Estudo de Bactérias e Inflamação no Intestino (BIG) (BIG)

A hipótese nula é que a resposta clínica à nutrição enteral exclusiva (NEE) e a redução dos marcadores inflamatórios colônicos não estão associadas a uma taxonomia bacteriana característica (composição) e metabólitos (funcionalidade); e que a manutenção de quaisquer alterações bacterianas com nutrição enteral suplementar ( NEE), ao retornar à dieta habitual, não reduz o risco de recidiva da doença.

O desenho do estudo se baseará em trabalhos anteriores, observando as diferenças nas bactérias intestinais (fecais e mucosas) e na atividade metabólica bacteriana em diferentes estágios da atividade da doença. Serão examinadas as alterações na composição bacteriana entre grupos de doenças, entre crianças com doença de Crohn em diferentes tratamentos e entre diferentes locais no intestino. Os biomarcadores da doença de Crohn nas fezes e na urina também serão avaliados por meio da análise de metabólitos bacterianos.

Até um total de 42 crianças com doença de Crohn serão recrutadas. 42 crianças saudáveis ​​também serão recrutadas para fornecer uma amostra fecal e de urina, para mostrar a variedade normal de bactérias intestinais e metabólitos em crianças saudáveis ​​para comparação.

As crianças que se submeteram à colonoscopia, mas não tinham a doença de Crohn, serão usadas como um grupo de comparação para tentar identificar as assinaturas bacterianas da doença de Crohn nas fezes e na urina e como um grupo de controle sem doença de Crohn para comparação de biópsias da mucosa.

Recrutamento Três grupos de crianças participarão deste estudo. A. Crianças submetidas a investigações endoscópicas (colonoscopia) para inflamação colônica, incluindo doença de Crohn [crianças que não apresentam doença de Crohn não participarão do aspecto de acompanhamento (durante o tratamento com EEN) deste estudo].

B. Pacientes previamente diagnosticados com doença de Crohn devem iniciar um curso padrão de 8 semanas de tratamento com EEN devido ao agravamento da doença.

C. Crianças saudáveis ​​não relacionadas a pacientes com doença de Crohn serão usadas como grupo controle.

Grupos A e B: uma amostra inicial de sangue, urina e fezes seguida de mais 5 amostras fecais e de urina ao longo de 12 meses; e informações dietéticas.

[Grupo A também terá 8 biópsias da mucosa tomadas durante a endoscopia de rotina]. Durante o tratamento com EEN (decisão clínica), uma amostra de sangue adicional será solicitada durante a coleta de sangue de rotina no início e no final do tratamento.

Grupo C: será solicitada 1 amostra de urina e fezes.

Todos os grupos terão altura, peso e força de preensão medidos na linha de base. O participante que receber EEN terá este repetido 60 dias após o início do tratamento e 60 dias após o término do tratamento.

Métodos Detalhados Verificação preliminar de saúde por meio de um breve questionário de saúde - informações básicas de saúde, idade, qualquer medicamento.

Amostras de mucosa: em pacientes recém-diagnosticados submetidos a colonoscopia para fins de diagnóstico, 6 amostras adicionais de biópsia de mucosa; 2 do íleo terminal quando possível, 2 do cólon proximal e 2 do cólon distal serão coletados (14-16 são coletados na colonoscopia normal). Outras 2 amostras de biópsia também serão coletadas do duodeno durante a endoscopia digestiva alta.

Informação dietética: consumo alimentar habitual e padrões alimentares avaliados através do Questionário de Frequência Alimentar (QFA) validado; um questionário recordatório alimentar de 24 horas com passagem múltipla de 5 etapas para obter dados sobre a dieta real no momento da amostragem de fezes e urina.

Conformidade com EEN (somente grupos A&B): preenchimento de um breve questionário de conformidade com EEN em 28 dias e 56 dias.

Medicação e História da Doença: informações sobre a atividade da doença, medicação e história médica coletadas de prontuários médicos.

Ensaios de laboratório Diversidade bacteriana: A diversidade bacteriana intestinal e a composição das amostras de fezes serão medidas usando técnicas moleculares, como reação em cadeia da polimerase quantitativa (PCR) do DNA ribossômico bacteriano e sequenciamento de próxima geração (metagenómica). Essas técnicas também serão usadas para observar a composição de bactérias associadas a biópsias de tecido mucoso. As alterações na composição geral das bactérias intestinais usando índices numéricos padrão serão medidas nas 6 amostras fecais coletadas durante o período de 12 meses, bem como entre os grupos.

Metabolismo bacteriano: Um grande número de produtos diferentes do metabolismo bacteriano, como ácidos graxos de cadeia curta, sulfeto e amônia, será medido usando uma variedade de técnicas, incluindo cromatografia gasosa e espectrometria de massa por cromatografia gasosa (GCMS) (metabolômica). O pH fecal, um marcador de fermentação bacteriana, também será medido.

Marcadores de doenças: Outros marcadores de doenças e metabólitos, como calprotectina fecal, serão medidos a partir de amostras fecais.