Szybkie badanie przeciwciał SARS-CoV-2 IgG u pracowników służby zdrowia wysokiego ryzyka (COVID-Antibody)

Sukces Singapuru, Tajwanu i Hongkongu w ograniczaniu wpływu zespołu nagłej ostrej niewydolności oddechowej koronawirusa-2 (SARS-CoV-2), znanego również jako COVID-19, przypisuje się ich przygotowaniu, ale przede wszystkim wdrożeniu i dystrybucji szybkich testów diagnostycznych SARS-CoV-2 i utworzenie zdecentralizowanych testów w punktach opieki (POC) (https://www.nature.com/articles/d41587-020-00010-2). Jak dotąd pierwszą linią reakcji na epidemię SARS-CoV-2 były testy reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). PCR jest złotym standardem w diagnozowaniu czynnika zakaźnego i ma tę zaletę, że startery potrzebne do takich testów można wytworzyć ze względną szybkością, gdy tylko znana jest sekwencja wirusowa.

Pierwsze ilościowe testy PCR oparte na odwrotnej transkryptazie (RT-PCR) do wykrywania SARS-CoV2 zostały zaprojektowane i rozprowadzone w styczniu przez Światową Organizację Zdrowia (WHO), wkrótce po zidentyfikowaniu wirusa. Protokół testu jest jednak złożony i kosztowny i nadaje się głównie do dużych, scentralizowanych laboratoriów diagnostycznych. Testy zwykle trwają od 4 do 6 godzin, ale logistyczne wymagania związane z wysyłką próbek klinicznych oznaczają, że czas realizacji wynosi w najlepszym przypadku 24 godziny. Nowy szybki test PCR (45 min) firmy Cepheid został zatwierdzony przez amerykańską Agencję ds. Żywności i Leków 21 marca i będzie dostępny pod koniec miesiąca. Szybkie testy POC są również potrzebne do przyspieszenia podejmowania decyzji klinicznych i odciążenia scentralizowanych laboratoriów badawczych. Co najważniejsze, obecny stan systemu opieki zdrowotnej Indiana University, a także wielu innych w całym kraju, polega na tym, że pracownicy służby zdrowia, w tym z ostrych dyżurów i OIOM, nie są obecnie w stanie przejść odpowiednich testów w istniejących placówkach. Co najgorsze, ich dostęp do odpowiedniego sprzętu ochrony osobistej (PPE) został ograniczony, co zwiększyło ryzyko narażenia i spowodowało znaczny stres i niepokój wśród świadczeniodawców pierwszej linii opieki zdrowotnej w całym kraju.

Wracając do doświadczeń Singapuru, wykorzystali testy immunologiczne, które mogą dostarczyć historycznych informacji o ekspozycji na wirusy, a także dowodów diagnostycznych. Wykorzystali rozpoznawanie przeciwciała-antygenu, używając przeciwciał monoklonalnych (mAb) do wykrywania antygenów wirusowych w próbkach klinicznych lub sklonowanych antygenów wirusowych do wykrywania przeciwciał pacjentów skierowanych przeciwko wirusowi. Format testu z przepływem bocznym – zasadniczo prętowy wskaźnik poziomu zamknięty w kasecie – zawiera odczynniki wychwytujące (albo mAb skierowane na antygen wirusowy, albo antygen wirusowy rozpoznawany przez przeciwciała pacjentów) unieruchomione w określonych miejscach na membranie nitrocelulozowej, jak również jako znakowane detektorowe mAb, które rozpoznają ten sam cel. Wynik dodatni, który jest wywoływany przez wiązanie między analitem i wychwytywanym mAb oraz wiązanie przez mAb detektora, jest widoczny jako kolorowa linia. Do wykrycia wirusa wystarczą dwie krople krwi z nakłucia szpilki. Są zasadniczo takie same jak domowe zestawy ciążowe. Kilka z tych testów jest dostępnych w Azji, a większość krajów europejskich również z nich korzysta. W USA RayBiotech opracował taki podobny test, wykorzystując wiedzę z testów azjatyckich (https://www.raybiotech.com/covid-19-igm-igg-rapid-test-kit/). Ten produkt posiada oznaczenie CE i jest certyfikowany do użytku diagnostycznego w UE. Wniosek o zezwolenie FDA na stosowanie testów w sytuacjach awaryjnych został złożony 16 marca 2020 r. W tej chwili FDA zatwierdziła tylko testy PCR. Na dzień 23 marca 2020 r. nie zatwierdzono żadnych testów przepływu bocznego. Jednak ten test przepływu bocznego może być legalnie stosowany w Stanach Zjednoczonych do celów diagnostycznych in vitro jako test POC, jeśli jest przeprowadzany przez licencjonowanego lekarza. Zestawy te zostały opracowane we własnym zakresie przez firmę Ray Biotech i zweryfikowane przy użyciu próbek pobranych w szpitalu od pacjentów wykazujących objawy kliniczne w Guangzhou w Chinach (wszystkie potwierdzone metodą PCR). Obecne zapasy 10 000 zestawów są uzupełniane codziennie w RayBiotech, z wysiłkami zmierzającymi do dziesięciokrotnego zwiększenia produkcji w ciągu następnego tygodnia. Certyfikat CE można znaleźć tutaj: https://www.raybiotech.com/files/images/CG-COV_CE-Certificates.jpg.

W oparciu o pozytywne doświadczenia z Singapuru, Tajwanu, Hongkongu oraz w celu ograniczenia szybkiego rozprzestrzeniania się wirusa w USA proponujemy stosowanie przeciwciała POC SARS-CoV-2 IgG u pracowników służby zdrowia wysokiego ryzyka, z objawami lub bez, uprzednio poddanych kwarantannie albo nie. Rzeczywiście, stawiamy hipotezę, że częstość występowania serokonwersji wśród pracowników służby zdrowia na ostrym dyżurze i OIOM jest wysoka i wyższa niż przewidują obecne modele, a kilka przypadków przebiega bezobjawowo lub z łagodnymi objawami.

Istnieją dwie dodatkowe korzyści z testowania serokonwersji.

1. Chociaż nie ma oficjalnych raportów, wyraźnie słyszymy i widzimy selfie wyrażające niepokój, stres i wyczerpanie od naszych kolegów z pierwszej linii. Tak więc dla pracowników służby zdrowia wiedza o serokonwersji pomoże im zyskać większą pewność, że są teraz chronieni i mogą pracować w bezpieczniejszych warunkach, ponieważ niedawno wykazano, że reinfekcja nie może wystąpić u makaków rezus zakażonych SARS-CoV-2 https: //www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.03.13.990226v1.
2. Pracownicy służby zdrowia stanowią idealną pulę dawców osocza rekonwalescentów ze względu na swoje zaangażowanie oraz fakt, że zwykle byli przebadani pod kątem oddania krwi lub są obecnie krwiodawcami. FDA właśnie zatwierdziła główny protokół pobierania i podawania osocza ozdrowieńców: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/investigational-new-drug-ind-or-device-exemption-ide-process-cber /investigational-covid-19-convalescent-plasma-emergency-inds

Podsumowując, „nie można walczyć z ogniem z zasłoniętymi oczami i nie możemy powstrzymać tej pandemii, jeśli nie wiemy, kto jest zarażony”. (Dyrektor Generalny Światowej Organizacji Zdrowia, 16 marca 2020 r.).

Jeśli się powiedzie i zostanie zwalidowany, będziemy mieć nadzieję na szybkie zwiększenie skali i zaproponowanie szybkiego testowania przeciwciał SARS-CoV-2 IgG w populacji ogólnej, tak jak to zrobiono w krajach, w których prawie nie odnotowano zgonów z powodu COVID-19.