità genetica.

L'obiettivo primario dello studio è confrontare la distribuzione delle varianti del gene NOTCH3 e dei polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) tra pazienti MA con PFO (PFO+) e pazienti MA senza PFO (PFO-). NOTCH3 codifica un recettore coinvolto nella differenziazione delle cellule muscolari lisce vascolari e nell'integrità dei piccoli vasi, ed è noto che varianti patogene causano l'arteriopatia cerebrale autosomica dominante con infarti sottocorticali e leucoencefalopatia (CADASIL). Le varianti di questo gene sono state anche associate a fenotipi di emicrania e alterazioni della funzione dei piccoli vasi cerebrali. Dato il ruolo delle vie di segnalazione Notch nella settazione cardiaca e nella chiusura del forame ovale fetale, la variazione genetica in questa via potrebbe contribuire sia alla suscettibilità alla MA che alla persistenza del PFO.

Gli obiettivi secondari includono: (1) la valutazione di varianti e SNP in geni aggiuntivi coinvolti nella segnalazione Notch, nello sviluppo cardiaco, nella regolazione vascolare e nell'ereditabilità del PFO; (2) la valutazione della relazione tra varianti genetiche e il grado di shunt destra-sinistra; (3) il confronto dei segnali microembolici cerebrali tra partecipanti PFO+ e PFO- utilizzando il rilevamento Doppler transcranico automatizzato; (4) la valutazione della reattività cerebrovascolare (CVR) e dell'autoregolazione cerebrale dinamica (dCA) utilizzando protocolli neurosonologici standardizzati; e (5) il confronto dei profili di funzione piastrinica tra i gruppi.

Ogni partecipante subisce una singola visita di studio. La raccolta dati include una valutazione clinica e demografica strutturata, una caratterizzazione dettagliata del fenotipo di emicrania (incluso le caratteristiche dell'aura, la frequenza degli attacchi e la coesistenza di emicrania senza aura), e la revisione dei risultati disponibili della risonanza magnetica cerebrale (MRI) quando presenti. La valutazione neurosonologica include il monitoraggio continuo Doppler transcranico per il rilevamento di segnali microembolici, la valutazione di CVR e dell'autoregolazione cerebrale utilizzando manovre di apnea e iperventilazione con analisi della funzione di trasferimento, e il rilevamento di shunt destra-sinistra con mezzo di contrasto utilizzando soluzione salina agitata. Vengono raccolti campioni di sangue periferico per l'analisi genetica e i test di funzione piastrinica. Viene eseguito il sequenziamento dell'intero esoma, con analisi successive focalizzate su un pannello predefinito di geni, inclusi ma non limitati a NOTCH3, NOTCH1, JAG1 e HTRA1. Gli studi di aggregazione piastrinica vengono condotti utilizzando metodi di laboratorio standardizzati.

La dimensione campionaria pianificata è di 240 partecipanti, equamente distribuiti tra i gruppi PFO+ e PFO-. Questa dimensione campionaria si basa sulla prevalenza attesa degli SNP di NOTCH3 e sulle differenze anticipate tra i gruppi. Le analisi statistiche includono il confronto delle frequenze alleliche e genotipiche, la valutazione dell'equilibrio di Hardy-Weinberg, analisi di linkage disequilibrium e confronti multivariabili dei parametri neurosonologici e di funzione piastrinica.

Integrando dati genetici, neurosonologici ed ematologici, lo studio PFOCUS mira a caratterizzare le potenziali differenze biologiche tra pazienti MA con e senza PFO e a contribuire a una migliore comprensione della vulnerabilità vascolare correlata all'emicrania.