Biomarcadores em amostras de tecido de pacientes com sarcoma de Ewing

OBJETIVOS:

• Descrever o espectro de polimorfismos de microssatélites GGAA em loci específicos em DNA genômico preparado a partir de espécimes de tumor de sarcoma de Ewing.
• Determinar se há diferenças nos polimorfismos de microssatélites GGAA no DNA genômico preparado a partir de espécimes de tumor de sarcoma de Ewing em comparação com o DNA genômico normal europeu e africano não afetado.
• Determinar se os polimorfismos de microssatélites GGAA em loci específicos no DNA genômico preparados a partir de espécimes de tumor de sarcoma de Ewing se correlacionam com o resultado da doença em pacientes tratados no protocolo COG AEWS0031.
• Determinar se a amplificação de todo o genoma introduz alterações nos microssatélites GGAA em comparação com o DNA genômico não amplificado.

ESBOÇO: A PCR genômica é usada para amplificar os microssatélites nos promotores NR0B1 e GSTM4. Além de determinar o tamanho do microssatélite, cada microssatélite é sequenciado após a clonagem no vetor pCR4 (Invitrogen) usando protocolos de clonagem de topoisomerase padrão.