제1형 당뇨병 억제를 위한 자가 수지상 세포 치료: 안전성 연구

이 연구에서 당뇨병 관련 합병증이나 다른 임상 병리를 나타내지 않고 인슐린 대체가 필요한 제1형 당뇨병이 있는 지원자는 먼저 완전한 물리적, 생화학적 및 면역학적 평가를 받게 됩니다. 단핵구 유래 자가 수지상 세포는 백혈구 성분채집술 후 얻을 수 있습니다. 수지상 세포는 안티센스 올리고뉴클레오타이드로 체외에서 처리되고 차후 체내 췌장의 물리적 위치에 가장 가까운 부위로 피내 투여를 위해 분취액으로 동결보존됩니다. 수지상 세포 백신에 대한 생리학적, 생물학적 및 면역학적 반응은 시험 기간 동안 평가될 것입니다. 첫 번째 지원자 그룹은 체외 치료 없이 자가 수지상 세포를 투여받게 되며(7/15) 두 번째 그룹은 iDC를 투여받게 됩니다(8/15). 수지상 세포 백신과 관련된 독성 또는 부작용의 증거가 없고 FDA 및 IRB 승인이 있는 경우에만 우리는 새로운 발병 환자의 혈당 개선 및 자가 면역 역전에서 대조군 DC와 iDC의 효능을 비교하는 새로운 연구를 시작할 것입니다.

현재 상당한 부작용이 있는 인간화 항CD3 항체 외에 새로 발병한 제1형 당뇨병을 역전시킬 수 있는 다른 방법은 없다. 이러한 연구는 자가 면역 질환을 억제하고 임상 과정 초기에 역전시키기 위해 자가 수지상 세포 이식을 사용한 최초의 연구가 될 것입니다.

우리는 CD40, CD80 및 CD86 공동 자극 분자의 1차 전사체를 표적으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오티드로 체외 처리된 자가 수지상 세포의 안전성을 확인할 것을 제안합니다. 당뇨병.

성격 특성과 정서적 안정은 다른 의료 집단(예: 크리스텐슨 외, 2002; Dew 등, 2001). 이 프로토콜을 준수하는 경우(예: 연구에 남아 있는 경우) 이 작은 표본이 결과에 상당한 영향을 미치고 치료 자체가 기분에 영향을 미칠 수 있으므로 기준선에서 성격 특성을 평가하고 연구 기간 동안 기분을 모니터링합니다.

2.2 연구의 의의: 우리는 이 접근법에 대해 어떠한 안전 문제도 예상하지 않지만 이것이 면역 조절 요법이라는 점을 감안할 때 모든 수준에서 주의해야 합니다. 최소한 NOD 마우스에서 iDC로 관찰한 성공이 최근 진단된 면역조절 T 세포의 유병률 증가와 함께 정상혈당증을 회복하거나 혈당 조절을 개선하기 위한 다른 프로토콜에 결국 적응될 수 있는지 여부에 대한 데이터를 얻을 수 있습니다. 인간.

3.0 연구 설계 및 방법

3.1 약물/기기 정보 3.1.1 자가 수지상 세포(대조 수지상 세포): 이들은 각 환자의 백혈구성분채집술 제품에서 파생된 세포입니다. 백혈구 성분채집 제품은 미성숙 수지상 세포를 얻기 위해 Elutra/AastromTM 세포 용출 시스템(첨부된 SOP # CPL-0158 및 CPL-0166 참조) 내부에서 처리됩니다. 이러한 절차를 거친 최종 자가 조직 제품을 제어 수지상 세포라고 합니다.

3.1.2 자가 면역 조절, 당뇨병-억제 수지상 세포(iDC): 당사는 "면역 조절 수지상 세포; iDC"로 명명하는 제어 수지상 세포의 당뇨병 억제 구체예를 다루기 위해 FDA에 IND 신청서(첨부)를 제출했습니다. IND는 CD40, CD80 및 CD86 공동 자극 분자의 1차 전사체를 표적으로 하는 포스포로티오에이트 변형 올리고뉴클레오티드로 제어 수지상 세포를 처리하는 것을 다룹니다. 대조군 DC 및 올리고뉴클레오티드-처리된 수지상 세포(iDC)는 이 제안에서 연구 세포 생성물이다.

3.1.3 백혈구 성분채집 장치: Fenwal CS3000 Plus 세포 수집기 또는 이에 상응하는 장치로 대구경 이중 루멘 카테터를 말초 정맥 접근로로 사용하여 세션당 총 처리량은 약 10-12리터입니다. 장치 및 그 등가물은 정제된 백혈구를 얻기 위해 여기에 설명된 절차에 대해 FDA 승인을 받았습니다. 피츠버그 중앙 혈액 은행과 계약을 맺은 백혈구 성분채집술 경험이 있는 직원이 이러한 절차를 수행합니다.

3.1.4 심리적 측정: NEO-FFI는 성격의 5가지 요소 이론(신경증, 외향성, 개방성, 친화성 및 성실성)을 기반으로 하는 60개 항목의 종이 및 연필 설문지입니다. 이 연구를 위해 우리는 신경증과 성실성 척도를 검토할 것입니다. Beck Depression Inventory, 2nd edition(BDI-2) 및 Beck Anxiety Inventory(BAI)는 각각 21개 항목의 종이 및 연필 설문지로 정신과 및 의료 집단에서 널리 사용되었습니다.

3.2 연구 설계 및 방법 3.2.1 연구 설정/위치 치료 전, 치료 주기 및 치료 후 환자의 전신, 생리학적 및 면역학적 모니터링은 UPMC 건강 시스템(MUH- CTRC)는 이 연구의 공동 조사자 의사와 CTRC 간호사의 감독하에 진행되었습니다. 피험자는 MUH-CTRC 또는 피츠버그 대학 암 센터(UPCI) 또는 피츠버그 중앙 혈액 은행(각 환자에게 가장 편리한 위치에 따라 다름)의 외래 환경에서 백혈구 성분채집술을 받게 됩니다. MUH-CTRC에서 외래환자 환경에서 연구 수지상 세포를 받음; MUH-CTRC에서 나머지 테스트 및 절차를 거칩니다. 피험자는 위에서 설명한 위치에서 약 16번의 방문을 하게 되며 각 방문은 해당 특정 방문에서 수행되는 절차에 따라 약 2-4시간 지속됩니다. 각 주제에 대한 모든 결과는 UPCI 외래 진료소에서 매주 열리는 회의에서 지속적인 방식으로 제시되고 논의될 것입니다. 피험자는 수지상 세포 투여 주기 동안 모니터링됩니다. 각 수지상 세포 투여 후 9주 동안 매주 한 번, 나머지 기간 동안 한 달에 한 번(부록 섹션 6.8의 도식 만화 참조).

3.2.3 자가 대조군 수지상 세포 백신 준비 자가 DC는 백혈구 성분채집술 제품에서 파생된 단핵구에서 생성됩니다. 백혈구성분채집술은 다음 위치 중 하나에서 수행됩니다: 1) MUH-CTRC; 2) UPCI 백혈구 성분채집술 단위; 또는 3) 피츠버그 중앙혈액은행의 시내 위치. 이 제품은 연구에 참여하는 간호사가 Shadyside의 Hillman Cancer Center 내에 위치한 IMCPL로 손수 운반할 것입니다. 조달 시점에 백혈구성분채집술 직후 샘플은 등록 시 환자에게 할당된 것과 동일한 코드를 사용하여 간호사가 코드화합니다. IMCPL에서 단핵구는 폐쇄형 ELUTRA 시스템에서 용출에 의해 분리됩니다. 단핵구는 DC를 생성하기 위해 IL-4 및 GM-CSF의 존재 하에 폐쇄된 Aastrom Replicell 시스템에서 배양될 것입니다. 배양 6일째에 DC를 수확하고 생존력과 순도를 확인합니다. 새롭게 생성된 DC의 분취량은 제어 DC 백신 준비에 사용되는 반면, 나머지 DC는 멸균 냉동 바이알에 분주되고 후속 백신의 준비를 위해 냉동보존됩니다. 각 전달에 대해 1 x 10 7 개의 생존 가능한 대조군 수지상 세포 또는 iDC(아래에 설명됨)를 포함하는 백신을 준비하기 위해 계산했습니다(1 x 10 7 수지상 세포로 정의된 하나의 치료는 해부학적으로 췌장에 근접한 4개의 피내 부위에 주입됨). 총 ~5 x 107개의 미성숙 수지상 세포가 필요합니다. 투여용 백신 출시 전에 테스트를 위해 DC의 추가 분취량이 필요할 것이기 때문에 이것은 최소 세포 수 추정치입니다. 세포는 UPCI에서 인간 치료에 사용되는 세포 제품에 대해 IMCPL이 일상적으로 수행하는 대로 생존력, 무균성(박테리아 호기성 및 혐기성 배양 및 그람 염색), 내독소 수준 및 마이코플라스마에 대해 테스트됩니다. 각 백신에 대해 DC를 수확하고, 계수하고, PBS에서 2.5 x 106 세포/mL의 분취량으로 각 분취량과 함께 조정하고 향후 피내 투여를 위해 1mL 투베르쿨린 주사기에 분배합니다.

3.2.4 올리고뉴클레오타이드-처리된(당뇨병-억제) iDC 백신 제조 제어 DC 생성과 동일한 절차를 사용하여 GM-CSF 및 IL-4가 동시에 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 포함하는 iDC 제제를 생성할 것입니다. DC progenitors에 추가됩니다. 전구체는 SOP # CPL-0170(부록)에 따라 3.3μM의 최종 농도로 각각의 안티센스 올리고뉴클레오티드로 생체외에서 처리될 것이다. 배양 6일째에 DC를 수확하고 생존력과 순도를 확인합니다. 배양 배지에서 남아있는 올리고뉴클레오티드를 제거하기 위해 광범위하게 세척한 후, iDC는 위와 동일하게 처리되고, 투여 분취량으로 분배되며, 각 분취량은 향후 투여를 위해 냉동보존됩니다.

3.2.5 대조군 및 iDC 백신 안전성 백신은 섹션 4.0-4.1에 설명된 기준을 충족하는 확립된 1형 당뇨병 환자에게 준비 및 투여됩니다. 수지상 세포 백신은 환자 치료를 위해 생성된 세포 제품에 대한 FDA 권장 사항을 준수하는 cGMP 시설인 IMCPL에서 생산될 것입니다. 항상 샘플과 세포 제품은 백혈구성분채집 시 할당된 동일한 무작위 생성 코드로 식별됩니다.

3.2.6. 안전성 평가: 처음에 당뇨병이 있는 15명의 환자(18-35세)가 CHP GCRC에서 대조 수지상 세포 백신(7/15 개인) 또는 iDC(8/15 개인)를 받도록 무작위 배정됩니다. 무작위화는 SAS 통계 패키지용으로 개발된 매크로(SUGI26)를 사용하여 수행됩니다. SUGI26은 기준선 적응 무작위화 절차의 수정이며 범주형 공변량에 대한 여러 치료 그룹 간의 불균등 할당 비율을 허용합니다.

무작위화된 환자를 각각의 치료 그룹으로 확립한 후, 환자는 2개의 수지상 세포 구체예(대조군 DC 또는 iDC) 중 하나를 받을 수 있다. 이 환자들은 섹션 3.2.1.1과 도식 만화(부록, 섹션 6.8 참조)에 설명된 시간에 피내로 1 x 107개의 수지상 세포(췌장에 해부학적으로 근접한 4개의 별개의 부위에 2.5 x 106개의 4회 주사)를 받게 됩니다. ) 8주의 기간 동안 2주 간격으로 총 4번의 백신 투여. 투여 당, 우리는 위의 물리적 위치 위 수직으로 전방 복벽 내부에 4개의 고유한 피내 주사 부위를 지정합니다. 이 4개 사이트는 3-4평방인치의 사분면 내에 있습니다. 세포는 4개의 개별 주사 부위 각각에서 피부의 융기된 "수포" 아래에 있는 27g-1/2 바늘에 부착된 투베르쿨린 주사기에 의해 전달됩니다. DC 수용자에서 첫 번째 백신 주기 이후에 3등급 또는 4등급 독성이 관찰되지 않으면 계획대로 연속 접종이 이루어집니다. 용량 제한 독성은 다음을 제외하고 2등급 이상으로 정의됩니다. 오한, 불쾌감 및 열은 용량 제한으로 간주되지 않습니다. 모든 4등급 독성은 림프구 감소증을 제외하고 용량 제한이 있습니다. 치료의 심각한 부작용으로부터 환자를 보호하기 위해 섹션 3.3.2에 설명된 대로 중지 규칙을 준수합니다. 아래에. 백혈구성분채집술 절차에 따라 환자는 정상혈당증에 대해 모니터링되고 필요한 경우 정상혈당 수준을 유지하기 위해 필요에 따라 인슐린이 투여됩니다. 혈당은 또한 각각의 DC 투여 절차의 마지막에 모니터링될 것이고, 필요한 경우 정상혈당을 회복시키기 위해 인슐린이 투여될 수 있다.

3.2.7 용량 제한 독성:

다음은 용량 제한 독성(DLT's)으로 간주됩니다. 이러한 독성이 자가 수지상 세포 백신 투여와 관련이 있다고 생각되는 경우, 개별 피험자는 즉시 연구에서 제외되고 추가 주사는 제공되지 않습니다.

• ≥ 등급 2 이상의 기관지 경련,
• ≥ 2등급 이상의 알레르기 반응 또는 전신 두드러기,
• ≥ 당뇨병 이외의 자가면역질환 2등급 이상,
• ≥ 백신 또는 DTH 테스트로 인한 2등급 주사 부위 반응,
• ≥ 3등급 또는 4등급 혈액학적 및 비혈액학적 독성
• 수지상 세포 백신 투여 후 5일 이내에 해결되지 않는 2등급 독성
• 투약 지연 > 4주

치료는 다음과 같은 이유로 중단될 수 있습니다.

• 감염성(박테리아/바이러스) 질병의 증거를 포함하여 자가 수지상 세포 백신의 추가 투여를 방해하는 병발성 질병
• 용납할 수 없는 부작용,
• 환자가 연구를 중단하기로 결정하거나
• 환자 상태의 일반적이거나 특정한 변화는 조사자, 간호사 또는 주치의(들)의 판단에 따라 환자를 추가 치료에 받아들일 수 없게 만듭니다.

3.3 데이터 수집 및 통계적 고려 사항 3.3.1 일반적인 고려 사항 이것은 CD40, CD80 및 CD86 동시 전사체의 1차 전사체를 표적으로 하는 포스포로티오에이트 변형 안티센스 올리고뉴클레오티드로 체외 처리된 자가 수지상 세포를 기반으로 하는 당뇨병 억제 수지상 세포 백신 투여의 안전성과 타당성을 평가하기 위한 안전성 시험이 될 것입니다. 자극 분자. 백신은 피내 투여되며 각 백신에는 1 x 107개의 자가 수지상 세포가 포함됩니다. 각 적격 피험자에게 총 4개의 백신이 전달됩니다. 충분한 수의 DC를 확보하기 위해 백혈구 성분채집술을 수행할 것입니다(첫 번째 백신 접종 14일 전).

이 시험은 효능 시험에서 세포 백신에 대한 추가 연구를 보장할 수 있을 정도로 독성 비율이 허용 가능하도록 낮도록 설계되었습니다.

4.5.1 임상시험 모니터링

4.5.1.1 심각한 부작용 보고(SAE)

이상 반응: 일반적으로 모든 이상 반응은 발생 후 24시간 이내에 기록되어 안전 담당자, PI 및 DSMB에 전달됩니다. 안전 담당관은 DSMB가 비상 회의에서 만나야 하는지 여부를 결정할 것입니다. 심각하지 않은 부작용 보고서는 DSMB 회의 후 24시간 이내에 IRB에 제출됩니다. DSMB의 연례 보고서와 최종 보고서는 회의 후 48시간 이내에 IRB와 FDA에 제출됩니다.

심각한 부작용 보고(SAE)

모두(SAE)는 표준 독성 시트에 기록되고 FDA, IRB, DSMB 안전 책임자, 수석 연구원(Dr. Trucco) 및/또는 공동 조사자(Drs. Finegold, Whiteside 또는 Giannoukakis) 발생 후 24시간 이내. 치료 중 예기치 않게 악화되는 모든 치료 관련 심각한 이상 반응 및 기존의 의학적 상태는 기록되고 바로 위에 설명된 대로 보고됩니다(DSMB, DSMB 안전 책임자, PI, FDA, IRB). 30일 이후에 발생하고 제어 또는 iDC 관리와 관련될 가능성이 합리적으로 높은 모든 심각한 부작용 또는 사망은 사건 발생 후 24시간 이내에 안전 책임자, FDA 및 전체 DSMB에 보고됩니다. 마지막 제어 DC 또는 iDC 투여 후 삼십(30)일 이내에 발생하는 모든 심각하거나 부작용 또는 사망은 동일하게 보고됩니다. 안전 책임자는 SAE 발생 후 24시간 이내에 전체 DSMB 회의를 소집합니다. DSMB 보고서는 SAE 발생 후 48시간 이내에 IRB와 FDA에 제출됩니다.

심각함은 21 CFR 312.32(a)에 설명된 대로 정의됩니다.