Terapeutyczny efekt kwasu ursodeoksycholowego w funkcjonalnej niestrawności

Pacjenci z dyspepsją czynnościową będą rekrutowani i badani pod kątem włączenia do badania. Uczestnicy zostaną poproszeni o nieprzyjmowanie inhibitorów pompy protonowej, leków wpływających na perystaltykę żołądka i NLPZ oraz doustnych środków antykoncepcyjnych przez czternaście tygodni. Najpierw zaprzestaną codziennego przyjmowania PPI i NLPZ przez dwa tygodnie, następnie przez cztery tygodnie będą przyjmować placebo lub UDC, po dwie dawki dziennie podczas obiadu i kolacji. Następnie nastąpi czterotygodniowy okres wypłukiwania i ponownie cztery tygodnie przyjmowania UDC lub placebo. Pacjenci otrzymają dzienniczek, w którym codziennie przez 14 tygodni opisują swoje objawy/dyskomforty. Wszyscy uczestnicy i badacz będą ślepi na naturę (UDC lub placebo) pigułek. Losowa kolejność, w jakiej dany pacjent otrzymuje swoje pigułki, została ustalona przez aptekę UZ Leuven i jest również nieznana badaczowi (podwójnie ślepa próba). W drugim, czwartym, szóstym, ósmym, dziesiątym i dwunastym tygodniu przeprowadzimy rozmowę telefoniczną z pacjentami, aby omówić ich objawy/dyskomforty.

W czwartym i dwunastym tygodniu pacjenci przyjdą do szpitala na jeden dzień po całonocnym poście. Najpierw proszeni są o wypełnienie zestawu kwestionariuszy dotyczących dolegliwości fizycznych, depresji, lęku (zaburzeń), bólu/choroby, świadomości ciała/interoceptywnej, traumy/znęcania się i osobowości oraz o oddanie próbki kału, którą pobrali w ciągu dnia zanim. Próbka kału zostanie wykorzystana do oceny mikroflory przewodu pokarmowego u pacjentów z FD. Następnie zostaną pobrane dwie próbki krwi w celu oceny parametrów czynnościowych wątroby i syntezy kwasów żółciowych oraz zostanie wykonana endoskopia. Wszystkie endoskopie zostaną wykonane przez doświadczonego endoskopistę (Jan Tack) oraz dziewięć biopsji dwunastnicy (2 biopsje na raz) (Radial Jaw™3 z igłą; średnica zewnętrzna 2,2 mm; Boston Scientific, 302 Parkway, Global Park, Heredia, Kostaryka ) zostanie uzyskany. Aby zmierzyć oporność przeznabłonkową in vitro, zostaną zbadane 3 biopsje przy użyciu przystosowanego systemu komór mini-Ussinga. Po zrównoważeniu błona śluzowa tkanki zostanie poddana działaniu 4 kDa FITC-dekstranu jako miary przepuszczalności okołokomórkowej. Próbka zostanie pobrana ze strony błony surowiczej w ciągu 2 godzin w odstępie 30 minut. Stężenie fluoresceiny będzie następnie mierzone za pomocą fluorescencyjnego czytnika płytek. Ponadto dwie biopsje zostaną użyte do ekstrakcji mRNA i późniejszej syntezy cDNA. To cDNA zostanie użyte do pomiaru ekspresji genów receptorów kwasu żółciowego za pomocą RT-PCR w czasie rzeczywistym. Ponadto jedna biopsja zostanie przygotowana do badań immunohistochemicznych, a dwie do analizy Western blot w celu zmierzenia zmian w dystrybucji/ekspresji białek receptora kwasu żółciowego. Zostanie pobrana jedna biopsja w celu zbadania zmian ultrastrukturalnych za pomocą transmisyjnej mikroskopii elektronowej.

Po endoskopii cewnik aspiracyjny zostanie umieszczony w dwunastnicy. Pozycja cewnika zostanie krótko sprawdzona za pomocą fluoroskopii (zwykle 2-3 sekundy, ale nigdy nie dłużej niż 15 sekund). Po umieszczeniu cewnika mocuje się go do brody badanego i prosi się go o siedzenie na krześle przez pozostałą część eksperymentu. Przez godzinę, co 15 minut, na czczo będą pobierane płyny z dwunastnicy. Następnie cewnik manometryczny o wysokiej rozdzielczości (HRM) zostanie umieszczony w dnie żołądka w celu pomiaru ciśnienia wewnątrzżołądkowego, a rurka perfuzyjna (OD 2 mm) zostanie wprowadzona przez nos i umieszczona w żołądku. Po umieszczeniu cewników mocuje się je do brody badanego i prosi się go o siedzenie na krześle przez pozostałą część eksperymentu. Po okresie stabilizacji wynoszącym 15 minut rozpocznie się infuzja dożołądkowa napoju odżywczego (Nutridrink, Nutricia; 630 KJ, 6 g białek, 18,4 g węglowodanów i 5,8 g tłuszczów na 100 ml) ze stałą prędkością 60 ml na minutę ( określony przez zautomatyzowany system wykorzystujący pompę perystaltyczną). Ciśnienie wewnątrzżołądkowe będzie mierzone za pomocą 36-kanałowego systemu do manometrii o wysokiej rozdzielczości, poprzez sondę do manometrii wewnątrzżołądkowej. W odstępach 1-minutowych badani będą proszeni o ocenę stopnia nasycenia za pomocą graficznej skali ocen, która łączy słowne deskryptory w skali ocenianej od 0 do 5. W 5-minutowych odstępach ochotnicy będą proszeni o wypełnienie kwestionariusza VAS dla 11 objawów dyspeptycznych. Wlew dożołądkowy zostanie zatrzymany, gdy tylko ochotnicy uzyskają maksymalny wynik jednego z 11 objawów w nadbrzuszu lub gdy osiągną wynik 5 w ocenie sytości. Po 10 minutach cewniki zostaną odłączone i usunięte. Po infuzji napoju odżywczego płyny z dwunastnicy będą pobierane co 15 minut przez 1,5 godziny w stanie po posiłku. Na koniec ostatni cewnik jest usuwany i ochotnik może iść do domu.