Snabb SARS-CoV-2 IgG-antikroppstestning hos högriskvårdare (COVID-Antibody)

Singapores, Taiwans och Hongkongs framgångar med att begränsa effekterna av det plötsliga akuta respiratoriska syndromet coronavirus-2 (SARS-CoV-2), även känt som COVID-19, har tillskrivits deras beredskap men mest till implementeringen och distributionen av SARS-CoV-2 snabba diagnostiska tester och upprättande av decentraliserad point-of-care (POC) testning (https://www.nature.com/articles/d41587-020-00010-2). Hittills har frontlinjens svar på SARS-CoV-2-utbrottet varit testning av polymeraskedjereaktion (PCR). PCR är guldstandarden för att diagnostisera ett smittämne, och det har fördelen att de primrar som behövs för sådana tester kan produceras med relativ hastighet så snart den virala sekvensen är känd.

De första kvantitativa omvänt transkriptasbaserade PCR-testerna (RT-PCR) för att detektera SARS-CoV2 designades och distribuerades i januari av Världshälsoorganisationen (WHO), strax efter att viruset identifierats. Testprotokollet är dock komplext och dyrt och lämpar sig främst för stora, centraliserade diagnostiska laboratorier. Tester tar vanligtvis 4-6 timmar att slutföra, men det logistiska kravet på att skicka kliniska prover innebär att handläggningstiden i bästa fall är 24 timmar. Ett nytt snabbt PCR-test (45 min) från Cepheid har godkänts av U.S. Food and Drug Administration den 21 mars med tillgänglighet i slutet av månaden. Snabba POC-tester behövs också för att påskynda det kliniska beslutsfattandet och för att ta bort en del av arbetsbördan från centraliserade testlaboratorier. Viktigast av allt är att det aktuella läget i Indiana University Health System, liksom många runt om i landet, är att sjukvårdspersonal, inklusive från akuten och ICU, för närvarande inte kan ta emot adekvata tester genom befintliga faciliteter. Det värsta är att deras tillgång till lämplig personlig skyddsutrustning (PPE) har varit begränsad, vilket ökar deras exponeringsrisk och orsakar en betydande mängd stress och oro för vårdgivare i frontlinjen över hela landet.

Tillbaka till Singapore-upplevelsen har de använt immunanalyser som kan ge historisk information om viral exponering, såväl som diagnostiska bevis. De utnyttjade antikropp-antigenigenkänning, antingen genom att använda monoklonala antikroppar (mAbs) för att detektera virala antigener i kliniska prover eller genom att använda klonade virala antigener för att detektera patientantikroppar riktade mot viruset. Analysformatet för lateralt flöde - i huvudsak en oljesticka innesluten i en kassett - innehåller infångningsreagenserna (antingen en mAb riktad mot ett viralt antigen eller ett viralt antigen som känns igen av patienternas antikroppar) immobiliserade på definierade platser på ett nitrocellulosamembran, liksom som märkta detektor-mAbs som känner igen samma mål. Ett positivt resultat, som utlöses av bindning mellan analyten och infångande mAb och bindning av detektorns mAb, är synligt som en färgad linje. Två droppar blod från ett nålstick räcker för att upptäcka ett virus. De är i huvudsak samma som hemmagraviditetssatser. Flera av dessa analyser finns tillgängliga i Asien, och de flesta europeiska länder har också använt dem. I USA har RayBiotech utvecklat ett sådant liknande test med hjälp av kunskap från de asiatiska testerna (https://www.raybiotech.com/covid-19-igm-igg-rapid-test-kit/). Denna produkt är CE-märkt och certifierad för diagnostisk användning i EU. Ansökan om FDA nödtillstånd för tester lämnades in den 16 mars 2020. För närvarande har FDA endast godkänt PCR-tester. Inga sidoflödestester har godkänts den 23 mars 2020. Detta laterala flödestest kan dock användas lagligt i USA, för in vitro-diagnostik, som ett POC-test när det administreras av en legitimerad läkare. Dessa kit har utvecklats internt av Ray Biotech och validerats med hjälp av prover tagna på sjukhus från patienter som visar kliniska symtom i Guangzhou Kina (alla bekräftade via PCR). Nuvarande lager på 10 000 kit fylls på dagligen hos RayBiotech, med ansträngningar att tiodubbla produktionen inom nästa vecka. CE-certifikatet finns här: https://www.raybiotech.com/files/images/CG-COV_CE-Certificates.jpg.

Baserat på de positiva erfarenheterna från Singapore, Taiwan, Hongkong och för att stävja den snabba spridningen av viruset i USA, föreslår vi att POC SARS-CoV-2 IgG Antibody används i högriskvårdspersonal med eller utan symtom, tidigare karantän eller inte. Vi antar faktiskt att förekomsten av serokonversion bland akutpersonal och intensivvårdspersonal är hög och högre än vad nuvarande modeller förutspår och att flera fall är asymtomatiska eller med milda symtom.

Det finns två ytterligare fördelar med att testa serokonvertering.

1. Även om det inte finns några officiella rapporter hör och ser vi tydligt selfies av ångest, stress och utmattning från våra kollegor i frontlinjen. Så för vårdpersonalen att veta att de har serokonverterat, kommer det att hjälpa dem att bli mer säkra på att de nu är skyddade och kan arbeta under säkrare förhållanden eftersom det nyligen har visat sig att återinfektion inte kunde inträffa i SARS-CoV-2-infekterade rhesusmakaker https: //www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.03.13.990226v1.
2. Vårdpersonalen representerar en idealisk pool av givare för konvalescent plasma på grund av deras engagemang och det faktum att de vanligtvis har testats för att ge blod eller för närvarande är blodgivare. FDA har just godkänt ett huvudprotokoll för insamling och administrering av konvalescent plasma: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/investigational-new-drug-ind-or-device-exemption-ide-process-cber /investigational-covid-19-konvalescent-plasma-nöd-inds

Sammanfattningsvis, "du kan inte bekämpa en brand med ögonbindel, och vi kan inte stoppa den här pandemin om vi inte vet vem som är smittad." (Generaldirektör för Världshälsoorganisationen, 16 mars 2020).

Om det lyckas och valideras, hoppas vi att snabbt skala upp det för att föreslå snabba SARS-CoV-2 IgG-antikroppstester för den allmänna befolkningen, vilket har gjorts i länder som nästan inte har haft några dödsfall på grund av covid-19.